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甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育差异表达基因及雄配子发育研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略语表第13-14页
1 文献综述第14-39页
   ·油菜显性细胞核雄性不育的研究第14-22页
     ·油菜核不育材料的来源及分类第15-16页
     ·油菜显性核不育的分类、遗传特点及其应用第16-18页
     ·油菜显性细胞核雄性不育的形态特征第18-19页
     ·油菜显性细胞核雄性不育的细胞学研究第19-20页
     ·油菜显性细胞核雄性不育的分子生物学研究第20-22页
       ·不育基因的定位研究第20-21页
       ·恢复基因的定位研究第21-22页
   ·植物雄配子发育研究第22-29页
     ·雄配子发育过程第23页
     ·雄配子发育过程中的相关基因第23-28页
       ·与雄配子发育起始相关的基因第23-24页
       ·与减数分裂相关的基因第24-26页
         ·姐妹染色体粘合相关基因第24页
         ·染色体配对、联会及重组相关基因第24-25页
         ·同源染色体分离第25-26页
         ·胞质分裂过程第26页
       ·减数分裂后花粉发育相关基因第26-27页
         ·与花粉有丝分裂I相关的基因第27页
         ·生殖细胞有丝分裂中的相关基因第27页
       ·与绒毡层发育相关的基因第27-28页
     ·DNA修复与细胞周期检测点(cell cycle checkpoint)的相关性第28-29页
   ·差异表达研究中常用的实验技术第29-38页
     ·基于PCR技术的基因差异表达分析技术第30-31页
     ·基于消减杂交和PCR技术的基因差异表达分析技术第31-33页
     ·基于测序技术的基因差异表达分析技术第33-35页
     ·基于大规模杂交的基因差异表达分析技术第35-36页
     ·生物信息学第36-38页
   ·本研究的目的和意义第38-39页
2 差异表达分析第39-55页
   ·材料与方法第39-55页
     ·材料第39页
     ·实验方法第39-55页
       ·总RNA抽提第39-40页
       ·DDRT-PCR第40-41页
         ·第一链cDNA的合成第40页
         ·PCR扩增第40-41页
         ·差异片段的回收第41页
       ·cDNA-AFLP第41-43页
         ·第一链cDNA的合成第41页
         ·第二链cDNA的合成(LD-PCR)第41-42页
         ·AFLP第42-43页
       ·SSH第43-47页
         ·第一链cDNA的合成第43页
         ·第二链cDNA的合成第43-44页
         ·Rsa I酶切第44页
         ·接头连接第44-45页
         ·第一轮杂交第45页
         ·第二轮杂交第45页
         ·两轮PCR扩增第45-46页
         ·差减效率检测第46-47页
       ·连接与转化第47页
       ·cDNA microarray筛选第47-51页
         ·文库的扩增与精制第47-48页
         ·点样及后处理第48-49页
         ·RNA抽提第49页
         ·荧光探针标记第49-50页
         ·芯片杂交、洗涤和扫描第50页
         ·数据分析第50-51页
       ·数据验证第51-53页
         ·RT-PCR第51页
         ·反向Northern杂交第51-52页
           ·点膜及后处理第51-52页
           ·预杂交第52页
           ·探针标记第52页
           ·杂交第52页
           ·洗膜第52页
         ·Northern杂交第52-53页
           ·转膜及其后处理第52-53页
           ·探针标记第53页
       ·EST测序、检索及功能分类第53-54页
       ·细胞学观察第54-55页
3 结果与分析第55-82页
   ·DDRT-PCR第55-56页
   ·cDNA-AFLP第56-60页
     ·双链cDNA的合成第56页
     ·cDNA-AFLP第56-57页
     ·序列分析第57-59页
     ·Northern杂交第59-60页
   ·SSH第60-63页
     ·双链cDNA的合成及酶切第60-61页
     ·差减效率检测第61-62页
     ·差减文库的构建第62-63页
   ·cDNA microarray第63-68页
     ·cDNA microarray的构建第63页
     ·差异片段的筛选第63-65页
     ·序列分析第65-67页
     ·正向文库上调表达EST的功能归类第67-68页
     ·芯片数据验证第68页
   ·细胞学观察第68-70页
   ·DNA损伤修复相关基因的RT-PCR研究第70-72页
   ·利用KOBAS鉴定与雄配子发育相关的途径第72-75页
   ·与雄配子发育相关EST的表达模式研究第75-82页
     ·时间表达模式研究第75-79页
     ·空间表达模式研究第79-82页
4 讨论第82-92页
   ·实验方法的比较第82-84页
   ·显性细胞核雄性不育机制探讨第84-89页
     ·纺锤体形成异常第84-85页
     ·细胞周期检测点(cell cycle checkpoints)第85-86页
     ·DNA修复功能缺陷第86-87页
     ·雄性不育的可能机制第87-89页
   ·雄配子发育研究第89-92页
     ·筛选到与雄配子发育相关的基因第89-90页
     ·正向文库中上调表达基因的功能分类第90-91页
     ·参与雄配子发育的重要途径第91-92页
5 总结与展望第92-93页
参考文献第93-106页
作者简介第106-107页
致谢第107-108页
附录第108-118页

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