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基因Ⅶ型新城疫病毒DNA疫苗的构建及免疫效力研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第1章 绪论第12-24页
   ·新城疫概述第12-17页
     ·新城疫流行病学第12页
     ·新城疫病毒第12-17页
       ·新城疫病毒的生物学特性第12-13页
       ·毒力及致病性第13-14页
       ·新城疫病毒的结构蛋白及功能第14-16页
       ·新城疫病毒致病性的分子基础第16-17页
   ·新城疫疫苗研究进展第17-23页
     ·传统疫苗第17页
       ·灭活苗第17页
       ·弱毒疫苗第17页
     ·基因工程疫苗第17-19页
       ·亚单位疫苗第17-18页
       ·新城疫病毒重组活载体疫苗第18-19页
       ·新城疫病毒载体疫苗第19页
     ·核酸疫苗第19-23页
       ·核酸疫苗作用机理第19-21页
       ·核酸疫苗优点及存在的问题第21-22页
       ·核酸疫苗在禽类的应用第22页
       ·新城疫 DNA 疫苗的研究进展第22-23页
   ·本研究的目的与意义第23-24页
第2章 新城疫病毒 F 和 HN 基因的真核表达第24-31页
   ·引言第24页
   ·实验材料第24-25页
     ·酶及相关试剂第24页
     ·细胞、毒株、载体与 NDV 阳性血清第24页
     ·主要仪器与设备第24-25页
   ·实验方法第25-26页
     ·引物设计第25页
     ·重组质粒构建及鉴定第25页
     ·重组质粒在 293T 细胞中表达第25-26页
       ·转染第25-26页
       ·间接免疫荧光检测蛋白表达第26页
       ·Western- blot 分析鉴定蛋白表达第26页
   ·结果与分析第26-28页
     ·目的基因的 PCR 扩增结果第26-27页
     ·真核表达载体的构建及重组质粒的鉴定第27-28页
     ·重组质粒在 293T 细胞中的表达第28页
   ·讨论第28-30页
     ·新城疫病毒 F 和 HN 基因的真核表达第28-29页
       ·真核表达载体的选择第29页
       ·重组质粒在 293T 细胞中的转染第29页
     ·基因优化第29-30页
   ·本章小结第30-31页
第3章 雏鸡免疫分组试验第31-50页
   ·引言第31页
   ·试验材料与方法第31页
     ·试验材料及试剂第31页
     ·仪器和设备第31页
   ·试验方法第31-34页
     ·免疫用质粒的制备第31-32页
     ·重组 NDV F、HN 基因 DNA 疫苗免疫效果初步检测第32-33页
     ·未优化的 F 基因和优化的 F 基因 DNA 疫苗效果再次验证第33页
     ·重组 HN 基因 DNA 疫苗最小免疫剂量测定第33页
     ·重组 HN 基因 DNA 疫苗免疫抗体持续期试验第33页
     ·重组 HN 基因 DNA 疫苗在鸡体内分布范围及持续期第33-34页
     ·DNA 疫苗免疫 SPF 鸡血清抗体效价测定第34页
       ·间接 ELISA 方法检测重组质粒 F、HN 基因 DNA 疫苗抗体效价 .第34页
       ·血凝抑制方法检测针对重组 HN 基因 DNA 疫苗第34页
   ·新城疫病毒基因疫苗免疫保护试验的结果与分析第34-48页
     ·重组 NDV F、HN 基因 DNA 疫苗免疫效果初步检测结果与分析第34-39页
     ·未优化的 F 基因和优化的 F 基因 DNA 疫苗效果再次验证结果与分析第39-41页
     ·重组 HN 基因 DNA 疫苗最小免疫剂量测定的结果与分析第41-44页
     ·重组 HN 基因 DNA 疫苗在鸡体内持续期的结果与分析第44-45页
     ·重组 HN 基因 DNA 疫苗免疫在鸡体内分布范围的结果及分析第45-48页
   ·讨论第48-49页
     ·免疫效果的影响因素第48-49页
       ·免疫日龄对免疫效果的影响第48页
       ·注射部位对免疫效果的影响第48-49页
       ·免疫剂量及免疫次数对免疫效果的影响第49页
   ·本章小结第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-58页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第58-59页
致谢第59页

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