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牛完全体外生产胚胎及胚胎性别鉴定取样方法研究

文献综述部分第1-61页
 摘要第9-13页
 第一章 哺乳动物卵母细胞体外生产胚胎的生物学原理与研究进展第13-56页
  1 哺乳动物卵母细胞体外成熟的生物学原理与研究进展第13-21页
   ·卵母细胞的形成及其生长发育第13-14页
   ·卵母细胞体外成熟的特征第14页
   ·影响卵母细胞体外成熟的因素第14-20页
     ·动物的种类与年龄第14-15页
     ·卵巢运送时间与保存温度第15页
     ·采集卵母细胞所选卵泡的大小与形态第15页
     ·卵母细胞的级别第15页
     ·卵母细胞体外培养条件第15-16页
     ·卵母细胞体外培养的培养基组分第16-20页
   ·卵母细胞成熟调控机制第20-21页
     ·MPF的作用机制第20页
     ·CSF的作用机制第20-21页
     ·OMI的作用机制第21页
     ·cAMP的作用机制第21页
  2 卵母细胞体外受精与精子的体外获能第21-32页
   ·哺乳动物卵母细胞体外受精的研究历程第21-25页
     ·哺乳动物卵母细胞体外受精的早期探索第21-22页
     ·精子获能的发现第22-24页
     ·顶体反应的发现第24页
     ·胚胎的体外培养第24-25页
   ·精子体外获能第25-28页
     ·精子体外获能机制第25-26页
     ·影响精子体外获能的因素第26-27页
     ·精子体外获能方法第27-28页
   ·卵母细胞体外受精第28-31页
     ·卵母细胞预处理第28-29页
     ·卵母细胞体外受精第29页
     ·精卵结合的同步性第29页
     ·卵母细胞受精时间第29页
     ·提高精子活力的措施第29-30页
     ·异常受精的几种情况第30-31页
   ·精卵识别的分子基础第31页
   ·卵母细胞受精后原核形成与融合第31-32页
  3 哺乳动物卵母细胞孤雌激活的生物学原理与研究进展第32-39页
   ·哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究历程第32页
   ·卵母细胞孤雌激活的机理第32-34页
   ·卵母细胞孤雌激活的方法与途径第34-38页
   ·孤雌激活的卵母细胞的核型类型第38页
   ·孤雌胚的发育情况第38-39页
  4 哺乳动物早期胚胎体外培养的生物学原理与研究进展第39-46页
   ·早期胚胎代谢特点第39页
   ·早期胚胎基因组的激活与启动第39页
   ·早期胚胎发育阻滞第39-40页
   ·早期胚胎发育阻滞的突破第40页
   ·胚胎体外培养的关键因素第40-46页
  5 小结与展望第46-47页
  参考文献第47-56页
 第二章 PCR法胚胎性别鉴定的研究进展与生物学原理第56-61页
  1 哺乳动物性别决定因子的发现与研究进展第56页
  2 哺乳动物性别决定基因SRY的分子结构第56-57页
  3 哺乳动物性别决定的生物学机制第57页
  4 早期胚胎性别鉴定的主要方法第57页
  5 PCR技术原理第57页
  6 PCR扩增SRY进行早期胚胎性别鉴定的主要技术环节第57-60页
  参考文献第60-61页
实验研究部分第61-112页
 第三章 牛卵泡卵母细胞体外成熟第61-78页
  1 材料与方法第61-64页
   ·实验材料第61-62页
     ·主要仪器第61-62页
     ·试剂与耗材第62页
   ·实验方法第62-64页
     ·牛卵巢的采集、运输与前处理第62页
     ·牛卵泡卵母细胞的采集第62-63页
     ·卵母细胞筛选与分级第63页
     ·卵母细胞成熟培养的基础培养体系第63页
     ·卵母细胞的体外成熟鉴定第63页
     ·实验设计与结果统计第63-64页
  2 实验结果第64-71页
   ·牛卵巢不同大小卵泡卵母细胞体外成熟培养的影响第64-65页
   ·不同激素及其浓度对牛卵母细胞成熟培养的影响第65-68页
     ·17β-E2、LH、FSH单因子实验第65-66页
     ·17β-E2、LH、FSH二次回归正交旋转组合试验第66-68页
   ·有无血清及不同类型血清对牛卵母细胞体外成熟培养的影响第68-69页
   ·大卵泡液对牛卵母细胞成熟培养的影响第69-70页
     ·添加激素与血清后大卵泡液对牛卵母细胞成熟培养的影响第69页
     ·无激素与血清存在大卵泡液对牛卵母细胞成熟培养的影响第69-70页
   ·不同培养时间对牛卵母细胞成熟的影响第70-71页
  3 讨论第71-75页
   ·牛卵巢不同卵泡大小对卵母细胞体外成熟培养的影响第71页
   ·不同激素及其浓度对牛卵母细胞成熟培养的影响第71-72页
   ·有无血清及不同类型血清对牛卵母细胞体外成熟培养的影响第72-73页
