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GA对大白菜开花的诱导效应及利用RNAi技术获得晚抽薹转基因大白菜

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-15页
Ⅰ.引言第15-39页
 1 植物的开花生理第15-39页
   ·高等植物开花机理研究第15-22页
     ·高等植物开花过程中物质等代谢的变化第15-17页
     ·高等植物开花过程的分子机理研究第17-22页
   ·十字花科蔬菜中开花相关基因的分离及其功能第22-24页
   ·GA在植物成花中的作用第24-26页
   ·LFY基因的特点及其在基因调控网络中的作用第26-31页
     ·LFY基因的时空表达第27-28页
     ·LFY基因在成花各阶段中的作用第28-29页
     ·影响LFY表达的生理因子第29-31页
   ·基因沉默研究第31-37页
     ·RNA沉默现象的机制及其应用第31-35页
     ·RNA沉默的生物学意义第35-36页
     ·RNA沉默的应用第36-37页
   ·本研究的立题依据第37-39页
Ⅱ 研究报告第39-95页
 第一章 GA处理对大白菜碳水化合物含量的影响第39-44页
   ·材料和方法第39页
     ·试验材料和GA处理第39页
     ·碳水化合物含量的测定第39页
   ·结果与分析第39-41页
     ·可溶性糖的变化第39-40页
     ·蔗糖含量的变化第40-41页
     ·淀粉含量的变化第41页
   ·讨论第41-44页
 第二章 GA处理后大白菜体内蛋白质、酶和DNA甲基化水平的变化第44-54页
   ·材料与方法第44-46页
     ·植物材料和GA处理第44-46页
       ·可溶性蛋白含量的测定第44页
       ·过氧化物同工酶(POD)活性的测定第44页
       ·α-淀粉酶活性的测定第44-45页
       ·酯酶EST活性测定第45页
       ·DNA甲基化水平的测定第45页
       ·内源GA含量的测定第45-46页
   ·结果与分析第46-52页
     ·GA处理对大白菜可溶性蛋白含量的影响第46-47页
     ·GA处理对大白菜同工酶活性的影响第47-52页
       ·GA处理对大白菜POD活性的影响第47-48页
       ·GA处理对大白菜α-淀粉酶活性的影响第48页
       ·GA处理对大白菜EST活性的影响第48-49页
       ·GA处理对大白菜DNA甲基化的影响第49页
       ·GA处理对大白菜内源GA含量的影响第49-50页
       ·GA处理对LFY基因表达的影响第50-52页
   ·讨论第52-54页
 第三章 大白菜开花基因LFY的克隆、dsRNA-LFY植物表达载体的构建第54-69页
   ·材料与方法第54页
     ·材料第54页
     ·菌种及质粒第54页
     ·试剂第54页
   ·方法第54-65页
     ·RNA的提取方法第54-55页
     ·LFY基因的克隆第55-58页
     ·双链RNA抑制载体dsRNA-LFY的构建第58-63页
     ·重组植物表达载体向农杆菌的转化第63-65页
   ·结果与分析第65-67页
     ·LFY基因的克隆及反义和正义LFY基因的PCR扩增第65-66页
     ·双链RNA抑制载体的构建第66-67页
   ·讨论第67-69页
     ·关于引发RNA沉默片断长度及内含子片段的探讨第68-69页
     ·使用RNA干扰技术时应注意的问题第69页
 第四章 大白菜再生体系和遗传转化体系的建立第69-77页
   ·试验材料和方法第69-71页
     ·无菌苗的获得第70页
     ·外植体及接种方式第70页
     ·遗传转化所用的植物材料、菌株及抗生素第70页
     ·培养基第70页
     ·双链dsRNA-LFY转化植株的获得第70-71页
     ·T_0代转基因植株的扩繁第71页
   ·实验结果与分析第71-75页
     ·pH和琼脂糖浓度对对大白菜子叶-子叶柄的诱导及其转化频率第71-73页
     ·大白菜dsRNA-LFY片段转化植株的获得第73-75页
   ·讨论第75-77页
 第五章 转基因植株的分子检测和生理生化指标的检测第77-86页
   ·材料和方法第77-81页
     ·材料第77页
     ·植物基因组DNA和总RNA的提取第77-78页
     ·转化植株的PCR检测第78页
     ·转化植株Southern blot检测第78-80页
     ·转化植株Northern blot检测第80-81页
   ·结果与分析第81-83页
     ·转化植株的PCR检测第81-82页
     ·抗性植株的Southern blot检测第82页
     ·转化植株的Northern blot检测第82-83页
   ·讨论第83-86页
 第六章 转基因植株的形态学及相关生理生化指标的分析第86-94页
   ·材料与方法第86页
     ·试验材料第86页
     ·试验方法第86页
   ·结果与分析第86-89页
     ·转基因植株的形态变化第86-87页
     ·转基因大白菜碳水化合物含量的变化第87-88页
     ·转基因大白菜可溶性蛋白含量及同功酶活性的变化第88页
     ·转基因植株激素水平的变化第88-89页
   ·讨论第89-94页
     ·转入LFY基因后,增加了大白菜开花时的叶片数第89-90页
     ·转入LFY基因后,改变了大白菜体内碳水化合物的含量第90页
     ·转入LFY基因后,改变了植株体内可溶性蛋白含量和同工酶的活性第90-91页
     ·转入LFY基因后,改变了植株体内激素的水平第91-94页
 7 结论第94-95页
参考文献第95-113页
附录第113-116页
致谢第116-117页
在读期间发表论文情况第117页

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