| 縮略词表 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-20页 |
| ·油菜素类固醇(BR)的研究现状 | 第12-14页 |
| ·BR的发现 | 第12页 |
| ·BR的功能 | 第12-13页 |
| ·BR生物合成途径及相关基因 | 第13-14页 |
| ·CPD基因的产物 | 第14-15页 |
| ·细胞色素P450及功能 | 第15-16页 |
| ·植物细胞色素P450基因的异源表达 | 第16-19页 |
| ·P450在大肠杆菌中的表达 | 第16-17页 |
| ·P450在酵母中的表达 | 第17-18页 |
| ·P450在昆虫中的表达 | 第18页 |
| ·其他真核表达系统 | 第18-19页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PeCPD基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第20-28页 |
| ·材料与方法 | 第20-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·主要生化药品 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·原核表达载体的构建及阳性转化子的获得 | 第21页 |
| ·PeCPD蛋白的诱导表达 | 第21-22页 |
| ·PeCPD蛋白的进一步判定 | 第22-23页 |
| ·实验结果 | 第23-26页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·PeCPD基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达 | 第24-25页 |
| ·原核表达PeCPD蛋白的进一步判定 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| ·结论 | 第27-28页 |
| 第三章 PeCPD蛋白的纯化 | 第28-39页 |
| ·材料与方法 | 第28页 |
| ·主要用品 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-30页 |
| ·PeCPD蛋白提取方法的确定 | 第28-29页 |
| ·镍柱亲和层析法 | 第29页 |
| ·差速离心切胶回收法 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-36页 |
| ·诱导表达蛋白洗涤方法的摸索 | 第30-31页 |
| ·诱导表达蛋白超声破碎体系的比较 | 第31页 |
| ·镍柱亲和层析法 | 第31-33页 |
| ·差速离心胶回收相结合法 | 第33-34页 |
| ·两种纯化方法的比较 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| ·结论 | 第38-39页 |
| 第四章 PeCPD蛋白抗体的制备 | 第39-45页 |
| ·材料与方法 | 第39页 |
| ·实验动物与抗原 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·抗原的乳化 | 第39-40页 |
| ·免疫动物 | 第40页 |
| ·抗血清的收集 | 第40页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第40页 |
| ·抗血清的纯化 | 第40页 |
| ·琼脂双向扩散法检测抗血清的纯度和效价 | 第40-41页 |
| ·Western Blot检测抗血清 | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-43页 |
| ·抗血清效价测定 | 第41页 |
| ·抗血清的纯化 | 第41-42页 |
| ·琼脂双向扩散法 | 第42-43页 |
| ·PeCPD蛋白抗体的Western Blot检测 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| 第五章 转PeCPD基因拟南芥的异源表达检测 | 第45-51页 |
| ·实验材料与方法 | 第45-46页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-49页 |
| ·TCA-丙酮法提取植物蛋白效果 | 第46-47页 |
| ·点印记实验结果 | 第47-48页 |
| ·Western Blot检测结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 在学期间的研究成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |