| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词(ABREVIATION) | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| ·禽传染性支气管炎研究概况 | 第10-14页 |
| ·IB的病原学 | 第10-11页 |
| ·IB的流行病学 | 第11-12页 |
| ·IB的临床症状和病理变化 | 第12页 |
| ·IB的检测诊断 | 第12-13页 |
| ·IB的防治 | 第13-14页 |
| ·禽传染性支气管炎S1蛋白研究进展 | 第14-18页 |
| ·IBVS1蛋白的分子生物学研究进展 | 第14-17页 |
| ·IBVS1蛋白在诊断上的研究 | 第17页 |
| ·IBVS1蛋白在防治上的研究 | 第17-18页 |
| ·IgG免疫球蛋白 | 第18-21页 |
| ·免疫球蛋白 | 第18页 |
| ·免疫球蛋白的结构 | 第18-19页 |
| ·IgG水解片段及其生物学活性 | 第19页 |
| ·IgGFc在基因工程中的应用 | 第19-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·材料 | 第22-26页 |
| ·细胞 | 第22页 |
| ·质粒及菌株 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·酶及试剂盒 | 第24页 |
| ·血清和酶标抗体 | 第24页 |
| ·其它相关试剂 | 第24-25页 |
| ·主要溶液 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-35页 |
| ·猪IgGFc基因的扩增 | 第26-28页 |
| ·IBVS1基因的扩增 | 第28-29页 |
| ·IBVS1-IgGFc融合蛋白表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·重组质粒的鉴定与序列分析 | 第31页 |
| ·大肠杆菌(E.coli)感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·DNA连接产物的转化 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第32页 |
| ·质粒的少量制备(碱裂解法) | 第32页 |
| ·质粒的大量制备(碱裂解法)及PEG纯化 | 第32-33页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-IgGFcS1的转染 | 第33页 |
| ·IBVS1-IgGFc瞬时表达的鉴定 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-48页 |
| ·IgGFc基因的克隆及测序 | 第35-39页 |
| ·RNA提取 | 第35页 |
| ·RT—PCR结果 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
| ·测序结果分析 | 第36-39页 |
| ·IBVS1基因的克隆及序列分析 | 第39-44页 |
| ·PCR及酶切鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·测序结果分析 | 第40-44页 |
| ·IBVS1-IgGFc融合蛋白真核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·pcDNA3.1-IgGFc的构建 | 第44页 |
| ·pcDNA3.1—IgGFcS1的构建 | 第44-45页 |
| ·IBVS1-IgGFc融合蛋白的瞬时表达及检测 | 第45-48页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第45-46页 |
| ·直接免疫荧光检测 | 第46-47页 |
| ·斑点杂交检测 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·IBVS1基因克隆区域的选择 | 第48-49页 |
| ·关于猪IgGFc基因的克隆 | 第49页 |
| ·IBVS1与IgGFc基因在载体构建过程中的插入顺序 | 第49-50页 |
| ·重组载体在Hela细胞内的表达及其定位 | 第50-51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |