| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 1 聚羟基脂肪酸酯的简介 | 第14-29页 |
| ·PHA 的研究历史 | 第14页 |
| ·PHA 的结构及分类 | 第14-16页 |
| ·PHB 的结构及理化性质 | 第16-17页 |
| ·PHB 的生物合成 | 第17-21页 |
| ·合成PHB 的微生物 | 第17-18页 |
| ·合成PHB 的碳源 | 第18页 |
| ·合成酶(PHA synthases,PhaC) | 第18-20页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯相关代谢酶简介 | 第18-19页 |
| ·PHA 合成酶的结构 | 第19-20页 |
| ·PHB 的代谢合成途径 | 第20-21页 |
| ·PHB 的主要生产途径 | 第21-23页 |
| ·利用微生物或组建基因工程菌发酵生产 | 第21-22页 |
| ·利用活性污泥生产和提取PHB | 第22页 |
| ·利用转基因植物生产PHB | 第22-23页 |
| ·化学法合成PHB | 第23页 |
| ·微生物发酵生产PHB 的研究现状 | 第23-25页 |
| ·国外PHB 发酵生产研究概况 | 第24页 |
| ·国内PHB 研究概况 | 第24-25页 |
| ·PHB 的提取 | 第25页 |
| ·PHB 的检测方法 | 第25-28页 |
| ·染色法 | 第25-26页 |
| ·重量分析法 | 第26页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第26页 |
| ·气相色谱法(GC) | 第26-27页 |
| ·核磁共振法(NMR) | 第27页 |
| ·PHA 的傅立叶红外光谱((FT-IR)分析方法 | 第27页 |
| ·二维傅立叶红外光谱学技术(2D FT—IR) | 第27-28页 |
| ·PHB 的应用 | 第28-29页 |
| ·PHB 在医药领域中的应用 | 第28页 |
| ·PHB 在组织工程的应用 | 第28-29页 |
| ·在工农业上的应用 | 第29页 |
| ·其它应用 | 第29页 |
| 2 利用生物信息学分析PhaC | 第29-31页 |
| ·系统进化分析 | 第30页 |
| ·基因水平转移 | 第30-31页 |
| 3 论文研究的目的意义及展望 | 第31-33页 |
| ·论文的目的和意义 | 第31-32页 |
| ·PHB 的研究展望 | 第32-33页 |
| 第二章 产聚羟基脂肪酸酯菌株的筛选鉴定 | 第33-50页 |
| 1 材料与仪器 | 第33-36页 |
| ·仪器及主要试剂 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·培养基的配制 | 第34-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-42页 |
| ·制备活性污泥梯度稀释液 | 第36页 |
| ·菌种的分离纯化 | 第36页 |
| ·尼罗红染色法测定 | 第36页 |
| ·产PHB 菌株的筛选 | 第36-37页 |
| ·初筛 | 第36-37页 |
| ·复筛 | 第37页 |
| ·种子培养 | 第37页 |
| ·菌种鉴定 | 第37-42页 |
| ·形态特征观察 | 第37页 |
| ·生理生化反应特征 | 第37页 |
| ·对碳源和氮源利用实验 | 第37页 |
| ·16SrDNA 的PCR 扩增、序列测定和系统发育分析 | 第37-42页 |
| ·配制溶液 | 第38页 |
| ·E.coliDH5a 感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增16SrDNA | 第39页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第39-40页 |
| ·电泳产物胶回收 | 第40页 |
| ·连接 | 第40页 |
| ·转化 | 第40-41页 |
| ·重组质粒菌落的蓝白斑筛选 | 第41页 |
| ·抽提质粒电泳验证 | 第41-42页 |
| ·16SrDNA 保守序列测定及同源性分析 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-50页 |
| ·产PHB 菌株的筛选 | 第42-43页 |
| ·菌株的鉴定 | 第43-46页 |
| ·细胞形态和结构特征 | 第43-45页 |
| ·菌株的生理生化特征 | 第45页 |
| ·菌株对不同碳源的利用情况 | 第45-46页 |
| ·菌株对不同氮源的利用 | 第46页 |
| ·菌株16SrDNA 保守序列测定及同源性分析结果 | 第46-50页 |
| ·质粒电泳验证结果 | 第46-47页 |
| ·16SrDNA 保守序列测定及同源性分析结果 | 第47-50页 |
| 第三章 产物的性质分析 | 第50-58页 |
| 1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-53页 |
| ·菌体干质量的测定 | 第51页 |
| ·PHB 的制备 | 第51页 |
| ·PHB 含量的测定 | 第51页 |
| ·产物PHB 的定性定量鉴定 | 第51-53页 |
| ·荧光显微镜镜检定性 | 第51-52页 |
| ·气象色谱检测 | 第52-53页 |
| ·样品制备 | 第52页 |
| ·标准样制备 | 第52-53页 |
| ·GC 分析 | 第53页 |
| ·PHB 降解性测定 | 第53页 |
| ·PHB 膜的制备 | 第53页 |
| ·降解性测定 | 第53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-58页 |
| ·紫外分光光度计检测PHB 的含量 | 第53-54页 |
| ·PHB 的荧光检测 | 第54-55页 |
| ·PHB 产物的GC 检测 | 第55-56页 |
| ·PHB 的降解性能研究 | 第56-58页 |
| 第四章 菌株产PHB 的发酵条件的研究 | 第58-72页 |
| 1 材料和仪器 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·菌株 | 第58页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第58-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-61页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第59-60页 |
| ·不同碳源对菌体生长及PHB 积累的影响 | 第59页 |
| ·不同氮源对菌体生长及PHB 积累的影响 | 第59页 |
| ·发酵培养基配方正交试验 | 第59-60页 |
| ·发酵条件的优化 | 第60-61页 |
| ·培养时间对菌体积累PHB 的影响 | 第60页 |
| ·培养基初始PH 对菌体积累PHB 的影响 | 第60页 |
| ·培养温度对 | 第60页 |
| ·培养基葡萄糖浓度对菌体积累PHB 的影响 | 第60-61页 |
| ·培养基装量对菌体积累PHB 的影响 | 第61页 |
| ·发酵培养条件正交试验 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-72页 |
| ·不同碳源对菌体生长及PHB 积累的影响 | 第61-62页 |
| ·不同氮源对菌体生长及PHB 积累的影响 | 第62-63页 |
| ·培养基正交试验结果 | 第63页 |
| ·培养时间对菌体积累PHB 的影响 | 第63-64页 |
| ·培养基初始PH 对菌体积累PHB 的影响 | 第64-65页 |
| ·培养温度对菌体积累PHB 的影响 | 第65-66页 |
| ·培养基葡萄糖浓度对菌体积累PHB 的影响 | 第66-67页 |
| ·培养基装量对菌体积累PHB 的影响 | 第67-68页 |
| ·发酵培养条件正交试验 | 第68-72页 |
| ·各因素间的相互作用对PHB 含量的影响 | 第69-72页 |
| 第五章 进化分析 | 第72-80页 |
| 1 材料和仪器 | 第72页 |
| 2 实验方法 | 第72页 |
| 3 结果分析 | 第72-80页 |
| 第六章 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第89页 |