摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
引言 | 第8-14页 |
1、DNA 甲基化的生物学功能 | 第8-12页 |
2、转座子的分子生物学研究进展 | 第12页 |
3、非生物胁迫影响植物基因组进化的研究意义 | 第12-13页 |
4、本文的研究方向和意义 | 第13-14页 |
实验材料与处理方法 | 第14-15页 |
实验步骤 | 第15-22页 |
1、植物基因组 DNA 的提取与纯化 | 第15页 |
2、Southern 杂交分析 | 第15-16页 |
·DNA 酶切 | 第15页 |
·Southern 印迹 | 第15页 |
·探针的分离 | 第15页 |
·探针标记、Southern 杂交及杂交信号的检测 | 第15-16页 |
3、RT-PCR | 第16-17页 |
4、亚硫酸盐测序(Bisulfite Sequencing) | 第17页 |
5、甲基化敏感扩增多态性(MSAP) | 第17-22页 |
·酶切及连接 | 第18页 |
·预扩增 | 第18页 |
·选择性 PCR 扩增 | 第18-19页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第19-22页 |
·玻璃板的准备 | 第19页 |
·凝胶配制 | 第19页 |
·银染 | 第19页 |
·PCR 产物的纯化与克隆 | 第19-20页 |
·感受态细胞的制备、转化及α互补筛选 | 第20-21页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
·感受态细胞的转化及α互补筛选 | 第20页 |
·阳性克隆的 PCR 检测 | 第20页 |
·质粒的提取与纯化 | 第20-21页 |
·DNA 序列测定及同源性探寻 | 第21-22页 |
实验结果与讨论 | 第22-32页 |
1、材料的选定 | 第22-23页 |
2、杂交中的 CNG 甲基化降低 | 第23-24页 |
3、 RT-PCR 中的基因和转座子激活 | 第24-26页 |
4、亚硫酸盐测序中的甲基化降低 | 第26-28页 |
5、甲基转移酶表达变化 | 第28页 |
6、后代的传递现象 | 第28-32页 |
实验结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-37页 |
致谢 | 第37页 |