| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-37页 |
| ·动物、细胞及菌株 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·小鼠脾细胞的分离 | 第21页 |
| ·辅助性T细胞Th1和Th2的诱导分化 | 第21页 |
| ·Th1和Th2细胞分化成熟后的重复刺激 | 第21页 |
| ·ELISA(酶联免疫吸附实验)测IL-4和IFN-γ | 第21-22页 |
| ·细胞总RNA的抽提 | 第22页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR | 第23-24页 |
| ·实时定量PCR | 第24-25页 |
| ·重组质粒的构建 | 第25-27页 |
| ·细胞培养 | 第27-28页 |
| ·脂质体转染 | 第28页 |
| ·NGP在细胞内的定位 | 第28-29页 |
| ·~3H-胸腺嘧啶掺入法测脾细胞增殖 | 第29页 |
| ·原核表达质粒NGP-pGEX-4t-1的构建 | 第29-30页 |
| ·NGP-GST蛋白快速表达 | 第30页 |
| ·NGP-GST蛋白小量表达 | 第30-33页 |
| ·NGP-GST蛋白大量表达及纯化 | 第33-34页 |
| ·NGP-GST抗血清的制备 | 第34页 |
| ·ELISA(酶联免疫吸附实验) | 第34页 |
| ·Westernblot印迹 | 第34-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-47页 |
| ·Th1和Th2细胞的获得 | 第37-38页 |
| ·NGP在Th2细胞中高表达的确认 | 第38-39页 |
| ·NGP在Th细胞分化过程中的表达情况 | 第39页 |
| ·重组质粒NGP-pEGFP的构建 | 第39-41页 |
| ·NGP的亚细胞定位 | 第41页 |
| ·NGP转染的293T细胞的上清液可以抑制脾细胞增殖 | 第41-42页 |
| ·NGP的原核表达与纯化 | 第42-45页 |
| ·纯化的NGP-GST可以抑制OVA诱导的脾细胞增殖 | 第45页 |
| ·蛋白水平上Th2中高表达NGP的确认 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-49页 |
| ·Th细胞中新的功能基因的发现 | 第47页 |
| ·基因在细胞内定位的方法选择 | 第47-48页 |
| ·NGP抑制OVA诱导的脾细胞增殖的可能机制 | 第48-49页 |
| 第五章 结论和后继工作 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第55页 |
