中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-19页 |
·猪传染性胃肠炎病原学研究进展 | 第10-14页 |
·TGEV形态及培养特性 | 第10页 |
·TGEV理化学特性 | 第10-11页 |
·TGEV抗原性、变异性 | 第11页 |
·TGEV分子生物学研究进展 | 第11-14页 |
·猪传染性胃肠炎流行病学 | 第14页 |
·TGE诊断研究进展 | 第14-17页 |
·I病毒分离 | 第15页 |
·核酸检测的方法 | 第15页 |
·免疫学检测方法 | 第15-17页 |
·本课题研究的目的与意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-28页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·病毒 | 第19页 |
·质粒和菌株 | 第19页 |
·重组TGEVN蛋白纯化所需试剂 | 第19页 |
·Dot-ELISA和间接ELISA检测所需试剂 | 第19-20页 |
·重组TGEVN蛋白单克隆抗体制备所需材料 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-28页 |
·诊断抗原的制备 | 第20-21页 |
·纯化重组TGEVN蛋白免疫活性检测 | 第21-22页 |
·Dot-ELISA检测TGEV抗体方法的研究 | 第22-23页 |
·间接ELISA检测TGEV抗体方法的研究 | 第23-24页 |
·诊断抗体(McAb)的制备 | 第24-26页 |
·McAb免疫活性检测 | 第26-27页 |
·肠内容物中TGEV裂解处理方法的优化 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-38页 |
·诊断抗原的制备 | 第28-30页 |
·重组TGEVN蛋白的纯化结果 | 第28页 |
·洗脱液的SDS-PAGE分析结果 | 第28-29页 |
·Bradford法测定纯化重组TGEVN蛋白含量 | 第29-30页 |
·纯化重组TGEVN蛋白的免疫活性检测 | 第30-31页 |
·SDS-PAGE分析纯化的重组TGEVN蛋白 | 第30页 |
·Western-Blot分析纯化的重组TGEVN蛋白 | 第30-31页 |
·Dot-ELISA检测TGEV抗体方法的研究 | 第31-32页 |
·重组TGEVN蛋白包被最适浓度的确定 | 第31页 |
·封闭剂的选择 | 第31页 |
·纯化空载体表达的蛋白质作为抗原检测结果 | 第31页 |
·同其它肠道病毒特异性试验 | 第31-32页 |
·抗原预点膜保存期测定 | 第32页 |
·间接ELISA检测TGEV抗体最佳工作条件的确定 | 第32-34页 |
·最佳抗原工作浓度的确定 | 第32-33页 |
·脱脂奶粉浓度的确定 | 第33-34页 |
·抗原与待检血清最适作用时间的确定 | 第34页 |
·底物液最佳作用时间的确定 | 第34页 |
·诊断抗体(McAb)的制备 | 第34-35页 |
·细胞融合及筛选结果 | 第34页 |
·间接ELISA测腹水效价 | 第34页 |
·杂交瘤细胞染色体计数 | 第34-35页 |
·McAb免疫活性检测 | 第35-36页 |
·全病毒抗原Western-Blot检测McAb的结果 | 第35-36页 |
·全病毒抗原间接ELISA检测McAb的结果 | 第36页 |
·肠内容物中TGEV裂解处理结果 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
·诊断抗原的制备 | 第38-39页 |
·检测抗体方法的研究 | 第39页 |
·诊断抗体(McAb)的研究 | 第39-40页 |
·肠内容物中TGEV裂解处理方法的优化 | 第40-41页 |
·TGEV与PRCV鉴别诊断的初步探讨 | 第41-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |