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单分散树脂及其在生物大分子分离中的应用

第一章 文献综述第1-29页
   ·前言第15-16页
   ·高分子聚合物填料基质的制备第16-22页
     ·悬浮聚合法第16页
     ·分散聚合法第16-17页
     ·种子溶胀聚合法第17-20页
       ·常规溶胀聚合第18页
       ·逐步溶胀聚合法第18页
       ·二步溶胀聚合法第18-19页
       ·动力学溶胀聚合法第19页
       ·一步溶胀聚合法第19-20页
     ·高效膜色谱第20页
     ·连续棒状色谱填料第20-21页
     ·灌注色谱填料第21-22页
   ·高分子聚合物填料的化学改性研究第22-24页
     ·单分散交联聚苯乙烯的化学改性第22-23页
     ·单分散交联聚丙烯酸酯类和聚乙烯醇微球的化学改性第23-24页
   ·分离生物大分子的有机聚合物基质的色谱固定相的发展趋势第24页
 参考文献第24-29页
第二章 单分散聚苯乙烯种子的制备第29-38页
   ·前言第29页
   ·实验部分第29-31页
     ·实验设备第29-30页
     ·试剂第30页
     ·试剂的前处理第30页
     ·实验方法第30-31页
       ·分散聚合法合成单分散聚苯乙烯种子第30页
       ·产品分散液浓度的测定第30页
       ·单分散聚苯乙烯微球的表征第30-31页
   ·结果与讨论第31-36页
     ·分散聚合法的机理第31页
     ·聚合反应温度的影响第31-32页
     ·单体浓度的影响第32-33页
     ·引发剂浓度的影响第33-34页
     ·稳定剂用量的影响第34-35页
     ·聚合反应条件的优化第35-36页
   ·小结第36页
 参考文献第36-38页
第三章 种子溶胀聚合法制备单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂第38-57页
   ·前言第38-39页
   ·实验部分第39-42页
     ·实验仪器第39页
     ·试剂第39页
     ·试剂的前处理第39-40页
     ·实验方法第40页
       ·制备单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球第40页
       ·P_(GMA/EDMA)微球的抽提第40页
     ·树脂的表征第40-42页
       ·粒度参数的测定和表观形态的观测第40-41页
       ·凝胶色谱法测定孔结构参数第41-42页
   ·结果与讨论第42-55页
     ·单分散P_(GMA/EDMA)微球合成条件的选择第42-45页
       ·溶胀乳液的制备及稳定性考察第42-43页
       ·P_(GMA/EDMA)微球的粒度控制与粒度参数测定第43页
       ·PVA和SDS的用量对溶胀的影响第43-44页
       ·温度对溶胀和聚合的影响第44-45页
       ·提高种子溶胀能力的方法第45页
     ·一步种子溶胀聚合法的成孔机理第45-46页
     ·P_(GMA/EDMA)微球的孔径、孔径分布及其影响因素第46-52页
       ·交联度对微球孔结构及物理性能的影响第46-49页
       ·环已醇作为惰性小分子致孔剂对树脂孔分布的影响第49-50页
       ·高分子溶液致孔剂浓度对树脂孔结构的影响第50-52页
     ·树脂的体积排阻色谱性能研究第52-55页
       ·P_(GMA/EDMA)树脂的SEC行为第52-54页
       ·P_(GMA/EDMA)树脂柱的理论塔板高度与流速的关系第54-55页
   ·小结第55-56页
 参考文献第56-57页
第四章 P_(GMA/EDMA)的亲水性改性及分离生物大分子的排阻色谱性能研究第57-69页
   ·前言第57页
   ·实验部分第57-62页
     ·主要试剂和设备第57-58页
       ·实验仪器第57-58页
       ·试剂第58页
     ·实验方法第58-62页
       ·树脂表面环氧基含量的测定第58-59页
       ·树脂表面羟基含量的测定第59页
       ·含N、S元素基团的含量测定第59页
       ·P_(GMA/EDMA)树脂的亲水性改性第59-61页
       ·体积排阻色谱条件第61页
       ·按照文献的方法测定溶菌酶的活性第61页
       ·用HSA表征改性树脂的亲水性第61-62页
