阿非利加棉细菌人工染色体文库的构建
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| ·野生棉资源 | 第13页 |
| ·细菌人工染色体的发展 | 第13-14页 |
| ·细菌人工染色体的优点 | 第14-15页 |
| ·细菌人工染色体文库的应用 | 第15-18页 |
| ·基因组测序 | 第15页 |
| ·基因组物理图谱构建 | 第15-16页 |
| ·基因的图位克隆 | 第16-17页 |
| ·转基因技术 | 第17页 |
| ·BAC 与 FISH 相结合的应用 | 第17-18页 |
| ·BAC 文库研究进展 | 第18-20页 |
| ·BAC 文库的筛选 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 材料和方法 | 第22-35页 |
| ·仪器与试剂 | 第22页 |
| ·仪器设备与易耗品 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-35页 |
| ·黄化苗的培养 | 第22-23页 |
| ·高分子量基因组 DNA 的提取 | 第23页 |
| ·胶块质量的检测 | 第23页 |
| ·非目的片段的去除 | 第23-24页 |
| ·部分酶切最佳酶量的确定 | 第24-25页 |
| ·大片段 DNA 的大量酶切 | 第25-26页 |
| ·高分子量 DNA 酶切片段的第一次选择 | 第26-27页 |
| ·高分子量 DNA 酶切片段的第二次选择 | 第27-28页 |
| ·酶切片段的回收 | 第28页 |
| ·DNA 浓度的检测 | 第28-29页 |
| ·大片段 DNA 与载体的连接 | 第29-30页 |
| ·连接产物的转化 | 第30页 |
| ·BAC 克隆的分析 | 第30-31页 |
| ·BAC 文库的保存和复制 | 第31页 |
| ·单克隆文库一级池的构建 | 第31-32页 |
| ·BAC 文库一级池的筛选 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增产物检测 | 第33-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-42页 |
| ·胶块的制备 | 第35页 |
| ·DNA 质量检测 | 第35-36页 |
| ·细胞核 DNA 的部分酶切及最适酶量的确定 | 第36-37页 |
| ·大片段 DNA 的两次选择 | 第37-38页 |
| ·二次选择后大片段浓度的估测 | 第38页 |
| ·大片段 DNA 和载体的连接及转化 | 第38-39页 |
| ·BAC 文库插入片段检测 | 第39-40页 |
| ·基于抗黄萎病 SSR 标记的 BAC 文库筛选 | 第40-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-48页 |
| ·高分子量基因组 DNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·部分酶切条件的确定 | 第43页 |
| ·酶切片段的两次选择 | 第43-45页 |
| ·大片段 DNA 的回收和连接 | 第45-46页 |
| ·大片段 DNA 的电击转化效率 | 第46页 |
| ·BAC 克隆的保存 | 第46-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录:主要试剂配方 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
