| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-23页 |
| 第一章 MAL-PEG-LG和MAL-PEG-rHuTNF-α的合成、分离和纯化 | 第23-53页 |
| 一、蛋白质和PEG的含量测定 | 第24-30页 |
| 1 材料与仪器 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-25页 |
| ·LG的含量测定(Brafofd法) | 第24-25页 |
| ·rHuTNF-α的含量测定(Braford法) | 第25页 |
| ·NHS-PEG-MAL含量测定(两相法) | 第25页 |
| 3 结果与讨论 | 第25-30页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第25-28页 |
| ·NHS-PEG-MAL含量测定 | 第28-30页 |
| 二、PEG化LG的合成、分离和纯化 | 第30-42页 |
| 1 材料与仪器 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-33页 |
| ·单因素考察LG与NHS-PEG-MAL的连接条件 | 第31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法考察连接反应程度 | 第31-32页 |
| ·图象分析系统测定LG的PEG修饰程度 | 第32-33页 |
| ·凝胶过滤色谱法分离纯化MAL-PEG-LG | 第33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-42页 |
| ·MAL-PEG-LG的合成和SDS-PAGE分析 | 第33-37页 |
| ·图象分析系统测定LG的PEG修饰度 | 第37-39页 |
| ·凝胶过滤色谱法分离MAL-PEG-LG | 第39-42页 |
| 三、PEG化rHuTNF-α的合成、分离和纯化 | 第42-50页 |
| 1 材料与仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-43页 |
| ·单因素考察rHuTNF-α与NHS-PEG-MAL的连接条件 | 第42页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法考察连接反应程度 | 第42页 |
| ·图象分析系统测定rHuTNF-α的PEG修饰程度 | 第42页 |
| ·灌注色谱法分离纯化MAL-PEG-rHuTNF-α | 第42-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-50页 |
| ·SDS-PAGE分析MAL-PEG-rHuTNF-α | 第43-46页 |
| ·PEG化rHuTNF-α的修饰程度分析 | 第46-47页 |
| ·反应终产物的分离纯化 | 第47-50页 |
| 本章小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第二章 Tf-PEG-LG和Tf-PEG-rHuTNF-α的制备、分离和纯化 | 第53-66页 |
| 1 材料与仪器 | 第53-54页 |
| 2 实验方法 | 第54-57页 |
| ·Tf含量测定标准曲线(Bradford法) | 第54页 |
| ·Tf的巯基化 | 第54-55页 |
| ·~(125)I-Tf-SH的制备 | 第55-56页 |
| ·~(125)I-Tf-PEG-LG的制备 | 第56-57页 |
| ·~(125)I-Tf-PEG-rHuTNF-α的制备 | 第57页 |
| 3 结果与讨论 | 第57-64页 |
| ·Tf含量测定标准曲线 | 第57页 |
| ·Tf的巯基化 | 第57-60页 |
| ·~(125)I-Tf-SH的制备 | 第60-61页 |
| ·~(125)I-Tf-PEG-LG的制备 | 第61-63页 |
| ·~(125)I-Tf-PEG-rHuTNF-α的制备 | 第63-64页 |
| 本章小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-66页 |
| 第三章 转铁蛋白-PEG-蛋白质复合物靶向肿瘤细胞机理的初步探讨 | 第66-89页 |
| 一、Tf、LG和rHuTNF-α放射性~(125)I的标记 | 第66-71页 |
| 1 材料与仪器 | 第66页 |
| 2 实验方法 | 第66-67页 |
| ·~(125)I-Tf(Fe)_2的制备 | 第67页 |
| ·~(125)I-LG的制备 | 第67页 |
| ·~(125)I-rHuTNF-α的制备 | 第67页 |
| 3 结果与讨论 | 第67-71页 |