   ·结果与讨论第62-67页
     ·改性树脂的亲水性表征第62-64页
     ·柱子的穿透性测试第64页
     ·有机溶剂对蛋白保留的影响第64-65页
     ·固定相表面性质的考察第65-66页
     ·SEC柱对标准蛋白的质量和活性回收率第66页
     ·生物大分子的体积排阻色谱分离第66-67页
   ·小结第67-68页
 参考文献第68-69页
第五章 三种阳离子交换填料的合成及应用第69-101页
 第一节 弱阳离子交换填料的合成及应用第69-80页
     ·前言第69页
     ·实验部分第69-72页
       ·主要试剂和设备第69-70页
       ·弱阳离子交换色谱填料的合成第70-71页
       ·羧基含量的测定第71-72页
       ·色谱柱的填装第72页
       ·色谱条件第72页
       ·鸡蛋清样品的处理第72页
       ·用Bradford比色法测定蛋白质含量第72页
       ·作SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第72页
     ·结果与讨论第72-79页
       ·WCX填料的合成及其评价第72-73页
       ·WCX的离子交换特性第73-75页
       ·WCX柱负荷第75页
       ·WCX填料的表面亲水性能考察第75-76页
       ·流动相pH对蛋白质色谱行为的影响第76-77页
       ·流动相流速对蛋白分离效果的影响第77-78页
       ·蛋清中溶菌酶的快速分离纯化第78-79页
     ·小结第79-80页
 第二节 中强阳离子交换色谱填料的合成及应用第80-90页
     ·前言第80页
     ·实验方法第80-81页
       ·主要试剂和设备第80页
       ·中强阳离子交换色谱填料的合成第80-81页
       ·色谱条件第81页
     ·结果与讨论第81-89页
       ·中强阳离子交换色谱填料的合成及其评价第81-82页
       ·中强阳离子柱对标准蛋白的分离性能第82-83页
       ·中强阳离子填料表面亲水性能考察第83-84页
       ·中强阳离子交换色谱中pH值对蛋白保留的影响第84-85页
       ·盐浓度对蛋白保留的影响第85-86页
       ·盐种类对蛋白保留的影响第86-87页
       ·流速对蛋白保留的影响第87-88页
       ·中强阳离子填料的动力学吸附容量第88页
       ·蛋清中溶菌酶的分离纯化第88-89页
     ·小结第89-90页
 第三节 强阳离子交换色谱填料的合成及应用第90-100页
     ·前言第90页
     ·实验方法第90-92页
       ·主要试剂和设备第90页
       ·SCX-1型强阳离子交换填料的合成第90页
       ·SCX-2型强阳离子交换填料的合成第90-91页
       ·SCX-3型强阳离子交换填料的合成第91页
       ·磺酸基含量的测定第91页
       ·色谱柱的填装第91-92页
       ·色谱条件第92页
       ·稀释复性的重组人干扰素-γ样品的制备第92页
     ·结果与讨论第92-99页
       ·强阳离子交换填料的合成及其评价第92页
       ·三种强阳离子交换树脂对标准蛋白的分离性能第92-93页
       ·SCX填料表面的亲水性对蛋白分离性能的影响第93-94页
       ·流动相流速对蛋白分离效果的影响第94-95页
       ·SCX-3柱负载对核糖核酸酶和乳过氧化氢酶分离度的影响第95-96页
       ·SCX-3柱的稳定性和重现性考察第96-97页
       ·流动相pH对蛋白分离效果的影响第97页
       ·SCX-3柱对稀释复性的干扰素-γ的分离纯化第97-99页
     ·小结第99-100页
 参考文献第100-101页
第六章 两种阴离子交换填料的合成及应用第101-121页
 第一节 弱阴离子交换填料的合成及应用第101-111页
     ·前言第101页
     ·实验部分第101-104页
       ·实验仪器第101页
       ·试剂第101页
       ·WAX-1型弱阴离子交换色谱填料的合成第101-102页
       ·WAX-2型弱阴离子交换色谱填料的合成第102页
       ·WAX-3型弱阴离子交换色谱填料的合成第102-103页
       ·树脂含氮量的测定第103页
       ·色谱柱的填装第103页
       ·色谱条件第103页
