摘要(中文) | 第1-10页 |
摘要(英文) | 第10-12页 |
第一部分 前言 | 第12-18页 |
·钙离子(Ca~(2+)) | 第12页 |
·双孔通道(TPC1) | 第12-16页 |
·研究的目的和意义 | 第16-18页 |
第二部分 材料和方法 | 第18-42页 |
·实验材料 | 第18页 |
·实验仪器设备和耗材 | 第18页 |
·实验试剂和溶液 | 第18-26页 |
·基因组提取和电泳 | 第18-19页 |
·质粒提取 | 第19-20页 |
·RNA 提取 | 第20-21页 |
·甲醛变性凝胶RNA 电泳 | 第21-22页 |
·RNA 的反转录和PCR 扩增 | 第22-23页 |
·桐花树AcTPC1 基因的原核表达 | 第23页 |
·SDS-PAGE | 第23-24页 |
·酵母CCH1 基因敲除和AcTPC1 功能互补实验 | 第24-26页 |
·实验方法 | 第26-42页 |
·基因组DNA 提取方法 | 第26页 |
·基因组DNA 的电泳 | 第26页 |
·基因组TPC1 基因片段的扩增 | 第26-27页 |
·切胶回收PCR 产物 | 第27-28页 |
·T-A 克隆 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第28页 |
·重组质粒转化大肠杆菌感受态 | 第28-29页 |
·大肠杆菌质粒DNA 的提取(碱裂解法) | 第29页 |
·测序 | 第29页 |
·桐花树RNA 的提取 | 第29-30页 |
·RNA 的电泳 | 第30-31页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第31页 |
·PCR 扩增TPC1 基因片段 | 第31页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
·桐花树TPC1 的3’RACE | 第32-33页 |
·桐花树TPC1 的5’RACE | 第33-36页 |
·RT-PCR 扩增全长AcTPC1 基因 | 第36页 |
·桐花树AcTPC1 基因的原核表达 | 第36-37页 |
·SDS-PAGE 分析AcTPC1 蛋白 | 第37-38页 |
·酵母CCH1 基因敲除 | 第38-40页 |
·AcTPC1 功能互补实验 | 第40-42页 |
第三部分 结果、分析和讨论 | 第42-74页 |
·基因组DNA 提取结果 | 第42-44页 |
·基因组 TPC1 基因片段的 PCR 扩增 | 第44-46页 |
·基因组TPC1 基因片段的测序结果 | 第46-52页 |
·桐花树RNA 的提取结果 | 第52-54页 |
·PCR 扩增TPC1 基因片段 | 第54-57页 |
·桐花树 TPC1 基因片段的生物学分析 | 第57-59页 |
·3’RACE 扩增桐花树TPC1 基因下游 | 第59-62页 |
·5’RACE 扩增桐花树TPC1 基因上游 | 第62-64页 |
·RT-PCR 扩增桐花树全长AcTPC1 基因 | 第64-65页 |
·桐花树 AcTPC1 基因的生物信息学分析 | 第65-68页 |
·SDS-PAGE 分析AcTPC1 蛋白 | 第68-70页 |
·酵母CCH1 基因敲除和AcTPC1 功能互补实验 | 第70-74页 |
第四部分 总结和展望 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-78页 |