枯草芽孢杆菌C-36内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-12页 |
| ·纤维素的分子结构及大小 | 第8-9页 |
| ·产纤维素酶的微生物 | 第9页 |
| ·纤维素酶的组成和功能 | 第9页 |
| ·纤维素酶的多型性 | 第9-10页 |
| ·纤维素酶基因的克隆与表达 | 第10-12页 |
| 2 研究目的及意义 | 第12-13页 |
| 3 材料与方法 | 第13-23页 |
| ·材料 | 第13-17页 |
| ·菌株和质粒 | 第13-14页 |
| ·试剂 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14-15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·抗生素贮存液 | 第15页 |
| ·琼脂糖电泳试剂 | 第15页 |
| ·SDS-PAGE电泳试剂 | 第15-16页 |
| ·刚果红染色液 | 第16页 |
| ·纤维素酶活力测定溶液 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-23页 |
| ·内切葡聚糖酶基因表达片段的扩增 | 第17-19页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第19-21页 |
| ·重组菌株pET-C36在大肠杆菌中的诱导表达 | 第21页 |
| ·诱导温度对产酶的影响 | 第21-22页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第22页 |
| ·IPTG浓度对产酶的影响 | 第22页 |
| ·乳糖浓度对产酶的影响 | 第22页 |
| ·内切葡聚糖酶最适反应pH的测定 | 第22页 |
| ·内切葡聚糖酶pH稳定性的测定 | 第22页 |
| ·内切葡聚糖酶最适反应温度的测定 | 第22页 |
| ·内切葡聚糖酶热稳定性的测定 | 第22-23页 |
| 4 结果与分析 | 第23-31页 |
| ·内切葡聚糖酶基因表达片段的扩增 | 第23页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·重组菌株pET-C36在大肠杆菌中的诱导表达 | 第25页 |
| ·重组菌株的SDS-PAGE分析 | 第25-26页 |
| ·诱导温度对产酶的影响 | 第26页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第26-27页 |
| ·IPTG浓度对产酶的影响 | 第27-28页 |
| ·乳糖浓度对产酶的影响 | 第28页 |
| ·内切葡聚糖酶的最适反应pH | 第28-29页 |
| ·内切葡聚糖酶的pH稳定性 | 第29页 |
| ·内切葡聚糖酶的最适反应温度 | 第29-30页 |
| ·内切葡聚糖酶热稳定性 | 第30-31页 |
| 5 讨论 | 第31-34页 |
| ·表达系统的选择 | 第31-32页 |
| ·影响大肠杆菌表达的因素 | 第32-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 攻读硕士学位期间参与发表的文章 | 第39页 |
