| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-26页 |
| 1.植酸及其植酸盐的分布、结构、理化性质和作用 | 第10-14页 |
| ·植酸及其植酸盐的分布 | 第10-11页 |
| ·植酸的结构 | 第11-12页 |
| ·植酸的理化性质 | 第12页 |
| ·植酸的作用 | 第12-14页 |
| ·植酸的负面作用 | 第12-14页 |
| ·植酸的正面作用 | 第14页 |
| 2.产植酸酶的物种及植酸酶的分类 | 第14-16页 |
| ·产植酸酶的物种 | 第14-15页 |
| ·植酸酶的分类 | 第15-16页 |
| 3.植酸酶的功能 | 第16-17页 |
| 4.植酸酶基因的分子生物学特征 | 第17-18页 |
| 5.植酸酶的高级结构 | 第18-19页 |
| 6.真菌植酸酶的分子生物学研究 | 第19-21页 |
| ·真菌植酸酶的基因的分子生物学特征 | 第20页 |
| ·真菌植酸酶基因ORF编码的多肽、信号肽及其糖基化位点 | 第20-21页 |
| 7.植酸酶耐热性的研究进展 | 第21-24页 |
| ·传统方法提高植酸酶的耐热性 | 第21-22页 |
| ·筛选产耐热植酸酶的菌株 | 第21页 |
| ·添加保护剂以提高植酸酶的耐热性 | 第21-22页 |
| ·分子生物学方法对植酸酶进行分子改造 | 第22-23页 |
| ·植酸酶分子进行蛋白质修饰，特别是糖基化修饰 | 第22页 |
| ·利用定点突变技术对植酸酶进行改造 | 第22-23页 |
| ·共同序列理论(Consensus Concept)的应用 | 第23页 |
| ·植酸酶耐热机理的研究 | 第23-24页 |
| ·改变植酸酶蛋白质氨基酸分子的长度 | 第23页 |
| ·植酸酶分子空间构象的推测 | 第23页 |
| ·共同序列理论(Consensus Concept)的验证 | 第23-24页 |
| ·植酸酶空间二级结构的改变 | 第24页 |
| ·对植酸酶在一定温度下的荧光分析 | 第24页 |
| 8.植酸酶在应用过程中存在的主要问题及展望 | 第24-25页 |
| 9.本文主要研究工作及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 青霉Q-7的菌种鉴定 | 第26-34页 |
| ·材料与方法 | 第26-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·主要的试剂 | 第26-27页 |
| ·菌种的形态学观察 | 第27页 |
| ·菌株18SrDNA克隆技术 | 第27-30页 |
| ·青霉染色体总DNA的提取和纯化 | 第27-28页 |
| ·PCR引物设计合成 | 第28页 |
| ·PCR扩增反应 | 第28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳技术 | 第28页 |
| ·PCR样品的纯化(DNA琼脂糖凝胶回收) | 第28-29页 |
| ·连接反应 | 第29页 |
| ·CaCl_2法转化大肠杆菌 | 第29页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第29-30页 |
| ·转化质粒的提取 | 第30页 |
| ·目的基因的全序列测定 | 第30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-34页 |
| ·培养特征和形态 | 第31页 |
| ·18SrDNA同源性分析 | 第31-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 青霉Q-7植酸酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达 | 第34-58页 |
| ·青霉Q-7植酸酶基因的克隆 | 第34-51页 |
| ·材料与方法 | 第34-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·培养基及培养条件 | 第35页 |
| ·菌种保藏技术 | 第35页 |
| ·DNA克隆技术 | 第35-37页 |
| ·青霉Q-7染色体总DNA的提取和纯化 | 第35-36页 |
| ·BamHⅠ单酶切pUC19质粒 | 第35-36页 |
| ·Sau3AⅠ部分酶切青霉总DNA | 第36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳技术 | 第36页 |
| ·琼脂糖凝胶回收酶切产物 | 第36页 |
| ·连接反应 | 第36页 |
| ·CaCl_2法转化大肠杆菌 | 第36页 |
| ·重组质粒pUC19-A的筛选 | 第36页 |
| ·PCR引物设计合成 | 第36页 |
| ·PCR扩增反应 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增反应产物的全序列测定 | 第37页 |
| ·目的基因的全序列测定 | 第37页 |
| ·全序列植酸酶基因的扩增和测序 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-51页 |
| ·青霉植酸酶保守序列上游PCR结果 | 第37-38页 |
| ·PCR产物测序结果 | 第38-40页 |
| ·青霉植酸酶保守序列下游PCR结果 | 第40页 |
| ·青霉植酸酶保守序列下游PCR产物测序结果 | 第40-44页 |
| ·青霉Q-7植酸酶染色体基因全序列的克隆 | 第44-45页 |
| ·质粒pMD18-T与重组质粒pMD18-T-phyA的物理图谱 | 第45-46页 |
| ·青霉Q-7植酸酶染色体基因全序列的测序 | 第46-48页 |
| ·青霉Q-7phyA基因及其所编码蛋白的性质分析 | 第48-51页 |
| ·青霉Q-7植酸酶基因在毕赤酵母SMD1168中的分泌表达 | 第51-58页 |
| ·材料与方法 | 第51-55页 |
| ·菌株与质粒 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52-53页 |
| ·酶切、连接反应 | 第53页 |
| ·CaCl_2法转化大肠杆菌 | 第53页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第53页 |
| ·重组质粒转化毕赤酵母 | 第53-54页 |
| ·目的菌株的筛选 | 第54页 |
| ·重组酵母的PCR鉴定 | 第54页 |
| ·重组酵母的诱导表达 | 第54-55页 |
| ·实验结果与讨论 | 第55-58页 |
| ·重组质粒pPIC9-phyA的筛选、验证 | 第55页 |
| ·质粒pPIC9及重组质粒pPIC9-phyA的物理图谱 | 第55-56页 |
| ·组酵母SMD1168-phyA的筛选 | 第56-57页 |
| ·重组酵母SMD1168-phyA的PCR验证 | 第57-58页 |
| 总结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
