摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词(Abbreviation) | 第9-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-21页 |
·猪水肿病的病原学 | 第10-11页 |
·猪水肿病的发现 | 第10页 |
·产类志贺毒素大肠杆菌的特征 | 第10-11页 |
·猪水肿病大肠杆菌的毒力因子 | 第11-16页 |
·F18ab菌毛 | 第11-13页 |
·类志贺毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe) | 第13-16页 |
·猪水肿病的诊断 | 第16-18页 |
·猪水肿病的流行病学 | 第16页 |
·临床症状及剖检病变 | 第16-17页 |
·实验室诊断方法 | 第17-18页 |
·猪水肿病的免疫研究 | 第18-21页 |
·药物预防 | 第18页 |
·菌体灭活苗 | 第18-19页 |
·亚单位苗 | 第19-21页 |
第2章 目的和意义 | 第21-22页 |
第3章 材料与方法 | 第22-33页 |
·实验材料 | 第22-24页 |
·菌种与质粒 | 第22页 |
·所用血清 | 第22页 |
·酶及试剂盒 | 第22-23页 |
·主要试剂及溶液的配制 | 第23-24页 |
·试验动物 | 第24页 |
·方法 | 第24-33页 |
·细菌的增殖及基因组的提取 | 第24-25页 |
·SLT-ⅡeB基因的扩增与检测 | 第25-26页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第26-27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第27页 |
·连接产物的转化 | 第27页 |
·质粒的小量制备(碱裂解法) | 第27-28页 |
·质粒的大量制备(碱裂解法) | 第28页 |
·重组表达质粒的构建及序列测定 | 第28-29页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
·重组质粒的诱导表达、样品处理及SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
·包涵体的提纯与复性 | 第30页 |
·ELISA试验方法的建立 | 第30-31页 |
·小鼠的免疫效力试验 | 第31-33页 |
第4章 结果与分析 | 第33-47页 |
·SLT-ⅡeB基因的克隆、序列分析 | 第33-39页 |
·SLT-ⅡeB基因编码蛋白的跨膜区预测 | 第33页 |
·SLT-ⅡeB基因的PCR克隆 | 第33-34页 |
·重组质粒pGEX-SLT-ⅡeB酶切鉴定结果 | 第34页 |
·SLT-ⅡeB基因的序列分析结果 | 第34页 |
·重组质粒pGEX-SLT-Ⅱe3B的构建及鉴定结果 | 第34-36页 |
·SLT-ⅡeB和SLT-Ⅱe3B基因编码蛋白的抗原表位分析 | 第36-38页 |
·SLT-Ⅱe3B基因编码蛋白的理化性质分析及二级结构预测 | 第38-39页 |
·GST-SLT-ⅡeB及GST-SLT-Ⅱe3B的表达及检测 | 第39页 |
·SLT-Ⅱe3B-ELISA诊断方法的研究 | 第39-44页 |
·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第39-40页 |
·ELISA结果判定标准的确定 | 第40页 |
·重复性试验 | 第40页 |
·特异性试验 | 第40-42页 |
·稳定性试验 | 第42-43页 |
·SLT-Ⅱe3B-ELISA与fedF-ELISA的比较 | 第43页 |
·临床血清调查 | 第43-44页 |
·小鼠免疫及抗体水平的检测 | 第44页 |
·小鼠的免疫效力试验 | 第44-47页 |
·小鼠抗体消长规律的比较研究 | 第44页 |
·实验动物攻毒的结果 | 第44-47页 |
第5章 讨论与结论 | 第47-53页 |
·讨论 | 第47-52页 |
·SLT-ⅡeB基因的克隆、序列分析 | 第47-48页 |
·GST-SLT-ⅡeB及GST-SLT-Ⅱe3B的表达 | 第48-50页 |
·SLT-Ⅱe3B-ELISA诊断方法的建立 | 第50-51页 |
·基因工程类毒素菌苗对小鼠的保护效力研究 | 第51-52页 |
·结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62页 |