中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
引言 | 第12-14页 |
上篇文献综述 | 第14-38页 |
第一章 疫霉菌生长发育过程中的信号识别与传递 | 第15-22页 |
1 疫霉菌的生活史 | 第15-16页 |
2 疫霉菌的分化和分化诱导因子 | 第16-22页 |
·孢子囊形成 | 第16-17页 |
·孢子囊割裂和游动孢子的形成 | 第17-19页 |
·游动孢子趋化性、休止和休止胞萌发 | 第19-20页 |
·卵孢子的形成 | 第20-22页 |
第二章 G蛋白及其相关信号途径对于卵菌发育和致病过程的作用 | 第22-26页 |
1 G蛋白信号途径 | 第22页 |
2 G蛋白信号途径的研究进展 | 第22-25页 |
·人类和哺乳动物基因组中的G蛋白信号途径 | 第22-23页 |
·植物基因组中的G蛋白信号 | 第23页 |
·真菌中的G蛋白信号途径 | 第23-25页 |
3 卵菌的G蛋白信号途径及其研究意义 | 第25-26页 |
第三章 基因沉默技术在疫霉基因功能研究方面的应用 | 第26-29页 |
1 基因沉默 | 第26-27页 |
2 卵菌基因沉默技术的发展 | 第27-29页 |
参考文献 | 第29-38页 |
下篇 研究内容 | 第38-110页 |
第一章 大豆疫霉G蛋白效应因子和钙离子结合蛋白预测与分析 | 第39-55页 |
1 材料与方法 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-52页 |
·已报道的植物与丝状真菌的G蛋白信号途径 | 第41-42页 |
·大豆疫霉的G蛋白效应因子 | 第42-49页 |
·G蛋白和钙信号途径的EST数据分析 | 第49-52页 |
3 讨论 | 第52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
第二章 大豆疫霉G蛋白和钙信号途径的转录分析 | 第55-75页 |
1 材料与方法 | 第56-63页 |
·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得 | 第56-57页 |
·饥饿和氧化压力条件下大豆疫霉菌丝的获得 | 第57页 |
·大豆与大豆疫霉的互作早期(0-6h)侵染菌丝的获得 | 第57页 |
·候选基因的选择 | 第57-60页 |
·半定量RT-PCR | 第60页 |
·Southern杂交 | 第60-63页 |
2 结果与分析 | 第63-71页 |
·营养菌丝中的基因表达情况 | 第63-64页 |
·饥饿条件下的基因表达情况 | 第64页 |
·孢子囊形成阶段的基因表达情况 | 第64-65页 |
·氧化压力对基因表达的影响 | 第65页 |
·游动孢子阶段的基因表达情况 | 第65页 |
·大豆疫霉与大豆互作早期的基因表达情况 | 第65-66页 |
·Ga和Gβ基因的序列特征和拷贝数 | 第66-71页 |
·Ga和Gβ在无性发育阶段的表达情况 | 第71页 |
3 讨论 | 第71-73页 |
·G蛋白的α和β亚基 | 第71-72页 |
·饥饿环境和产孢环境的差异 | 第72页 |
·钙信号途径对于大豆疫霉发育和致病起着重要的作用 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
第三章 G蛋白a亚基在大豆疫霉游动孢子趋化性中的作用研究 | 第75-93页 |
1 材料与方法 | 第77-80页 |
·基因沉默转化载体的构建 | 第77页 |
·大豆疫霉遗传转化方案 | 第77-78页 |
·基因沉默转化子的筛选 | 第78页 |
·游动孢子表型测验 | 第78-79页 |
·趋化性实验 | 第79页 |
·致病性测验 | 第79-80页 |
2 结果与分析 | 第80-86页 |
·大豆疫霉Ga基因沉默突变体的获得 | 第80-81页 |
·大豆疫霉Ga基因沉默突变体的表型分析 | 第81-86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
·基因沉默作为一种研究手段 | 第86-87页 |
·PsGPA1对于游动孢子的休止和萌发至关重要 | 第87页 |
·游动孢子的游动能力和趋化性依赖于G蛋白信号途径 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-93页 |
第四章 Ga结合蛋白的筛选与受Ga调控的信号途径分析 | 第93-110页 |
1 材料与方法 | 第95-99页 |
·供试菌株及培养条件 | 第95页 |
·含bait酵母菌株的获得 | 第95页 |
·cDNA文库的构建 | 第95-97页 |
·酵母双杂交 | 第97页 |
·Macroarray分析 | 第97-99页 |
·RT-PCR分析 | 第99页 |
2 结果与分析 | 第99-106页 |
·酵母双杂交 | 第99-105页 |
·Macroarray分析 | 第105-106页 |
3 讨论 | 第106-107页 |
·G蛋白与钙信号途径的关系 | 第106-107页 |
·G蛋白与RGS | 第107页 |
参考文献 | 第107-110页 |
攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |