摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-11页 |
2 材料和方法 | 第11-21页 |
·材料和仪器 | 第11-12页 |
·植物材料 | 第11页 |
·酶及生化试剂 | 第11页 |
·质粒与基因 | 第11页 |
·主要仪器 | 第11-12页 |
·试验方法 | 第12-21页 |
·培养基类型与配制 | 第12-13页 |
·质粒DNA的提取与纯化 | 第13-14页 |
·处理种子及无菌苗的培养方法 | 第14页 |
·基因枪的转化方法 | 第14-15页 |
·发芽培养基 | 第15页 |
·茎尖剥离 | 第15页 |
·碳源与茎尖分生组织生长的关系 | 第15页 |
·活性炭(AC)与茎尖培养效果的关系 | 第15页 |
·含有不同外源激素的培养基与茎尖培养效果的关系 | 第15-16页 |
·轰击距离与轰击次数 | 第16页 |
·茎尖的恢复培养与抗性筛选 | 第16页 |
·抗性植株检测 | 第16-19页 |
·T_1转化植株的PCR检测和遗传分析 | 第19页 |
·T_1转化植株的Southern斑点杂交 | 第19页 |
·T_2代转化植株的PCR检测和Southern斑点检测 | 第19页 |
·T_2根系分泌植酸酶的测定 | 第19-21页 |
3 结果与分析 | 第21-31页 |
·发芽培养基对获得整齐一致的幼苗的影响 | 第21页 |
·不同品种茎尖培养的成苗比较 | 第21页 |
·碳源对茎尖分生组织生长的影响 | 第21-22页 |
·活性碳对茎尖培养的影响 | 第22页 |
·外源激素对茎尖培养的影响 | 第22-23页 |
·不同品种获得茎尖分生组织难易比较 | 第23页 |
·基因枪轰击距离和次数对转化率的影响 | 第23-24页 |
·基因枪轰击后的茎尖恢复培养 | 第24页 |
·卡那霉素抗性植株的筛选 | 第24页 |
·卡那霉素抗性植株的筛选 | 第24页 |
·卡那霉素转化过程中非转化苗的表现 | 第24页 |
·不同基因型品种对转化效率的影响 | 第24-25页 |
·卡那抗性植株的分子检测 | 第25-26页 |
·PCR检测 | 第25页 |
·PCR-Southern检测 | 第25-26页 |
·阳性转化植株的嫁接 | 第26页 |
·当代(T_0)转化植株外源基因的Southern检测 | 第26-27页 |
·T_1代植株的分子检测和遗传分析 | 第27-28页 |
·T_1代转化植株根系分泌植酸酶的活性分析 | 第28-29页 |
·T_2代植株的PCR分析和Southern检测 | 第29页 |
·PCR分析 | 第29页 |
·斑点杂交 | 第29页 |
·T_2代转化植株根系分泌植酸酶的活性分析 | 第29-31页 |
4 讨论 | 第31-34页 |
·关于棉花无菌苗的培养 | 第31页 |
·转化茎尖的培养体系和生长 | 第31-32页 |
·转基因植株后代的遗传分析 | 第32-33页 |
·T_1和T_2代转化植株根系分泌植酸酶的活性 | 第33-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-40页 |
在读期间发表的学术论文 | 第40-41页 |
作者简历 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
版图说明 | 第43-44页 |
版图 | 第44-46页 |
附表 磷标准曲线 | 第46页 |