| 中文部分 | 第1-137页 |
| 缩略语 | 第13-17页 |
| 中文摘要 | 第17-18页 |
| 英文摘要 | 第18-20页 |
| 第一章 前言 | 第20-37页 |
| ·白血病 | 第20-23页 |
| ·正常造血系统 | 第20-21页 |
| ·白血病 | 第21-22页 |
| ·急性髓细胞性白血病(AML) | 第22-23页 |
| ·AML的流行病学 | 第22页 |
| ·AML的发病机理 | 第22页 |
| ·AML的治疗 | 第22-23页 |
| ·细胞凋亡 | 第23-26页 |
| ·凋亡的发现及其特征 | 第23页 |
| ·凋亡途径 | 第23-26页 |
| ·外源性凋亡途径 | 第24-25页 |
| ·内源性凋亡途径 | 第25-26页 |
| ·外源性和内源性凋亡途径间的相互联系 | 第26页 |
| ·AML的凋亡诱导疗法 | 第26-27页 |
| ·死亡受体途径中的凋亡缺陷 | 第26-27页 |
| ·线粒体途径中的凋亡缺陷 | 第27页 |
| ·新型AML凋亡诱导药物 | 第27-30页 |
| ·作用于死亡受体凋亡通路的AML治疗药物 | 第27-28页 |
| ·作用于线粒体凋亡通路的AML治疗药物 | 第28-30页 |
| ·直接作用于线粒体的细胞毒素 | 第28-29页 |
| ·间接作用于线粒体的药物 | 第29-30页 |
| ·α,β-不饱和酮基化合物 | 第30-37页 |
| 第二章 材料和方法 | 第37-47页 |
| ·实验材料 | 第37-41页 |
| ·细胞 | 第37-38页 |
| ·药品及试剂 | 第38-39页 |
| ·抗体 | 第39-40页 |
| ·试剂盒 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-47页 |
| ·细胞培养 | 第41页 |
| ·化合物依他尼酸丁酯(EABE)及依他尼酸与还原型谷胱甘肽螯合物(EA-GSH)的合成 | 第41页 |
| ·化合物2-(E)-亚戊基-5-二甲胺基甲基环戊酮盐酸盐(WB852)及其衍生物的合成 | 第41页 |
| ·细胞生长抑制活性检测 | 第41-42页 |
| ·AO/EB双染法考察细胞凋亡诱导活性 | 第42页 |
| ·AnnexinV染色法考察细胞凋亡诱导活性 | 第42页 |
| ·PI染色法考察细胞凋亡诱导活性 | 第42页 |
| ·细胞内过氧化氢(H_2O_2)水平检测 | 第42-43页 |
| ·线粒体膜电位检测 | 第43页 |
| ·蛋白免疫印迹技术 | 第43页 |
| ·谷胱甘肽S-转移酶(GSTP1-1)活性检测 | 第43页 |
| ·高效液相法(HPLC)检测细胞内依他尼酸丁酯与依他尼酸的含量 | 第43-44页 |
| ·细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量的测定 | 第44页 |
| ·细胞内氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量的测定 | 第44-45页 |
| ·细胞内还原型蛋白巯基(PrSH)含量的测定 | 第45页 |
| ·WB852与还原型谷胱甘肽(GSH)的化学反应活性检测 | 第45页 |
| ·质谱分析法检测WB852与还原型谷胱甘肽(GSH)螯合物的生成 | 第45-46页 |
| ·统计学方法 | 第46-47页 |
| 第三章 依他尼酸衍生物对白血病细胞生长抑制作用的构效关系分析及依他尼酸丁酯诱导白血病细胞凋亡的机制探讨 | 第47-72页 |
| ·前言 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·实验结果 | 第49-69页 |
| ·依他尼酸衍生物对GSTP1-1活性抑制作用及HL-60细胞生长抑制作用的构效关系分析 | 第49-55页 |
| ·EABE对HL-60细胞的生长抑制活性和凋亡诱导活性的考察 | 第55-57页 |
| ·EABE和EA对HL-60细胞内H_2O_2含量及线粒体膜电位水平的影响 | 第57-58页 |
| ·抗氧化剂NAC和CAT对EABE诱导HL-60细胞凋亡的影响 | 第58-59页 |
| ·Caspase在EABE诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用 | 第59-60页 |
| ·EABE对细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响 | 第60-62页 |
| ·GSH在EABE诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用 | 第62-64页 |
| ·GSTP1-1对EABE的细胞凋亡诱导作用的影响 | 第64-67页 |
| ·EABE的细胞内摄取的考察 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第四章 2-(E)-亚戊基-5-二甲胺基甲基环戊酮盐酸盐(WB852)诱导白血病细胞凋亡的作用机制研究 | 第72-90页 |
| ·前言 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-87页 |
| ·WB852对HL-60细胞的生长抑制活性和凋亡诱导活性的考察 | 第74-76页 |
| ·WB852对线粒体膜电位水平和细胞内H_2O_2含量的影响 | 第76-79页 |
| ·Caspase在WB852诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用 | 第79-80页 |
| ·几种白血病细胞株对WB852诱导细胞凋亡的敏感性考察 | 第80-84页 |
| ·GSTP1-1对WB852的细胞凋亡诱导作用的影响 | 第84-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 第五章 WB852凋亡诱导作用与化合物中不饱和酮 | 第90-109页 |
| ·前言 | 第90-91页 |
| ·实验方法 | 第91-92页 |
| ·实验结果 | 第92-106页 |
| ·WB852对细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响 | 第92-94页 |
| ·GSH在WB852诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用 | 第94-97页 |
| ·WB852体外与GSH发生化学反应的研究 | 第97页 |
| ·WB852体外与GSH反应形成WB852-GSH结合产物的考察 | 第97-100页 |