   ·大卵泡液对牛卵母细胞成熟培养的影响第73-74页
   ·不同培养时间对牛卵母细胞成熟的影响第74-75页
  4 结论第75-76页
  参考文献第76-78页
 第四章 牛卵泡卵母细胞体外受精第78-87页
  1 材料与方法第78-80页
   ·实验材料第78-79页
     ·主要仪器第78页
     ·试剂与耗材第78-79页
     ·操作液第79页
   ·实验方法第79-80页
     ·卵母细胞采集、分级与体外成熟培养第79页
     ·精液解冻、洗涤与精子获能第79页
     ·实验设计与结果统计第79-80页
  2 实验结果第80-83页
   ·咖啡因和肝素钠对卵母细胞体外受精的影响第80-82页
     ·肝素钠对卵母细胞体外受精的影响第80-81页
     ·咖啡因对卵母细胞体外受精的影响第81页
     ·肝素钠与咖啡因组合试验对卵母细胞体外受精的影响第81-82页
   ·不同层数卵丘细胞对卵母细胞体外受精效果的影响第82-83页
   ·不同精卵共孵育时间对卵母细胞体外受精效果的影响第83页
  3 讨论第83-85页
   ·咖啡因和肝素钠对卵母细胞体外受精的影响第83-84页
   ·不同层数卵丘细胞对卵母细胞体外受精效果的影响第84页
   ·不同精卵共孵育时间对卵母细胞体外受精效果的影响第84-85页
  4 结论第85-86页
  参考文献第86-87页
 第五章 牛卵泡卵母细胞孤雌激活第87-95页
  1 材料与方法第87-89页
   ·实验材料第87-88页
     ·主要仪器第87页
     ·试剂与耗材第87-88页
     ·操作液第88页
   ·实验方法第88-89页
     ·卵母细胞成熟与孤雌激活前处理第88页
     ·孤雌胚体外培养第88页
     ·颗粒细胞单层的制作第88-89页
     ·实验设计与结果统计第89页
  2 实验结果第89-91页
   ·Ionomycin与不同浓度6-DMAP联合对卵母细胞激活效果的影响第89-90页
   ·乙醇与不同浓度6-DMAP联合对卵母细胞激活效果的影响第90页
   ·在2.0mM6-DMAP配合下Ionomycin与乙醇对卵母细胞激活效果比较第90-91页
   ·6-DMAP不同处理时间对卵母细胞激活效果的影响第91页
  3 讨论第91-93页
   ·Ionomycin与不同浓度6-DMAP联合对卵母细胞激活效果的影响第91-92页
   ·乙醇与不同浓度6-DMAP联合对卵母细胞激活效果的影响第92页
   ·6-DMAP不同处理时间对卵母细胞激活效果的影响第92-93页
  4 结论第93-94页
  参考文献第94-95页
 第六章 牛早期胚胎体外培养第95-102页
  1 材料与方法第95-97页
   ·实验材料第95-96页
     ·主要仪器第95页
     ·试剂与耗材第95-96页
     ·操作液第96页
   ·实验方法第96-97页
     ·卵母细胞采集、分级与体外成熟培养第96页
     ·卵母细胞体外受精第96页
     ·颗粒细胞单层的制作第96页
     ·实验设计与结果统计第96-97页
  2 实验结果第97-98页
   ·培养液体积对卵母细胞IVM、IVF、IVC的影响第97页
   ·颗粒细胞对牛卵母细胞及早期胚胎体外培养的影响第97-98页
   ·表皮生长因子EGF对牛卵母细胞及早期胚胎体外培养的影响第98页
  3 讨论第98-100页
   ·培养液体积对卵母细胞IVM、IVF、IVC的影响第98-99页
   ·颗粒细胞对牛卵母细胞及早期胚胎体外培养的影响第99-100页
   ·EGF对牛卵母细胞及早期胚胎体外培养的影响第100页
  4 结论第100-101页
  参考文献第101-102页
 第七章 牛早期胚胎性别鉴定不同取样方法研究第102-107页
  1 材料与方法第102-104页
   ·实验材料第102-103页
     ·胚胎第102页
     ·仪器第102页
     ·PCR性别鉴定所用引物第102-103页
     ·受体牛第103页
   ·实验方法第103-104页
     ·胚胎细胞取样方法第103页
     ·胚胎性别鉴定方法第103页
     ·两种采样法PCR性别鉴定准确性比较第103-104页
     ·两种采样法对不同发育时期胚胎的损伤程度的比较第104页
  2 结果与分析第104-106页
   ·两种采样法PCR性别鉴定准确性比较第104-105页
     ·PCR性别鉴定结果第104-105页
     ·妊娠结果对PCR性别鉴定结果的验证第105页
   ·两种采样法对不同发育时期胚胎的损伤程度比较结果第105-106页
  3 讨论与结论第106页
  参考文献第106-107页
 第八章 牛卵母细胞体外生产胚胎图谱第107-112页
英文摘要第112-114页

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