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RNA干扰survivin基因表达增强HeLa细胞电离辐射敏感性的实验研究

内容提要第1-9页
英文缩写第9-11页
第一章 绪论第11-41页
 第一部分 凋亡抑制蛋白——SURVIVIN第11-28页
  1. SURVIVIN 的理化性质第11-18页
   ·survivin 基因的分子结构第11页
   ·survivin 蛋白的分子结构第11-13页
   ·survivin 的异构体第13页
   ·survivin 的组织学分布第13-14页
   ·survivin 的周期性表达第14-15页
   ·survivin 的表达调控第15-17页
   ·survivin 与P53、Bcl-2 的关系第17-18页
  2. SURVIVIN 的作用机制第18-21页
   ·survivin 与细胞凋亡的关系第18-20页
   ·survivin 与细胞周期的关系第20-21页
  3. SURVIVIN 与肿瘤第21-27页
   ·survivin 与肿瘤发生、发展的关系第22-23页
   ·survivin 与肿瘤耐药性的关系第23-24页
   ·SURVIVIN 与肿瘤预后的关系第24-25页
   ·survivin 的靶向治疗方案第25-27页
  4. 研究展望第27-28页
 第二部分 RNAI 技术及其应用第28-41页
  1. RNAI 的作用机制第29-30页
  2. RNAI 的分子生物学特性第30-32页
  3. 产生RNAI 的方法第32-34页
  4. siRNA 结构对RNAI 的影响第34-35页
  5. 影响SIRNA 作用的因素第35-36页
  6. RNAI 的应用第36-39页
   ·在功能基因学中的应用第36-37页
   ·在抗病毒感染中的应用第37页
   ·在放射医学领域的应用第37-39页
  7. 问题与展望第39-41页
第二章 材料与方法第41-61页
 1. 主要试剂及器材第41-43页
   ·试剂第41-42页
   ·器材第42-43页
 2. 主要仪器第43-44页
 3. 细胞株第44页
 4. 细胞生物学实验方法第44-50页
   ·培养液配制第44-45页
   ·小牛血清制备第45页
   ·胰酶配制第45页
   ·细胞培养第45-46页
   ·细胞冻存第46页
   ·细胞转染第46页
   ·照射条件第46页
   ·FCM 检测细胞蛋白表达第46-47页
   ·FCM 检测细胞周期第47页
   ·FCM 检测细胞凋亡第47-48页
   ·FCM 检测细胞染色体数目第48页
   ·免疫细胞化学方法第48-50页
 5. 细菌培养技术第50-54页
   ·菌种第50页
   ·细菌LB 培养基的配制第50页
   ·细菌复苏第50-51页
   ·细菌培养第51页
   ·细菌冻存第51页
   ·感受态菌的制备第51页
   ·细菌转化第51-52页
   ·质粒提取第52-53页
   ·质粒纯化法第53-54页
 6. 分子生物学实验方法第54-59页
   ·载体的构建第54-56页
   ·含pENTR-anti-survivin 的阳性克隆鉴定第56页
   ·RT-PCR第56-59页
 7. 统计学方法第59-61页
第三章 实验结果第61-91页
 1. 不同组织来源的细胞中SURVIVIN 蛋白的表达第61-62页
 2. X射线对SURVIVIN 基因表达的影响及其生物学效应第62-78页
   ·X 射线对survivin 蛋白表达水平的影响第62-65页
   ·X 射线对survivin 基因转录水平的影响第65-69页
   ·X 射线对细胞凋亡的影响第69-72页
   ·X 射线对细胞周期的影响第72-75页
   ·X 射线对细胞染色体数目的影响第75-78页
 3 SHRNA 对X 射线诱导SURVIVIN 表达的影响及其生物学效应第78-91页
   ·重组干扰载体pENTR-anti-SVV 的构建第78-79页
   ·重组干扰载体干扰效率测定第79-82页
   ·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞survivin 基因转录水平的影响第82-83页
   ·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞survivin 蛋白表达的影响第83-85页
   ·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞凋亡的影响第85-86页
   ·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞周期分布的影响第86-88页
   ·RNAi 对X 射线作用的HeLa 细胞染色体数目变化的影响第88-91页
第四章 讨论第91-101页
 1. SURVIVIN 在肿瘤细胞中的表达第92-93页
 2. SURVIVIN 与细胞凋亡第93-96页
 3. SURVIVIN 与染色体不稳定性第96-100页
 4. 研究展望第100-101页
结论第101-103页
参考文献第103-119页
攻博期间发表的学术论文及其他成果第119-121页
中文摘要第121-126页
Abstract第126-132页
致谢第132页

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