| 致谢 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 昆虫抗药性发展概况 | 第12页 |
| 2 甜菜夜蛾及其抗药性现状 | 第12-19页 |
| ·甜菜夜蛾的生物学特性 | 第13页 |
| ·甜菜夜蛾的分布 | 第13-14页 |
| ·甜菜夜蛾爆发原因 | 第14-15页 |
| ·种植结构及栽培管理 | 第14页 |
| ·气候条件 | 第14页 |
| ·天敌因子 | 第14页 |
| ·迁飞习性 | 第14-15页 |
| ·抗性问题 | 第15页 |
| ·甜菜夜蛾的抗药性现状 | 第15-16页 |
| ·甜菜夜蛾的抗性机制 | 第16-17页 |
| ·表皮穿透速度降低 | 第16-17页 |
| ·解毒酶活性增强 | 第17页 |
| ·靶标敏感性下降 | 第17页 |
| ·抗性遗传 | 第17-18页 |
| ·抗性治理 | 第18-19页 |
| 3 多杀菌素的研究进展 | 第19-26页 |
| ·多杀菌素的研究开发历史 | 第19-20页 |
| ·多杀菌素的特性 | 第20-22页 |
| ·多杀菌素的组分 | 第20-21页 |
| ·多杀菌素的物理化学性质 | 第21-22页 |
| ·多杀菌素的作用机制 | 第22页 |
| ·多杀菌素的杀虫谱 | 第22-23页 |
| ·多杀菌素的应用 | 第23-24页 |
| ·多杀菌素的抗药性问题 | 第24-26页 |
| 第2章 研究内容和技术路线 | 第26-28页 |
| 1 研究内容 | 第26-27页 |
| ·甜菜夜蛾种群的繁育和品系的筛选 | 第26页 |
| ·不同杀虫剂对甜菜夜蛾的毒力测定 | 第26页 |
| ·各种酶抑制剂对多杀菌素的增效作用 | 第26页 |
| ·解毒酶活力的离体测定 | 第26页 |
| ·甜菜夜蛾抗性分子机制的研究 | 第26-27页 |
| 2 技术路线 | 第27-28页 |
| 第3章 甜菜夜蛾抗多杀菌素的生理生化机理研究 | 第28-37页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·甜菜夜蛾品系 | 第28页 |
| ·寄主植物和养虫设备 | 第28页 |
| ·所用试剂 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·甜菜夜蛾品系的饲养 | 第29页 |
| ·甜菜夜蛾的筛选 | 第29页 |
| ·甜菜夜蛾对不同药剂的毒力测定 | 第29页 |
| ·多杀菌素的增效作用测定 | 第29-30页 |
| ·谷胱甘肽S-转移酶活力测定 | 第30页 |
| ·酶液的提取 | 第30页 |
| ·酶的测定 | 第30页 |
| ·多功能氧化酶 O-脱甲基活力测定 | 第30页 |
| ·酶液的提取 | 第30页 |
| ·酶的测定 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第4章 甜菜夜蛾CYP4家族基因的克隆及序列分析 | 第37-48页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·供试昆虫 | 第37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·酶和试剂 | 第37页 |
| ·引物 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-42页 |
| ·总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·总 RNA质量检测 | 第38页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第39页 |
| ·PCR产物的电泳检测 | 第39-40页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第40页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第40-42页 |
| ·目的DNA片断与载体的连接 | 第40页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl2法)(根据 Sambrook等，1989) | 第40-41页 |
| ·转化 | 第41页 |
| ·重组质粒 DNA的提取 | 第41页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·目的克隆的序列测定 | 第42页 |
| ·目的基因序列的生物信息学分析 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-47页 |
| ·甜菜夜蛾抗性品系总 RNA质量检测结果 | 第42页 |
| ·PCR产物的扩增 | 第42-43页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆的序列分析结果 | 第44-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 第5章 Secyp4s8-like和Secyp4g31-like基因在甜菜夜蛾敏感和抗多杀菌素品系中表达水平的定量分析 | 第48-57页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·供试昆虫 | 第48页 |
| ·仪器 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·引物设计 | 第48-49页 |
| ·总 RNA的抽提 | 第49页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第49页 |
| ·目的片段的克隆确证 | 第49页 |
| ·荧光定量 PCR | 第49-50页 |
| ·标准品质粒的制备 | 第49-50页 |
| ·荧光定量 PCR检测 | 第50页 |
| ·荧光定量 PCR结果分析 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-55页 |
| ·总RNA质量及浓度 | 第50-51页 |
| ·目的基因片段的克隆 | 第51-52页 |
| ·目的基因片段的扩增 | 第51-52页 |
| ·目的片段的序列分析 | 第52页 |
| ·质粒DNA标准品的制备 | 第52页 |
| ·荧光定量 PCR结果 | 第52-55页 |
| ·标准曲线的制备 | 第52-53页 |
| ·荧光定量 PCR的特异性和重复性 | 第53-55页 |
| ·基因表达量的检测结果和分析 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 第6章 总结 | 第57-58页 |
| 本研究的创新点 | 第58页 |
| 研究展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| Abstract | 第66-68页 |
| 附录 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |