摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略语 | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1. 涡虫研究进展 | 第9-16页 |
·涡虫的进化地位 | 第9页 |
·涡虫的繁殖与胚胎发育 | 第9-11页 |
·涡虫再生与干细胞 | 第11-14页 |
·涡虫的神经系统 | 第14-16页 |
·涡虫的细胞凋亡 | 第16页 |
2. RhoA研究进展 | 第16-20页 |
·Ras超家族简介 | 第16-17页 |
·Rho家族简介 | 第17页 |
·RhoA简介 | 第17-18页 |
·RhoA的功能 | 第18-20页 |
3. 研究意义与技术路线 | 第20-22页 |
·研究意义 | 第20页 |
·主要内容 | 第20-22页 |
第二章 RhoA基因的进化及生物信息学分析 | 第22-37页 |
1. 前言 | 第22页 |
2 实验材料和方法 | 第22-26页 |
·材料 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-26页 |
3. 结果 | 第26-36页 |
·涡虫DjRhoA基因的序列分析 | 第26-28页 |
·Rho家族进化树的构建 | 第28-29页 |
·RhoA蛋白序列比较与系统进化分析 | 第29-34页 |
·东亚三角涡虫DjRhoA基因基因组分析 | 第34-36页 |
4. 讨论 | 第36-37页 |
第三章 东亚三角涡虫DjRhoA基因的表达分析 | 第37-57页 |
1. 前言 | 第37页 |
2. 材料和方法 | 第37-46页 |
·实验材料 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-46页 |
3. 结果 | 第46-56页 |
·DjRhoA与pcDNA3载体的连接 | 第46-47页 |
·DjRhoA探针的合成 | 第47-49页 |
·涡虫RhoA基因Northern杂交 | 第49-50页 |
·涡虫胚胎整体原位杂交结果 | 第50-52页 |
·再生涡虫整体原位杂交结果 | 第52-53页 |
·涡虫再生过程中DjRhoA基因表达量检测 | 第53-56页 |
4. 讨论 | 第56-57页 |
第四章 东亚三角涡虫DjRhoA蛋白的原核表达及组织定位 | 第57-65页 |
1. 前言 | 第57页 |
2. 材料和方法 | 第57-59页 |
·材料 | 第57页 |
·方法 | 第57-59页 |
3. 结果 | 第59-63页 |
·PCR扩增得到含有Xho Ⅰ酶和Xba Ⅰ酶酶切位点的RhoA基因片段 | 第59-60页 |
·重组质粒pBV220-IL1-RhoA菌液PCR鉴定及测序 | 第60-61页 |
·重组蛋白的表达 | 第61页 |
·重组蛋白的纯化及Western杂交鉴定 | 第61-62页 |
·荧光免疫组织化学定位 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
第五章 东亚三角涡虫DjRhoA基因的功能分析 | 第65-76页 |
1. 前言 | 第65页 |
2. 材料和方法 | 第65-68页 |
·实验材料 | 第65页 |
·实验方法 | 第65-68页 |
3. 结果 | 第68-75页 |
·PCR扩增得到含Xba Ⅰ酶和Kpn Ⅰ酶酶切位点的RhoA基因片段 | 第68页 |
·重组质粒L4440-DjRhoA菌液PCR鉴定及测序 | 第68-69页 |
·干扰后DjRhoA基因表达量检测 | 第69-71页 |
·干扰后涡虫表型改变 | 第71-74页 |
·RhoA 干扰后涡虫外观形态异常 | 第74-75页 |
4. 讨论 | 第75-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
附录 | 第84-86页 |