| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 1 绪论 | 第14-42页 |
| ·引言 | 第14-15页 |
| ·糖尿病与胰岛素信号传导系统 | 第15-26页 |
| ·糖尿病简述 | 第15-19页 |
| ·胰岛素信号传导系统 | 第19-24页 |
| ·胰岛素抵抗与胰岛素信号传导系统 | 第24-26页 |
| ·糖尿病动物模型 | 第26-28页 |
| ·蛋白质酪氨酸硝化对磷酸化的影响 | 第28-33页 |
| ·蛋白质酪氨酸磷酸化 | 第28-30页 |
| ·蛋白质酪氨酸硝化 | 第30-32页 |
| ·酪氨酸硝化对磷酸化的影响 | 第32-33页 |
| ·蛋白质磷酸化检测方法 | 第33-40页 |
| ·蛋白质磷酸化的检测 | 第34-38页 |
| ·磷酸化蛋白质和肽段的富集 | 第38-39页 |
| ·磷酸化蛋白质和肽段的分离 | 第39-40页 |
| ·本文的研究目的和主要内容 | 第40-42页 |
| 2 大鼠肝脏质膜中胰岛素受体及底物磷酸化的研究 | 第42-66页 |
| ·引言 | 第42-44页 |
| ·材料和方法 | 第44-51页 |
| ·试剂和仪器 | 第44-46页 |
| ·实验动物 | 第46-47页 |
| ·大鼠肝脏IR 的制备 | 第47页 |
| ·溶解受体的凝集素亲和层析 | 第47页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第47-48页 |
| ·~(31)P－NMR 样品制备 | 第48页 |
| ·~(31)P-NMR 样品测定 | 第48页 |
| ·受体自磷酸化反应的免疫印迹法测定 | 第48-50页 |
| ·多肽合成 | 第50页 |
| ·底物肽的磷酸化测定 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-60页 |
| ·肝脏IR 经过亲和层析柱纯化后的洗脱曲线 | 第51页 |
| ·胰岛素受体蛋白质~(31)P-NMR | 第51-52页 |
| ·ATP 的~(31)P-NMR 谱 | 第52-53页 |
| ·用~(31)P-NMR 谱法检测不同条件对IR 的自磷酸化的影响 | 第53-56页 |
| ·胰岛素刺激IR 自磷酸化的~(31)P-NMR 谱测定 | 第56-57页 |
| ·胰岛素刺激IR 自磷酸化的免疫印迹法检测 | 第57-58页 |
| ·凝集素亲和层析纯化IR 的自磷酸化测定 | 第58-59页 |
| ·拟IR51 多肽硝化对磷酸化影响的~(31)P-NMR 测定 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 3 病理条件下胰岛素信号系统中受体性质和蛋白质酪氨酸磷酸化的研究 | 第66-87页 |
| ·引言 | 第66-67页 |
| ·材料和方法 | 第67-76页 |
| ·试剂和仪器 | 第67-69页 |
| ·糖尿病大鼠造模 | 第69-70页 |
| ·提取肝脏细胞胰岛素受体 | 第70-71页 |
| ·肝细胞膜蛋白质浓度的测定 | 第71页 |
| ·pH 值对胰岛素与肝细胞膜IR 结合的影响 | 第71-72页 |
| ·胰岛素与胰岛素受体结合活性的测定 | 第72-74页 |
| ·胰岛素与胰岛素受体结合Scatchard 分析 | 第74页 |
| ·胰岛素受体巯基含量测定 | 第74-75页 |
| ·免疫印迹测定IR 酪氨酸自磷酸化 | 第75页 |
| ·~(31)P－NMR 定量测定样品的制备 | 第75页 |
| ·~(31)P－NMR 测定条件 | 第75页 |
| ·用ONOO-处理后胰岛素受体自磷酸化 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-83页 |
| ·糖尿病模型鼠体重和血糖值的变化 | 第76页 |
| ·糖尿病模型鼠肝组织细胞膜巯基含量的变化 | 第76-78页 |
| ·pH 对~(125)I-胰岛素与IR 结合的影响 | 第78页 |
| ·~(125)I-胰岛素与胰岛素受体结合的Scathard 曲线 | 第78-80页 |
| ·用~(31)P-NMR 谱法检测四氧嘧啶诱导的糖尿病对胰岛素激活IR 自磷酸化的影响 | 第80-81页 |
| ·通过免疫印迹体外测定胰岛素受体自磷酸化 | 第81-82页 |
| ·硝化对IR 自磷酸化的影响 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·本章小结 | 第85-87页 |
| 4 四氧嘧啶对大鼠肝中胰岛素信号传导分子基因表达和糖原含量的影响 | 第87-105页 |
| ·引言 | 第87-89页 |
| ·材料和方法 | 第89-95页 |
| ·试剂和仪器 | 第89-90页 |
| ·诱导实验糖尿病模型 | 第90页 |
| ·逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析 | 第90-92页 |
| ·制备胰岛素受体、测定蛋白质浓度 | 第92页 |
| ·凝胶电泳和免疫印迹法 | 第92-93页 |
| ·糖原含量测定 | 第93页 |
| ·统计分析 | 第93-95页 |
| ·结果 | 第95-100页 |
| ·四氧嘧啶对大鼠肝脏胰岛素受体基因表达的影响 | 第95-96页 |
| ·四氧嘧啶对大鼠肝脏胰岛素受体蛋白质表达的影响 | 第96页 |
| ·四氧嘧啶对大鼠肝脏 IRS1 和 IRS2 基因表达的影响 | 第96-97页 |
| ·四氧嘧啶对大鼠肝脏PI(3)K 基因表达的影响 | 第97-98页 |
| ·四氧嘧啶对大鼠肝脏GK 和GLUT2 基因表达的影响 | 第98-99页 |
| ·四氧嘧啶对肝糖原含量的影响 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-103页 |
| ·本章小结 | 第103-105页 |
| 5 荧光定量PCR 研究大鼠肌肉组织基因表达 | 第105-117页 |
| ·引言 | 第105-106页 |
| ·材料和方法 | 第106-110页 |
| ·主要试剂 | 第106-108页 |
| ·实验动物和糖尿病造模 | 第108页 |
| ·大鼠肌肉组织的PCR 分析实验 | 第108-110页 |
| ·数据统计分析 | 第110页 |
| ·结果 | 第110-114页 |
| ·IR、GAPDH、IRS1、PI(3)K 和 GLUT4 的荧光扩增曲线 | 第110-113页 |
| ·IR、GAPDH、IRS1、PI(3)K 和 GLUT4 的 real-time PCR 分析 | 第113-114页 |
| ·讨论 | 第114-116页 |
| ·本章小结 | 第116-117页 |
| 6 全文总结 | 第117-120页 |
| ·本论文的主要研究结果 | 第117-118页 |
| ·本论文的创新之处 | 第118-119页 |
| ·展望 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-140页 |
| 附录1 攻读博士学位期间完成的主要论文 | 第140-141页 |
| 附录2 主要缩写词表(按字母顺序) | 第141-142页 |