| ·WB852对HL-60细胞内还原型蛋白巯基(PrSH)含量的影响 | 第100-102页 |
| ·WB852衍生物的细胞凋亡诱导活性及巯基结合能力的构效关系分析 | 第102-106页 |
| ·讨论 | 第106-108页 |
| ·小结 | 第108-109页 |
| 结论 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-123页 |
| PUBLICATIONS | 第123-124页 |
| ABSTRACTS/POSTERS | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125-137页 |
| 英文部分 | 第137-261页 |
| ABBREVIATIONS | 第137-141页 |
| ABSTRACT | 第141-143页 |
| CHAPTER ONE Introduction | 第143-162页 |
| ·Leukemia | 第143-147页 |
| ·Normal hematopoietic system | 第143-144页 |
| ·Leukemia | 第144-145页 |
| ·Acute myeloid leukemia(AML) | 第145-147页 |
| ·Epidemiology of AML | 第145-146页 |
| ·Pathogenesis of AML | 第146页 |
| ·Treatment for AML | 第146-147页 |
| ·Apoptosis | 第147-151页 |
| ·Discovery and features of apoptosis | 第147页 |
| ·Apoptotic pathways | 第147-151页 |
| ·Extrinsic apoptotic pathway | 第148-149页 |
| ·Intrinsic apoptotic pathway | 第149-150页 |
| ·Cross talk between the extrinsic and intrinsic pathways | 第150-151页 |
| ·Apoptosis Induction for AML Treatment | 第151-152页 |
| ·Apoptosis defects in receptor-mediated pathway | 第151页 |
| ·Apoptosis defects in mitochondria-mediated pathway | 第151-152页 |
| ·Novel Anti-AML Agents Targeting Apoptosis Pathway | 第152-156页 |
| ·Agents targeting receptor-mediated apoptotic pathway in AML | 第152-154页 |
| ·Agents targeting mitochondria-mediated pathway in AML | 第154-156页 |
| ·Direct mitochondria-targeting toxins | 第154-155页 |
| ·Indirect mitochondria-targeting agents | 第155-156页 |
| ·α,β-unsaturated Carbonyl Compounds | 第156-162页 |
| CHAPTER TWO Materials and Methods | 第162-173页 |
| ·Experimental Materials | 第162-166页 |
| ·Cell lines | 第162-163页 |
| ·Chemicals and reagents | 第163-164页 |
| ·Antibodies | 第164-165页 |
| ·Kits | 第165页 |
| ·Experimental instruments | 第165-166页 |
| ·Experimental Methods | 第166-173页 |
| ·Cell culture | 第166页 |
| ·Synthesis of EABE and EA-GSH conjugate | 第166页 |
| ·Synthesis of 2-(E)-pentylidene-5-dimethylaminomethyl cyclopentanone hydrochloride(WB852)and its derivatives | 第166页 |
| ·Cell growth inhibition | 第166-167页 |
| ·Quantitation of apoptotic cells by AO and EB staining | 第167页 |
| ·Quantitation of apoptotic cells by Annexin V assay | 第167页 |
| ·Quantitation of apoptotic cells by PI staining | 第167-168页 |
| ·Determination of H_2O_2 production | 第168页 |
| ·Measurement of mitochondrial membrane potential(MMP) | 第168页 |
| ·Western blot analysis | 第168页 |
| ·GSTP1-1 activity assay | 第168-169页 |
| ·Quantitation of intracellular EABE and EA content by high performance liquid chromatography(HPLC) | 第169-170页 |
| ·Measurement of intracellular reduced glutathione(GSH)content | 第170页 |
| ·Measurement of intracellular oxidized glutathione(GSSG)content | 第170页 |
| ·Determination of intracellular protein reduced thiol(PrSH)content | 第170-171页 |
| ·Assay for chemical reactions of WB852 with GSH | 第171页 |
| ·Mass spectral analysis of WB852-thiol conjugates | 第171-172页 |
| ·Statistics | 第172-173页 |