       ·重组人粒细胞-巨嗤细胞集落刺激因子包含体的提取第103-104页
     ·结果与讨论第104-109页
       ·弱阴离子交换填料的合成及其评价第104页
       ·三种弱阴离子交换树脂对标准蛋白的分离性能第104-105页
       ·改性方法对蛋白分离性能的影响第105-106页
       ·相对塔板高度与流速的关系第106-108页
       ·弱阴离子交换色谱中流动相pH对蛋白保留的影响第108页
       ·重组人粒细胞-巨嗤细胞集落刺激因子的分离纯化第108-109页
     ·小结第109-111页
 第二节 强阴离子交换色谱填料的合成及应用第111-120页
     ·前言第111页
     ·实验部分第111-114页
       ·实验仪器第111页
       ·试剂第111-112页
       ·SAX-1型强阴离子交换色谱填料的合成第112页
       ·SAX-2型强阴离子交换色谱填料的合成第112-113页
       ·色谱柱的填装第113页
       ·色谱条件第113页
       ·前沿色谱法测定SAX-1填料的吸附容量第113页
       ·重组人干细胞因子包含体的提取第113-114页
     ·结果与讨论第114-119页
       ·强阴离子交换填料的合成及其评价第114页
       ·强阴离子交换树脂对标准蛋白的分离性能第114-115页
       ·改性方法对蛋白分离性能的影响第115-116页
       ·强阴离子交换填料的吸附容量第116-117页
       ·流动相流速对蛋白分离的影响第117页
       ·流动相pH对蛋白保留的影响第117-118页
       ·重组人干细胞因子的分离纯化第118-119页
     ·小结第119-120页
 参考文献第120-121页
第七章 疏水相互作用色谱填料的合成及应用第121-133页
   ·前言第121页
   ·实验部分第121-122页
     ·主要试剂和设备第122页
       ·实验仪器第122页
       ·试剂第122页
   ·实验方法第122-124页
     ·HIC-1型疏水相互作用色谱填料的合成第122-123页
     ·HIC-2型疏水相互作用色谱填料的合成第123页
     ·树脂表面羟基含量的测定第123页
     ·色谱柱的填装第123页
     ·色谱条件第123页
     ·干扰素-γ的活性测定第123页
     ·Bradford比色法测定蛋白质含量第123页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第123-124页
   ·结果与讨论第124-131页
     ·合成产物的表征第124页
     ·标准蛋白混合物的疏水相互作用分离第124-125页
     ·蛋白质在疏水柱上的质量回收率第125-126页
     ·疏水填料的动力学吸附容量第126-127页
     ·硫酸铵起始浓度对蛋白保留的影响第127-128页
     ·疏水色谱中流动相pH对蛋白质色谱行为的影响第128页
     ·流动相流速对蛋白分离效果的影响第128-129页
     ·柱负载量对分离度的影响第129-130页
     ·重组人干扰素-γ的复性及同时纯化第130-131页
   ·小结第131-132页
 参考文献第132-133页
第八章 亲合色谱法纯化伴刀豆球蛋白-A第133-141页
   ·前言第133页
   ·实验部分第133-135页
     ·仪器和试剂第133-134页
     ·亲合填料的合成第134-135页
       ·P-(GMA/EDMA)树脂的活化第134页
       ·配基氨基葡萄糖的键合第134-135页
     ·亲和色谱条件第135页
     ·色谱柱填装第135页
     ·前沿色谱法测定亲合填料的吸附容量第135页
   ·结果与讨论第135-139页
     ·亲合填料的非特异性吸附及消除第135页
     ·亲合填料吸附容量第135-136页
     ·氨基葡萄糖在P_(GMA/EDMA)树脂上的键合第136页
     ·洗脱剂浓度对Con-A保留的影响第136-137页
     ·Con-A标准品亲合色谱分离第137页
     ·Con-A与氨基葡萄糖的表观解离常数的测定第137-138页
     ·粗品Con-A的色谱分离纯化第138-139页
   ·小结第139-140页
 参考文献第140-141页
论文发表情况第141-143页
致谢第143页

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