中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
文献综述 | 第7-12页 |
1. 血红素生物合成研究进展 | 第7-9页 |
2. 卟啉生物合成共有酶类研究进展 | 第9-12页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶 | 第9-10页 |
·胆色素原脱氨酶 | 第10页 |
·尿卟啉原III 合酶 | 第10-12页 |
前言 | 第12-16页 |
1. 植物 PBGD 研究进展 | 第12-15页 |
2. 本实验的研究意义 | 第15页 |
3. 实验的研究内容及技术路线 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-33页 |
1 试验材料 | 第16页 |
2 仪器设备和试剂 | 第16-17页 |
3 方法 | 第17-33页 |
·重组豌豆胆色素原脱氨酶表达载体的构建 | 第17-23页 |
·豌豆胆色素原脱氨酶定点突变 | 第23-24页 |
·共表达载体的构建 | 第24-30页 |
·低拷贝尿卟啉原III合酶表达载体pA-UROS的构建 | 第24-27页 |
·低拷贝5-氨基酮戊酸脱水酶表达载体pA-ALAD 的构建 | 第27-30页 |
·共表达载体的转化 | 第30页 |
·重组豌豆胆色素脱氨酶的诱导表达 | 第30-33页 |
·PA 和PU 共表达菌株的培养与诱导表达 | 第30-31页 |
·重组胆色素原脱氨酶的纯化 | 第31页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第31-33页 |
结果与分析 | 第33-41页 |
1 豌豆胆色素原脱氨酶表达载体的构建 | 第33-36页 |
·双标签载体pQE305 的构建 | 第33-34页 |
·PCR 扩增胆色素原脱氨酶基因 | 第34页 |
·表达载体pQE305PBGD 的构建 | 第34-35页 |
·表达载体p28PBGD载体的构建 | 第35-36页 |
2 豌豆胆色素原脱氨酶定点突变 | 第36-37页 |
3 共表达载体的构建 | 第37-39页 |
·表达载体pA-UROS 的构建 | 第37-38页 |
·表达载体pA-ALAD 构建 | 第38-39页 |
·共表达菌株的转化与筛选 | 第39页 |
4 PBGD 的诱导表达与纯化 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-45页 |
1 豌豆胆色素脱氨酶共表达载体的构建 | 第41-42页 |
2 共表达载体构建策略的探讨 | 第42页 |
3 双标签表达载体的应用 | 第42-43页 |
4 定点突变在胆色素原脱氨酶研究中的应用 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52-53页 |
附页 | 第53-56页 |