| ·~(125)I-Tf(Fe)_2的制备 | 第67-68页 |
| ·~(125)I-LG的制备 | 第68-70页 |
| ·~(125)I-rHuTNF-α的制备 | 第70-71页 |
| 二、~(125)I-Tf(Fe)_2与细胞饱和结合研究 | 第71-77页 |
| 1 材料与仪器 | 第71页 |
| 2 实验方法 | 第71-73页 |
| ·细胞培养 | 第71-72页 |
| ·细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合动力学试验 | 第72页 |
| ·细胞浓度对~(125)I-Tf(Fe)_2与受体结合的影响试验 | 第72页 |
| ·细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合饱和试验 | 第72-73页 |
| 3 结果与讨论 | 第73-77页 |
| ·细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合动力学试验 | 第73页 |
| ·细胞浓度对~(125)I-Tf(Fe)_2与受体结合的影响试验 | 第73-74页 |
| ·细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合饱和试验 | 第74-77页 |
| 三、Tf-PEG-LG复合物与肿瘤细胞结合的特异性和亲和力评价 | 第77-82页 |
| 1 材料与仪器 | 第77页 |
| 2 实验方法 | 第77-78页 |
| ·肿瘤细胞与PL结合试验 | 第77页 |
| ·肿瘤细胞与TPL结合试验 | 第77-78页 |
| ·TPL竞争抑制肿瘤细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合试验 | 第78页 |
| 3 结果与讨论 | 第78-82页 |
| ·肿瘤细胞与PL结合试验 | 第78-79页 |
| ·肿瘤细胞与TPL结合试验 | 第79-81页 |
| ·TPL竞争抑制肿瘤细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合试验 | 第81-82页 |
| 四、Tf-PEG-rHuTNF-α复合物与肿瘤细胞结合的特异性和亲和力评价 | 第82-86页 |
| 1 材料与仪器 | 第82页 |
| 2 实验方法 | 第82页 |
| ·肿瘤细胞与PT结合试验 | 第82页 |
| ·肿瘤细胞与TPT结合试验 | 第82页 |
| ·TPT对肿瘤细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合的竞争抑制试验 | 第82页 |
| 3 结果与讨论 | 第82-86页 |
| ·肿瘤细胞与PT结合试验 | 第82-83页 |
| ·肿瘤细胞与TPT结合试验 | 第83-85页 |
| ·TPT竞争抑制肿瘤细胞与~(125)I-Tf(Fe)_2结合 | 第85-86页 |
| 本章小结 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 第四章 Tf-PEG-rHuTNF-α复合物体内药物动力学和组织分布研究 | 第89-106页 |
| 1 药品、材料、仪器与动物 | 第89页 |
| 2 实验方法 | 第89-90页 |
| ·大鼠体内药动学研究 | 第89-90页 |
| ·S-180实体瘤小鼠体内药物动力学、组织分布研究和靶向性评价 | 第90页 |
| 3 结果与讨论 | 第90-104页 |
| ·Tf-PEG-rHuTNF-α和MAL-PEG-rHuTNF-α在大鼠体内的药动学研究 | 第90-92页 |
| ·S-180实体瘤小鼠体内药物动力学、组织分布和靶向性评价 | 第92-104页 |
| 本章小结 | 第104页 |
| 参考文献 | 第104-106页 |
| 第五章 Tf-PEG-rHuTNF-α复合物体内药效学初步研究 | 第106-111页 |
| 1 药品、材料与动物 | 第106页 |
| 2 实验方法 | 第106-107页 |
| ·给药剂量初步摸索 | 第106-107页 |
| ·抗肿瘤活性研究 | 第107页 |
| 3 结果与讨论 | 第107-110页 |
| ·确定给药剂量 | 第107-108页 |
| ·Tf-PEG-rHuTNF-α复合物的抗肿瘤活性 | 第108-110页 |
| 本章小结 | 第110页 |
| 参考文献 | 第110-111页 |
| 全文结论与展望 | 第111-113页 |
| 综述 | 第113-127页 |
| 论文 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 论文独创性声明 | 第129页 |
| 论文使用授权声明 | 第129页 |
