| 英文缩略词 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 1 核酸探针的概念 | 第14页 |
| 2 核酸探针的种类 | 第14页 |
| 3 核酸探针的标记 | 第14-15页 |
| 4 核酸探针的斑点杂交方法 | 第15-16页 |
| 实验一、各种核酸探针的标记和敏感性、特异性检测 | 第16-29页 |
| 1 材料和方法 | 第16-22页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·仪器和试剂 | 第16-17页 |
| ·毒株 | 第17页 |
| ·引物 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-22页 |
| ·REV LTR 序列550bp DNA 和pol 基因约3500bp DNA 的克隆及序列测定 | 第17-19页 |
| ·前病毒cDNA的提取 | 第17-18页 |
| ·扩增LTR序列550bp DNA的PCR反应 | 第18页 |
| ·扩增pol基因3500bp DNA的PCR反应 | 第18页 |
| ·PCR 产物的克隆及序列测定 | 第18-19页 |
| ·MDV PP38 基因的克隆及序列测定 | 第19页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第19页 |
| ·扩增PP38 基因的PCR 反应 | 第19页 |
| ·PCR 产物的克隆及序列测定 | 第19页 |
| ·CAV VP1 基因的克隆及序列测定 | 第19-20页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第19页 |
| ·扩增VP1 基因的PCR 反应 | 第19-20页 |
| ·PCR 产物的克隆及序列测定 | 第20页 |
| ·ARV δ3 基因的克隆及序列测定 | 第20-21页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第20页 |
| ·扩增δ3 基因的RT-PCR 反应 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR 产物的克隆及序列测定 | 第21页 |
| ·核酸探针的标记 | 第21页 |
| ·核酸片段的定量 | 第21页 |
| ·探针标记步骤 | 第21页 |
| ·IBV 核酸探针的标记 | 第21页 |
| ·标记探针的敏感性检测 | 第21-22页 |
| ·标记探针的特异性检测 | 第22页 |
| 2. 结果 | 第22-28页 |
| ·PCR和RT-PCR扩增结果 | 第22-25页 |
| ·PCR和RT-PCR扩增产物的序列测定结果 | 第25页 |
| ·核酸探针的敏感性试验结果 | 第25-26页 |
| ·核酸探针的特异性试验结果 | 第26-28页 |
| 3、讨论 | 第28-29页 |
| 实验二、利用斑点杂交反应检测采集样品中的REV、MDV、CAV、ARV和IBV | 第29-40页 |
| 1 材料和方法 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·样品组织DNA 的提取 | 第29页 |
| ·样品组织RNA的提取 | 第29页 |
| ·应用斑点杂交反应检测REV、MDV、CAV、ARV 和IBV | 第29-30页 |
| 2 结果 | 第30-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 实验三 CAV 的斑点杂交检测及其VP1 基因序列分析 | 第40-50页 |
| 1. 材料和方法 | 第40-45页 |
| ·病料的采集和处理 | 第40页 |
| ·应用斑点杂交检测REV、MDV、CAV、ARV 和IBV | 第40页 |
| ·病料中CAV VP1 基因的克隆及序列测定 | 第40-45页 |
| ·引物设计 | 第40-41页 |
| ·扩增VP1 的PCR 反应 | 第41页 |
| ·PCR产物的回收 | 第41页 |
| ·DNA 定量 | 第41-42页 |
| ·连接 | 第42页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第42-43页 |
| ·氯化钙法制备感受态大肠杆菌 | 第42页 |
| ·转化 | 第42-43页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第43页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·序列测定与分析 | 第44页 |
| ·病料中的CAV与CAV其它参考株VP1基因序列比较 | 第44-45页 |
| 2 结果 | 第45-49页 |
| ·病料的斑点杂交检测结果 | 第45-46页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第46页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·病料中CAV 的VP1 基因核苷酸序列 | 第47页 |
| ·病料中的CAV 与其它CAV 参考株VP1 基因序列比较 | 第47-48页 |
| ·病料中的CAV 与其它CAV 参考株VP1 基因推导氨基酸序列比较 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 附表 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 个人简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
