| 第一章 文献综述 | 第1-34页 |
| ·植物磷酸丙糖转运器 | 第16-20页 |
| ·磷酸丙糖转运器的特性 | 第16-18页 |
| ·磷酸丙糖转运器的反义抑制 | 第18-20页 |
| ·结语 | 第20页 |
| ·糖转运蛋白及糖转运的调节 | 第20-21页 |
| ·植物对糖的感受及其信号转导 | 第21-29页 |
| ·植物对糖信号的感受 | 第22-25页 |
| ·糖信号的传导 | 第25-27页 |
| ·糖感应突变体 | 第27-28页 |
| ·结语 | 第28-29页 |
| ·叶绿体TPT运输活性的测定方法 | 第29-33页 |
| ·叶绿体内膜的体积 | 第29-31页 |
| ·单层硅油离心法测定叶绿体TPT对Pi的运输活性 | 第31页 |
| ·双层硅油离心法测定叶绿体TPT对底物的运输活性 | 第31-32页 |
| ·转运器运输活性的动力学常数的计算 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第二章 小麦磷酸丙糖转运器抗体的制备及其亚细胞定位 | 第34-48页 |
| ·前言 | 第34页 |
| ·材料和方法 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·小麦完整叶绿体的制备 | 第34-35页 |
| ·叶绿素含量测定及叶绿体的纯度、完整性鉴定 | 第35页 |
| ·叶绿体被膜的制备及纯度鉴定 | 第35-36页 |
| ·小麦叶绿体被膜蛋白的[3H]2-DIDS标记和SDS-PAGE | 第36-37页 |
| ·小麦叶片液泡膜的制备及纯度鉴定 | 第37页 |
| ·小麦线粒体膜的制备 | 第37页 |
| ·Western免疫印迹 | 第37-39页 |
| ·TPT13肽的合成 | 第39页 |
| ·合成的TPT13肽的质谱分析 | 第39页 |
| ·合成的TPT13肽的HPLC分析 | 第39页 |
| ·TPT多肽与BSA的偶联(戊二醛偶联法) | 第39-40页 |
| ·抗血清制备与效价检测 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·制备的小麦叶绿体的纯度及完整性 | 第41-42页 |
| ·膜的制备与纯度鉴定 | 第42页 |
| ·叶绿体被膜蛋白的SDS-PAGE和[3H]2-DIDS标记 | 第42-44页 |
| ·人工合成13肽的质谱分析 | 第44页 |
| ·合成的TPT13肽的纯度鉴定 | 第44-45页 |
| ·TPT抗体的效价 | 第45页 |
| ·小麦TPT蛋白的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 小麦磷酸丙糖转运器的运输活性及其对同化物分配的调节 | 第48-60页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·材料和方法 | 第48-54页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·小麦叶绿体内膜体积的测定及计算 | 第48-49页 |
| ·单层硅油离心法测定叶绿体TPT对Pi的运输活性 | 第49页 |
| ·双层硅油离心法测定叶绿体TPT对DHAP、PEP和G6P的运输活性 | 第49-50页 |
| ·叶绿体光合活性的测定 | 第50页 |
| ·叶绿体内代谢物含量的测定 | 第50-53页 |
| ·叶绿体内酶活性的测定 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·制备的小麦叶绿体的光合活性 | 第54-55页 |
| ·小麦叶绿体内膜的体积 | 第55页 |
| ·TPT的底物运输动力学 | 第55-56页 |
| ·DIDS对叶绿体内酶活性的影响 | 第56页 |
| ·叶绿体内与卡尔文循环和淀粉合成途径有关的代谢物的含量 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 小麦磷酸丙糖转运器基因的表达调控 | 第60-74页 |
| ·前言 | 第60-61页 |
| ·材料和方法 | 第61-67页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·RNA提取 | 第62-64页 |
| ·cDNA的获得及探针的制备 | 第64-65页 |
| ·Northern blotting分析 | 第65-67页 |
| ·叶绿体蛋白的提取 | 第67页 |
| ·Western blotting分析 | 第67页 |
| ·结果与分析 | 第67-72页 |
| ·小麦叶片总RNA的提取 | 第67-68页 |
| ·PCR扩增结果 | 第68页 |
| ·不同光合效率的小麦品种间TPT表达的差异 | 第68-69页 |
| ·不同糖及渗透胁迫处理小麦TPT的表达差异 | 第69-70页 |
| ·不同浓度葡萄糖处理及处理不同时间小麦TPT的表达变化 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 小麦HXK RNAi载体的构建及小麦己糖激酶活性变化对TPT基因表达的影响 | 第74-99页 |
| ·前言 | 第74-75页 |
| ·材料和方法 | 第75-83页 |
| ·材料 | 第75-77页 |
| ·总RNA提取及质量鉴定 | 第77页 |
| ·RT-PCR和产物测序 | 第77页 |
| ·重组质粒的构建 | 第77-78页 |
| ·重组质粒对E.coli的转化 | 第78-80页 |
| ·质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第80页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第80页 |
| ·HXK融合蛋白的诱导表达 | 第80页 |
| ·HXK融合蛋白的分离纯化 | 第80-81页 |
| ·抗血清制备与效价检测 | 第81页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导 | 第81-82页 |
| ·悬浮细胞培养 | 第82页 |
| ·原生质体制备 | 第82页 |
| ·原生质体活力的鉴定 | 第82页 |
| ·电激处理 | 第82-83页 |
| ·GUS活性检测 | 第83页 |
| ·药理学实验 | 第83页 |
| ·HXK活性的测定 | 第83页 |
| ·TPT表达量的检测 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-97页 |
| ·小麦HXK cDNA中间片段的克隆与鉴定 | 第83-88页 |
| ·原核表达载体pET-HXK的构建与鉴定 | 第88-90页 |
| ·HXK融合蛋白的诱导表达、纯化与抗体制备 | 第90-91页 |
| ·真核表达载体pBI-HXK-RNAi的构建与鉴定 | 第91-94页 |
| ·愈伤组织的培养 | 第94-95页 |
| ·原生质体活力的检测 | 第95页 |
| ·GUS活力的测定 | 第95-96页 |
| ·HXK活性的测定 | 第96页 |
| ·TPT表达量的检测 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-99页 |
| 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 附录 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简历 | 第114页 |