| CHAPTER THREE Structure-Activity Analysis of EA Derivatives of Inhibiting Cell Growth and the Mechanism of Ethacrynic Acid Butyl-Ester-Induced Apoptosis in Leukemia Cells | 第173-201页 |
| ·Introduction | 第173-175页 |
| ·Experimental Methods | 第175-176页 |
| ·Results | 第176-198页 |
| ·Structure-activity relationship of EA analogues of inhibiting glutathione S-transferases P1-1 activity and cell growth in HL-60 cells | 第176-182页 |
| ·EABE is a more potent inhibitor of cell growth and inducer of cell apoptosis than EA in HL-60 cells | 第182-185页 |
| ·Apoptosis induction by EABE and EA correlates with an increase of cellular H_2O_2 and a decrease in MMP in HL-60 cells | 第185-186页 |
| ·EABE-induced apoptosis can be inhibited by the antioxidants of NAC and CAT | 第186-187页 |
| ·EABE induces apoptosis in HL-60 cells through caspase-dependent pathway which can be inhibited by the antioxidants of NAC and CAT | 第187-188页 |
| ·EABE decreases intracellular GSH content | 第188-190页 |
| ·Intracellular GSH is involved in EABE-induced apoptosis in HL-60 cells | 第190-192页 |
| ·Cells with high levels of GSTP1-1 activity are less sensitive to EABE-induced apoptosis | 第192-196页 |
| ·EABE is taken up faster than EA in HL-60 cells | 第196-198页 |
| ·Discussion | 第198-200页 |
| ·Summary | 第200-201页 |
| CHAPTER FOUR The Mechanism of 2-(E)-Pentylidene-5-Dimethylaminomethyl Cyclopentanone Hydrochloride(WB852)-Induced Apoptosis in Leukemia Cells | 第201-221页 |
| ·Introduction | 第201-202页 |
| ·Experimental Methods | 第202-203页 |
| ·Results | 第203-218页 |
| ·WB852 inhibits cell growth and induces apoptosis in HL-60 cells | 第203-206页 |
| ·The decrease of MMP but not H_2O_2 production is required for WB852-induced apoptosis in HL-60 cells | 第206-209页 |
| ·WB852 induces apoptosis in HL-60 cells through caspase-dependent pathways | 第209-210页 |
| ·K562 cells are less sensitive to WB852-induced apoptosis than HL-60,HP100 and U937 cells | 第210-214页 |
| ·GSTP1-1 levels control cell sensitivity to WB852-induced apoptosis | 第214-218页 |
| ·Discussion | 第218-220页 |
| ·Summary | 第220-221页 |
| CHAPTER FIVE WB852-Induced Apoptosis is Correlated with Thiol Group Binding Ability That Requires both Carbonyl Group and Mannich Base | 第221-244页 |
| ·Introduction | 第221-223页 |
| ·Experimental Methods | 第223-224页 |
| ·Results | 第224-240页 |
| ·WB852 depletes intracellular GSH content in a dose- and time-dependent manner | 第224-226页 |
| ·Depletion of intracellular GSH renders HL-60 cells more sensitive to WB852-induced apoptosis | 第226-229页 |
| ·WB852 chemically reacts with GSH in vitro | 第229-230页 |
| ·Formation of WB852-GSH conjugates in vitro | 第230-233页 |
| ·WB852 depletes intracellular protein reduced thiols(PrSH)in HL-60 cells | 第233-235页 |
| ·Structural requirements of WB852 derivatives for apoptosis induction and thiol conjugation | 第235-240页 |
| ·Discussion | 第240-243页 |
| ·Summary | 第243-244页 |
| CONCLUSION | 第244-245页 |
| REFERENCE | 第245-258页 |
| PUBLICATIONS | 第258-260页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第260-261页 |
