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NO胁迫诱导水稻DNA甲基化变异及转座子和基因的转录激活

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
引言第8-14页
 1、DNA 甲基化的生物学功能第8-12页
 2、转座子的分子生物学研究进展第12页
 3、非生物胁迫影响植物基因组进化的研究意义第12-13页
 4、本文的研究方向和意义第13-14页
实验材料与处理方法第14-15页
实验步骤第15-22页
 1、植物基因组 DNA 的提取与纯化第15页
 2、Southern 杂交分析第15-16页
   ·DNA 酶切第15页
   ·Southern 印迹第15页
   ·探针的分离第15页
   ·探针标记、Southern 杂交及杂交信号的检测第15-16页
 3、RT-PCR第16-17页
 4、亚硫酸盐测序(Bisulfite Sequencing)第17页
 5、甲基化敏感扩增多态性(MSAP)第17-22页
   ·酶切及连接第18页
   ·预扩增第18页
   ·选择性 PCR 扩增第18-19页
   ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第19-22页
     ·玻璃板的准备第19页
     ·凝胶配制第19页
     ·银染第19页
     ·PCR 产物的纯化与克隆第19-20页
     ·感受态细胞的制备、转化及α互补筛选第20-21页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第20页
       ·感受态细胞的转化及α互补筛选第20页
       ·阳性克隆的 PCR 检测第20页
       ·质粒的提取与纯化第20-21页
     ·DNA 序列测定及同源性探寻第21-22页
实验结果与讨论第22-32页
 1、材料的选定第22-23页
 2、杂交中的 CNG 甲基化降低第23-24页
 3、 RT-PCR 中的基因和转座子激活第24-26页
 4、亚硫酸盐测序中的甲基化降低第26-28页
 5、甲基转移酶表达变化第28页
 6、后代的传递现象第28-32页
实验结论第32-33页
参考文献第33-37页
致谢第37页

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