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H5亚型禽流感DNA疫苗的细胞免疫应答及联合免疫研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 引言第14-21页
   ·禽流感病毒概述第14-16页
     ·禽流感的病原第14页
     ·禽流感病毒的毒力及变异的分子基础第14-16页
   ·禽流感疫苗的发展现状第16页
     ·灭活疫苗(inactivated vaccine)第16页
     ·亚单位疫苗(subunit vaccine)第16页
     ·重组活载体疫苗(Recombinant Live Influenza Virus Vaccine)第16页
   ·DNA疫苗的研究进展第16-18页
     ·DNA疫苗的进展第17页
     ·DNA疫苗的主要特点第17页
     ·提高DNA疫苗免疫效果的方法第17-18页
     ·DNA疫苗的免疫应答及其效果评价第18页
   ·杆状病毒表达系统第18-19页
     ·杆状病毒表达系统的优点第18-19页
     ·杆状病毒表达系统的不足第19页
     ·Bac-to-Bac系统第19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
第二章 流感病毒血凝素蛋白的真核表达第21-29页
   ·材料第21-22页
     ·质粒和阳性抗原第21页
     ·试剂第21页
     ·主要仪器与材料第21页
     ·配制的主要溶液第21-22页
   ·实验方法第22-24页
     ·引物的设计与合成第22页
     ·HA 基因的 PCR 扩增第22页
     ·AIV HA基因杆状病毒转移载体的构建第22-23页
     ·重组杆粒的获得第23页
     ·重组杆状病毒的获得第23页
     ·重组杆状病毒目的蛋白的检测第23-24页
   ·结果第24-27页
     ·PCR扩增产物及重组转移载体 pFast-HA 的鉴定第24-25页
     ·重组杆粒rBacmid-HA的鉴定结果第25-26页
     ·免疫荧光检测结果第26页
     ·SDS-PAGE与Western-blot鉴定第26-27页
     ·目的蛋白的血凝试验结果第27页
   ·讨论第27-29页
第三章 DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5免疫SPF鸡的细胞免疫水平评价第29-43页
   ·实验材料第29-30页
     ·疫苗及攻毒用毒株第29页
     ·主要试剂和仪器第29页
     ·SPF 鸡与鸡胚第29页
     ·0.75%鸡红细胞悬液的制备第29页
     ·8 单位抗原的配制第29页
     ·外周血 T 淋巴细胞的制备第29-30页
     ·脾脏 T 淋巴细胞的制备第30页
   ·实验方法第30-31页
     ·试验动物分组、疫苗免疫及攻毒第30页
     ·疫苗免疫效力试验第30页
     ·细胞免疫应答水平的评价第30-31页
   ·结果第31-41页
     ·疫苗免疫效力试验结果第31-33页
     ·细胞免疫水平评价结果第33-41页
   ·讨论第41-43页
第四章 不同抗原群H5亚型禽流感DNA疫苗联合免疫的保护效力第43-52页
   ·材料及方法第43-44页
     ·病毒第43页
     ·DNA疫苗质粒第43页
     ·SPF鸡胚和SPF鸡第43页
     ·阳性抗原第43页
     ·免疫方法第43页
     ·DNA疫苗不同剂量联合免疫对SPF鸡的免疫保护试验第43-44页
   ·结果第44-50页
     ·不同抗原群DNA疫苗联合免疫SPF鸡对GS/GD/1/96的免疫保护效力试验第44-45页
     ·不同抗原群DNA疫苗联合免疫SPF鸡对DK/FJ/31/2007免疫保护效力试验第45-47页
     ·不同抗原群DNA 疫苗联合免疫SPF鸡对CK/SX/2/2006免疫保护效力试验第47-50页
   ·讨论第50-52页
全文结论第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页
作者简历第60页

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