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基因枪介导的棉花遗传转化及后代遗传分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-11页
2 材料和方法第11-21页
   ·材料和仪器第11-12页
     ·植物材料第11页
     ·酶及生化试剂第11页
     ·质粒与基因第11页
     ·主要仪器第11-12页
   ·试验方法第12-21页
     ·培养基类型与配制第12-13页
     ·质粒DNA的提取与纯化第13-14页
     ·处理种子及无菌苗的培养方法第14页
     ·基因枪的转化方法第14-15页
     ·发芽培养基第15页
     ·茎尖剥离第15页
     ·碳源与茎尖分生组织生长的关系第15页
     ·活性炭(AC)与茎尖培养效果的关系第15页
     ·含有不同外源激素的培养基与茎尖培养效果的关系第15-16页
     ·轰击距离与轰击次数第16页
     ·茎尖的恢复培养与抗性筛选第16页
     ·抗性植株检测第16-19页
     ·T_1转化植株的PCR检测和遗传分析第19页
     ·T_1转化植株的Southern斑点杂交第19页
     ·T_2代转化植株的PCR检测和Southern斑点检测第19页
     ·T_2根系分泌植酸酶的测定第19-21页
3 结果与分析第21-31页
   ·发芽培养基对获得整齐一致的幼苗的影响第21页
   ·不同品种茎尖培养的成苗比较第21页
   ·碳源对茎尖分生组织生长的影响第21-22页
   ·活性碳对茎尖培养的影响第22页
   ·外源激素对茎尖培养的影响第22-23页
   ·不同品种获得茎尖分生组织难易比较第23页
   ·基因枪轰击距离和次数对转化率的影响第23-24页
   ·基因枪轰击后的茎尖恢复培养第24页
   ·卡那霉素抗性植株的筛选第24页
     ·卡那霉素抗性植株的筛选第24页
     ·卡那霉素转化过程中非转化苗的表现第24页
   ·不同基因型品种对转化效率的影响第24-25页
   ·卡那抗性植株的分子检测第25-26页
     ·PCR检测第25页
     ·PCR-Southern检测第25-26页
   ·阳性转化植株的嫁接第26页
   ·当代(T_0)转化植株外源基因的Southern检测第26-27页
   ·T_1代植株的分子检测和遗传分析第27-28页
   ·T_1代转化植株根系分泌植酸酶的活性分析第28-29页
   ·T_2代植株的PCR分析和Southern检测第29页
     ·PCR分析第29页
     ·斑点杂交第29页
   ·T_2代转化植株根系分泌植酸酶的活性分析第29-31页
4 讨论第31-34页
   ·关于棉花无菌苗的培养第31页
   ·转化茎尖的培养体系和生长第31-32页
   ·转基因植株后代的遗传分析第32-33页
   ·T_1和T_2代转化植株根系分泌植酸酶的活性第33-34页
5 结论第34-35页
参考文献第35-40页
在读期间发表的学术论文第40-41页
作者简历第41-42页
致谢第42-43页
版图说明第43-44页
版图第44-46页
附表 磷标准曲线第46页

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