内容提要 | 第1-9页 |
英文缩写 | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第11-41页 |
第一部分 凋亡抑制蛋白——SURVIVIN | 第11-28页 |
1. SURVIVIN 的理化性质 | 第11-18页 |
·survivin 基因的分子结构 | 第11页 |
·survivin 蛋白的分子结构 | 第11-13页 |
·survivin 的异构体 | 第13页 |
·survivin 的组织学分布 | 第13-14页 |
·survivin 的周期性表达 | 第14-15页 |
·survivin 的表达调控 | 第15-17页 |
·survivin 与P53、Bcl-2 的关系 | 第17-18页 |
2. SURVIVIN 的作用机制 | 第18-21页 |
·survivin 与细胞凋亡的关系 | 第18-20页 |
·survivin 与细胞周期的关系 | 第20-21页 |
3. SURVIVIN 与肿瘤 | 第21-27页 |
·survivin 与肿瘤发生、发展的关系 | 第22-23页 |
·survivin 与肿瘤耐药性的关系 | 第23-24页 |
·SURVIVIN 与肿瘤预后的关系 | 第24-25页 |
·survivin 的靶向治疗方案 | 第25-27页 |
4. 研究展望 | 第27-28页 |
第二部分 RNAI 技术及其应用 | 第28-41页 |
1. RNAI 的作用机制 | 第29-30页 |
2. RNAI 的分子生物学特性 | 第30-32页 |
3. 产生RNAI 的方法 | 第32-34页 |
4. siRNA 结构对RNAI 的影响 | 第34-35页 |
5. 影响SIRNA 作用的因素 | 第35-36页 |
6. RNAI 的应用 | 第36-39页 |
·在功能基因学中的应用 | 第36-37页 |
·在抗病毒感染中的应用 | 第37页 |
·在放射医学领域的应用 | 第37-39页 |
7. 问题与展望 | 第39-41页 |
第二章 材料与方法 | 第41-61页 |
1. 主要试剂及器材 | 第41-43页 |
·试剂 | 第41-42页 |
·器材 | 第42-43页 |
2. 主要仪器 | 第43-44页 |
3. 细胞株 | 第44页 |
4. 细胞生物学实验方法 | 第44-50页 |
·培养液配制 | 第44-45页 |
·小牛血清制备 | 第45页 |
·胰酶配制 | 第45页 |
·细胞培养 | 第45-46页 |
·细胞冻存 | 第46页 |
·细胞转染 | 第46页 |
·照射条件 | 第46页 |
·FCM 检测细胞蛋白表达 | 第46-47页 |
·FCM 检测细胞周期 | 第47页 |
·FCM 检测细胞凋亡 | 第47-48页 |
·FCM 检测细胞染色体数目 | 第48页 |
·免疫细胞化学方法 | 第48-50页 |
5. 细菌培养技术 | 第50-54页 |
·菌种 | 第50页 |
·细菌LB 培养基的配制 | 第50页 |
·细菌复苏 | 第50-51页 |
·细菌培养 | 第51页 |
·细菌冻存 | 第51页 |
·感受态菌的制备 | 第51页 |
·细菌转化 | 第51-52页 |
·质粒提取 | 第52-53页 |
·质粒纯化法 | 第53-54页 |
6. 分子生物学实验方法 | 第54-59页 |
·载体的构建 | 第54-56页 |
·含pENTR-anti-survivin 的阳性克隆鉴定 | 第56页 |
·RT-PCR | 第56-59页 |
7. 统计学方法 | 第59-61页 |
第三章 实验结果 | 第61-91页 |
1. 不同组织来源的细胞中SURVIVIN 蛋白的表达 | 第61-62页 |
2. X射线对SURVIVIN 基因表达的影响及其生物学效应 | 第62-78页 |
·X 射线对survivin 蛋白表达水平的影响 | 第62-65页 |
·X 射线对survivin 基因转录水平的影响 | 第65-69页 |
·X 射线对细胞凋亡的影响 | 第69-72页 |
·X 射线对细胞周期的影响 | 第72-75页 |
·X 射线对细胞染色体数目的影响 | 第75-78页 |
3 SHRNA 对X 射线诱导SURVIVIN 表达的影响及其生物学效应 | 第78-91页 |
·重组干扰载体pENTR-anti-SVV 的构建 | 第78-79页 |
·重组干扰载体干扰效率测定 | 第79-82页 |
·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞survivin 基因转录水平的影响 | 第82-83页 |
·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞survivin 蛋白表达的影响 | 第83-85页 |
·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞凋亡的影响 | 第85-86页 |
·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞周期分布的影响 | 第86-88页 |
·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞染色体数目变化的影响 | 第88-91页 |
第四章 讨论 | 第91-101页 |
1. SURVIVIN 在肿瘤细胞中的表达 | 第92-93页 |
2. SURVIVIN 与细胞凋亡 | 第93-96页 |
3. SURVIVIN 与染色体不稳定性 | 第96-100页 |
4. 研究展望 | 第100-101页 |
结论 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-119页 |
攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第119-121页 |
中文摘要 | 第121-126页 |
Abstract | 第126-132页 |
致谢 | 第132页 |