中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-10页 |
前言 | 第10-12页 |
实验研究 | 第12-66页 |
第一章 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株M基因的扩增克隆、序列及高级结构分析 | 第12-35页 |
1 材料和方法 | 第13-20页 |
·实验材料 | 第13-14页 |
·种毒、传代细胞、菌株及克隆载体 | 第13页 |
·主要试剂 | 第13页 |
·主要仪器 | 第13页 |
·生物信息学相关软件与资源 | 第13-14页 |
·实验方法 | 第14-20页 |
·技术路线 | 第14页 |
·TGEV病毒增殖 | 第14-15页 |
·RNA模板的制备 | 第15页 |
·TGEV-M蛋白基因的扩增 | 第15-16页 |
·TGEV-M蛋白基因RT-PCR扩增产物的TA克隆 | 第16-19页 |
·TGEV SC-Y株M蛋白基因、氨基酸序列及高级结构分析 | 第19-20页 |
2 结果 | 第20-26页 |
3 讨论 | 第26-32页 |
4 结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-35页 |
第二章 猪传染性胃肠炎M蛋白在原核表达载体pET-32a(+)中表达研究 | 第35-56页 |
1 材料和方法 | 第35-43页 |
·实验材料 | 第35-37页 |
·菌株和质粒 | 第35-36页 |
·主要试剂及其配制 | 第36-37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-43页 |
·实验技术路线 | 第37-38页 |
·M蛋白去信号肽基因TA克隆质粒的构建 | 第38-39页 |
·M蛋白去信号肽基因重组pET32a(+)原核表达质粒构建 | 第39-40页 |
·M蛋白完整阅读框重组pET32a(+)原核表达载体的构建 | 第40页 |
·M蛋白及其去信号肽蛋白在原核表达系统中的表达研究 | 第40-43页 |
2 结果 | 第43-50页 |
3 讨论 | 第50-54页 |
4 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-56页 |
第三章 猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因真核表达载体的构建 | 第56-66页 |
1 材料和方法 | 第56-60页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·菌株、质粒和表达载体 | 第56-57页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-60页 |
·实验技术路线 | 第57页 |
·引物设计 | 第57-58页 |
·TGEV-M蛋白基因的质粒PCR扩增及产物的回收纯化 | 第58页 |
·TGEV-M蛋白基因的质粒PCR扩增产物TA克隆 | 第58-59页 |
·TGEV-M基因在pEGFP-C1表达质粒中的定向克隆 | 第59-60页 |
2 结果 | 第60-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
4 结论 | 第64页 |
参考文献 | 第64-66页 |
文献综述 | 第66-79页 |
猪传染性胃肠炎病毒研究进展 | 第66-75页 |
1 TGEV基因组结构及其表达 | 第66-68页 |
·病毒基因组结构 | 第66-67页 |
·病毒基因表达 | 第67-68页 |
2 TGEV蛋白的结构与功能 | 第68-71页 |
·非结构蛋白 | 第68页 |
·结构蛋白 | 第68-71页 |
·TGEV-S蛋白 | 第69页 |
·TGEV-M蛋白 | 第69-70页 |
·TGEV-N蛋白 | 第70页 |
·sM蛋白 | 第70-71页 |
3 TGEV基因工程的研究 | 第71-72页 |
·TGEV基因工程载体研究 | 第71页 |
·TGEV基因工程疫苗的研究 | 第71-72页 |
4 TGEV分子生物学诊断技术 | 第72页 |
5 我国TGEV研究近况 | 第72-74页 |
6 问题与展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
发表文章 | 第80-81页 |
附录 | 第81-85页 |