| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| 图表一 览表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·乳蛋白的营养价值与激素调节 | 第13-18页 |
| ·乳蛋白的构成及其营养价值 | 第13-16页 |
| ·蛋白质 | 第13页 |
| ·乳蛋白质的生物活性肽 | 第13-16页 |
| ·乳蛋白的生物合成与调节 | 第16-18页 |
| ·乳蛋白的生物合成过程 | 第16-17页 |
| ·乳蛋白合成的激素调节 | 第17-18页 |
| ·营养因素对乳蛋白分泌的影响 | 第18-20页 |
| ·奶牛限制性必需氨基酸的研究现状 | 第18-19页 |
| ·限制性必需氨基酸对奶牛乳蛋白分泌的影响 | 第19-20页 |
| ·有待研究的内容 | 第20页 |
| ·本研究的目的与内容 | 第20-22页 |
| ·研究目的 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-22页 |
| 2 奶牛乳腺组织培养体外培养模型的选择 | 第22-32页 |
| ·材料和方法 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-25页 |
| ·乳腺组织取样与冷冻 | 第23页 |
| ·乳腺组织的培养 | 第23-24页 |
| ·台盼蓝染色观察培养奶牛乳腺组织死亡率 | 第24页 |
| ·培养奶牛乳腺组织死亡与增殖状况的测定(MTT比色法) | 第24页 |
| ·蛋白质浓度检测方法(紫外吸收法) | 第24-25页 |
| ·旋转、贴壁培养奶牛乳腺组织细胞基因DNA提取与琼脂凝胶电泳 | 第25页 |
| ·统计方法 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-30页 |
| ·旋转培养法 | 第25-27页 |
| ·旋转培养奶牛乳腺组织的形态变化 | 第25-26页 |
| ·旋转培养的奶牛乳腺组织活力的变化 | 第26-27页 |
| ·旋转培养的奶牛乳腺组织基因组DNA裂解的变化 | 第27页 |
| ·贴壁培养法 | 第27-30页 |
| ·贴壁培养奶牛乳腺组织的形态变化 | 第27-28页 |
| ·贴壁培养的奶牛乳腺组织活力的变化 | 第28-29页 |
| ·贴壁培养的奶牛乳腺组织基因组DNA裂解的变化 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| ·培养体系的建立 | 第30页 |
| ·培养添加物的作用 | 第30-31页 |
| ·建立乳腺组织培养体系的意义 | 第31-32页 |
| 3 酪蛋白α_(sl)基因及持家基因GAPDH RT-PCR条件探讨与序列分析 | 第32-42页 |
| ·材料和方法 | 第32-35页 |
| ·试验材料 | 第32-33页 |
| ·试验方法 | 第33-35页 |
| ·奶牛乳腺组织总RNA的提取 | 第33页 |
| ·cDNA合成 | 第33页 |
| ·cDNA扩增 | 第33-34页 |
| ·电泳 | 第34-35页 |
| ·扩增DNA核苷酸序列测定分析 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-39页 |
| ·总RNA提取液RNA纯度 | 第35页 |
| ·酪蛋白α_(al)与GAPDH基因扩增及序列分析 | 第35-37页 |
| ·引物浓度对酪蛋白α_(sl)与GAPDH基因扩增效率的影响 | 第35-36页 |
| ·MgCl_2浓度对酪蛋白α_(sl)与GAPDH基因PCR扩增效率的影响 | 第36-37页 |
| ·酪蛋白α_(sl)与GAPDH基因PCR循环数对平台期影响 | 第37页 |
| ·PCR产物电泳结果 | 第37页 |
| ·测序结果 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| ·定量RT-PCR法的构建 | 第39-40页 |
| ·酪蛋白α_(sl)与GAPDH基因扩增及序列分析 | 第40-42页 |
| 4 半定量RT-PCR法评定体外培养奶牛乳腺组织对泌乳素的应答性 | 第42-45页 |
| ·材料和方法 | 第42页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·方法 | 第42页 |
| ·培养方法 | 第42页 |
| ·试验处理方法 | 第42页 |
| ·统计方法 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-44页 |
| ·旋转培养奶牛乳腺组织对不同浓度泌乳素的应答性 | 第43页 |
| ·旋转培养奶牛乳腺组织对泌乳素的应答性 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 5 半定量RT-PCR法评定蛋氨酸对奶牛乳腺组织酪蛋白α_(sl)基因表达的影响 | 第45-48页 |
| ·材料和方法 | 第45页 |
| ·试验材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45页 |
| ·培养方法 | 第45页 |
| ·试验处理方法 | 第45页 |
| ·统计方法 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 6 提示 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 英文摘要 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58页 |
