中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-7页 |
缩略语 | 第7-8页 |
前言 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
玉米遗传转化研究进展 | 第9-19页 |
GM-CSF基因及其研究现状 | 第19-21页 |
第二章 高效再生体系的建立 | 第21-32页 |
1 材料与方法 | 第21-23页 |
·材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·培养基基本成分 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-23页 |
·外植体的获得 | 第22页 |
·幼胚培养环境 | 第22页 |
·不同基因型对外植体再生的影响 | 第22页 |
·不同培养基与激素配比对幼胚再生的影响 | 第22页 |
·预处理对再生的影响 | 第22-23页 |
·幼胚长度对再生的影响 | 第23页 |
·幼胚在果穗上的部位对再生的影响 | 第23页 |
·幼胚放置方式对再生的影响 | 第23页 |
·从胚性愈伤形成到转至分化培养基的天数对再生的影响 | 第23页 |
·黑暗培养对再生的影响 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-32页 |
·基因型对玉米幼胚再生的影响 | 第23-24页 |
·不同培养基与激素配比对幼胚再生的影响 | 第24-27页 |
·预处理对再生的影响 | 第27-28页 |
·幼胚长度对再生的影响 | 第28-29页 |
·幼胚在果穗上的部位对再生的影响 | 第29页 |
·幼胚放置方式对再生的影响 | 第29-30页 |
·从胚性愈伤形成到转至分化培养基的天数对再生的影响 | 第30-31页 |
·黑暗培养对再生的影响 | 第31-32页 |
第三章 遗传转化体系的建立 | 第32-40页 |
1 材料与方法 | 第32-34页 |
·材料 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·菌株及载体 | 第32页 |
·菌株、质粒的性质 | 第32页 |
·菌株的保存 | 第32页 |
·细菌培养基 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-34页 |
·农杆菌的活化、扩增及菌体收集 | 第33页 |
·Gus基因的组织化学检测 | 第33页 |
·最佳浸染时间的确定 | 第33页 |
·最佳共培养时间的确定 | 第33-34页 |
·最佳农杆菌浸染浓度的确定 | 第34页 |
·浸染培养基中最佳蔗糖浓度值确定 | 第34页 |
·浸染培养基中最佳葡萄糖浓度值确定 | 第34页 |
·幼胚长度对Gus瞬时表达率的影响 | 第34页 |
·浸染液基本培养基的比较 | 第34页 |
·潮霉素选择压的确定 | 第34页 |
·延迟筛选对幼胚转化后再生的影响 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-40页 |
·最佳浸染时间的确定 | 第34-35页 |
·最佳共培养时间的确定 | 第35-36页 |
·最佳农杆菌浸染浓度的确定 | 第36页 |
·浸染培养基中最佳蔗糖浓度值确定 | 第36-37页 |
·浸染培养基中最佳葡萄糖浓度值确定 | 第37页 |
·幼胚长度对Gus瞬时表达率的影响 | 第37-38页 |
·浸染液基本培养基的比较 | 第38页 |
·潮霉素选择压的确定 | 第38-39页 |
·延迟筛选对幼胚转化后再生的影响 | 第39-40页 |
第四章 转基因植株的获得及检测 | 第40-51页 |
1 材料与方法 | 第40-46页 |
·材料 | 第40页 |
·植物材料 | 第40页 |
·转化载体 | 第40页 |
·培养基 | 第40页 |
·菌体活化扩增培养基 | 第40页 |
·转化再生培养基 | 第40页 |
·方法 | 第40-46页 |
·农杆菌活化及扩增 | 第40-41页 |
·浸染 | 第41页 |
·共培养 | 第41页 |
·延迟筛选培养 | 第41页 |
·筛选培养 | 第41页 |
·抗性植株的获得 | 第41页 |
·检测 | 第41-46页 |
·Gus组织化学检测 | 第41页 |
·PCR扩增检测 | 第41-45页 |
·抗性植株DNA提取与纯化 | 第41-43页 |
·阳性质粒的提取 | 第43-44页 |
·PCR扩增 | 第44-45页 |
·电泳检测 | 第45页 |
·PCR-Southern bloting检测 | 第45-46页 |
·探针的标记 | 第45页 |
·电泳转膜 | 第45页 |
·预杂交 | 第45页 |
·杂交 | 第45-46页 |
·洗膜 | 第46页 |
·放射自显影 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-51页 |
·转基因植株的获得 | 第46页 |
·转基因植株的检测 | 第46-51页 |
·Gus基因组织化学检测 | 第46-47页 |
·分子检测 | 第47-51页 |
·B73抗性植株的PCR检测 | 第47-48页 |
·B73抗性植株HPT基因的PCR检测 | 第47页 |
·B73抗性植株GM-CSF基因的PCR检测 | 第47-48页 |
·B73抗性植株GM-CSF基因的PCR-Southen blotting检测 | 第48-49页 |
·B73×A188抗性植株的PCR检测 | 第49-51页 |
·B73×A188抗性植株HPT基因的PCR检测 | 第49页 |
·B73×A188抗性植株GM-CSF基因的PCR检测 | 第49-50页 |
·B73×A188抗性植株GM-CSF基因的PCR-Southen blotting检测 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
图版 | 第64-67页 |