| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-19页 |
| 一、组蛋白的乙酰化和去乙酰化作用 | 第8-11页 |
| (一) 组蛋白乙酰化和组蛋白乙酰基转移酶(HAT) | 第8-9页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化和组蛋白去乙酰化酶(HDAC) | 第9页 |
| (三) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第9-11页 |
| 二、热休克蛋白的生物学功能 | 第11-14页 |
| (一) 热休克蛋白的“分子伴侣”活性 | 第11-12页 |
| (二) 热休克蛋白与细胞凋亡 | 第12页 |
| (三) 热休克蛋白与免疫调控 | 第12-13页 |
| 1、协同肿瘤免疫 | 第12页 |
| 2、参与抗感染免疫和自身免疫 | 第12-13页 |
| (四) 热休克蛋白在衰老中的作用 | 第13-14页 |
| 三、多克隆抗体技术 | 第14-18页 |
| (一) 抗原和抗体 | 第14-16页 |
| 1、抗原(Antigen) | 第14页 |
| 2、抗体(Antibody) | 第14页 |
| 3、抗原与抗体的关系 | 第14页 |
| 4、抗体形成的机理 | 第14-15页 |
| 5、影响抗体产生的因素 | 第15-16页 |
| (二) 多克隆抗体的制备 | 第16-17页 |
| 1、多克隆抗体 | 第16页 |
| 2、多克隆抗体的制备方法 | 第16-17页 |
| (三) 多克隆抗体与单克隆抗体的比较 | 第17-18页 |
| (四) 多克隆抗体的应用 | 第18页 |
| 四、本论文研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第19-27页 |
| 一、果蝇的培养 | 第19页 |
| (一) 果蝇培养基的制备 | 第19页 |
| (二) 果蝇的繁殖及培养 | 第19页 |
| 二、抗 Hsp22 多克隆抗体的制备 | 第19-22页 |
| (一) 抗原的表达与纯化 | 第19-21页 |
| 1、实验材料及试剂 | 第19-20页 |
| 2、实验方法 | 第20-21页 |
| ·hsp22 基因片段的获得 | 第20页 |
| ·重组质粒的构建 | 第20-21页 |
| ·目的蛋白的表达及纯化 | 第21页 |
| (二) 抗体的制备 | 第21页 |
| 1、材料和试剂 | 第21页 |
| 2 、方法 | 第21页 |
| (三) 检测抗体效价(ELISA) | 第21-22页 |
| 1、试剂 | 第22页 |
| 2、实验步骤 | 第22页 |
| 三、组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA 对hsp22 mRNA 的影响 | 第22-24页 |
| (一) 实验材料 | 第22页 |
| (二) 实验方法 | 第22-24页 |
| 1、材料准备 | 第22-23页 |
| 2、提取总RNA | 第23页 |
| 3.R T-PCR 反应 | 第23-24页 |
| 四、组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对Hsp22蛋白表达的影响 | 第24-27页 |
| (一) 实验材料 | 第24页 |
| (二) 实验方法 | 第24-27页 |
| 1、提取全蛋白 | 第24页 |
| 2、SDS-PAGE | 第24-25页 |
| 3、免疫印记分析 | 第25-27页 |
| 第三章 结果与分析 | 第27-35页 |
| 一、重组质粒的构建 | 第27-28页 |
| (一) 果蝇热休克蛋白22基因的克隆 | 第27页 |
| (二) 重组质粒的构建 | 第27-28页 |
| 二、Hsp22 的诱导表达和纯化 | 第28-30页 |
| (一) Hsp22 的诱导表达 | 第28-29页 |
| (二) Hsp22 蛋白的纯化 | 第29页 |
| (三) 抗体效价的测定 | 第29-30页 |
| 三、TSA 处理对果蝇成虫hsp22 mRNA 水平的影响 | 第30-32页 |
| (一) 羽化后30天TSA处理对hsp22 mRNA水平的影响 | 第30-31页 |
| (二) 羽化后45天TSA处理对hsp22 mRNA水平的影响 | 第31-32页 |
| 四、组蛋白去乙酰化酶抑制剂 TSA 对果蝇成虫 Hsp22 蛋白表达水平的影响 | 第32-35页 |
| (一) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA 对羽化后30 天果蝇成虫Hsp22 蛋白表达水平的影响 | 第32-34页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA 对羽化后45 天果蝇成虫Hsp22 蛋白表达水平的影响 | 第34-35页 |
| 第四章 讨论 | 第35-38页 |
| 一、目的基因片段的选择与分子克隆 | 第35页 |
| 二、蛋白质表达及纯化 | 第35-36页 |
| (一) 表达与纯化 | 第35页 |
| (二) 免疫应答 | 第35-36页 |
| 三 组蛋白乙酰化与hsp22 基因的表达 | 第36-38页 |
| 第五章 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 致谢 | 第44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第44页 |
