摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 综述 | 第8-14页 |
1 线粒体基因转录 | 第8-10页 |
·线粒体功能和研究意义 | 第8页 |
·线粒体基因转录研究进展 | 第8-9页 |
·裂殖酵母线粒体基因转录研究进展 | 第9-10页 |
2 分子伴侣Hsp60与线粒体基因转录 | 第10-12页 |
·Hsp60功能和研究意义 | 第10-11页 |
·Hsp60和线粒体转录因子Mtf1相互作用研究进展 | 第11-12页 |
3 ETB介绍 | 第12页 |
4 本文研究意义 | 第12-14页 |
第二章 分子伴侣Hsp60与线粒体转录因子Mtf1体内相互作用 | 第14-27页 |
1 材料和仪器 | 第14-18页 |
·质粒 | 第14-15页 |
·引物序列 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·酵母转化实验试剂 | 第15页 |
·串联亲和纯化(TAP)实验试剂 | 第15-17页 |
·SDS-PAGE相关试剂 | 第17-18页 |
·仪器 | 第18页 |
2 方法 | 第18-23页 |
·菌株的构建 | 第18-20页 |
·串联亲和纯化(TAP) | 第20-22页 |
·蛋白质的检测与验证 | 第22-23页 |
·质谱检测 | 第23页 |
3 结果 | 第23-25页 |
·TAP实验结果与分析 | 第23-24页 |
·MALDI-TOF MS实验结果与分析 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-27页 |
第三章 分子伴侣Hsp60与线粒体转录因子Mtf1体外相互作用 | 第27-41页 |
1. 材料和仪器 | 第27-29页 |
·质粒 | 第27页 |
·引物序列 | 第27-28页 |
·培养基 | 第28页 |
·其它试剂 | 第28-29页 |
·仪器 | 第29页 |
2. 方法 | 第29-36页 |
·质粒的构建 | 第29-31页 |
·重组蛋白的表达纯化 | 第31-32页 |
·GST-pull down实验 | 第32页 |
·表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance,SPR) | 第32-36页 |
3. 结果 | 第36-39页 |
·体外GST-pull down实验结果与分析 | 第36-37页 |
·表面等离子共振(SPR)实验结果与分析 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 ETB体外抑制实验 | 第41-55页 |
1. 材料和仪器 | 第41-44页 |
·Real-Time PCR引物序列 | 第41-42页 |
·培养基 | 第42-43页 |
·其它试剂 | 第43-44页 |
·仪器 | 第44页 |
2. 方法 | 第44-49页 |
·GST-pull down实验 | 第44-45页 |
·裂殖酵母基因组DNA抽提 | 第45页 |
·裂殖酵母总RNA的抽提 | 第45-47页 |
·cDNA的合成 | 第47-48页 |
·实时荧光定量PCR实验 | 第48-49页 |
3 结果 | 第49-53页 |
·ETB体外抑制实验结果和分析 | 第49-50页 |
·ETB对裂殖酵母细胞生长的影响 | 第50-51页 |
·ETB抑制线粒体基因的转录 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
第五章 展望 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |