第一部分 前言 | 第1-13页 |
1.1 人巨细胞病毒的研究现状 | 第7-9页 |
1.2 人巨细胞病毒感染的诊断方法 | 第9-12页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第12-13页 |
第二部分 材料与方法 | 第13-28页 |
2.1 实验仪器,材料和试剂 | 第13-16页 |
2.2 本研究的技术路线 | 第16-17页 |
2.3 实验方法 | 第17-28页 |
第三部分 实验结果 | 第28-35页 |
3.1 PCR法获得目的基因片段 | 第28页 |
3.2 重组质粒的构建和鉴定 | 第28-29页 |
3.3 重组质粒转化酵母和重组子的筛选 | 第29页 |
3.4 rHCMVp基因在酵母中的表达 | 第29-30页 |
3.5 rHCMVp高密度发酵条件的优化 | 第30-31页 |
3.6 工程菌株高密度发酵诱导培养 | 第31-32页 |
3.7 目的产物的纯化 | 第32-34页 |
3.8 目的蛋白活性实验 | 第34-35页 |
第四部分 讨论 | 第35-44页 |
4.1 表达载体的构建与鉴定 | 第35-36页 |
4.2 rHCMVp基因的电转化和酵母表达菌株的筛选 | 第36-37页 |
4.3 在巴斯德毕赤酵母中的表达条件的研究 | 第37-38页 |
4.4 巴斯德毕赤酵母高密度发酵 | 第38-40页 |
4.5 表达目的产物的纯化 | 第40-41页 |
4.6 目的蛋白生物活性研究 | 第41-42页 |
4.7 小结 | 第42-44页 |
第五部分 参考文献 | 第44-50页 |
附录一 各种试剂的配制方法 | 第50-55页 |
附录二 重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽的DNA测序结果 | 第55-56页 |
附录三 重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽的氨基酸序列 | 第56-57页 |
附录四 英文缩略词索引 | 第57-58页 |
附录五 在校期间发表研究论文情况 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |