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蛋白质的磁性微球快速酶解与高效富集新方法研究

摘要第1-10页
Abstract第10-14页
第一章 绪论第14-38页
   ·蛋白质组学研究概述第14-18页
     ·引言第14-16页
     ·基于生物质谱的蛋白质组学研究第16-17页
     ·翻译后修饰蛋白组学第17-18页
   ·固定化酶反应器研究进展第18-22页
     ·酶的固定化方法第18-20页
     ·固定化酶反应器的载体材料第20-22页
   ·磷酸化蛋白质组学研究的技术策略第22-29页
     ·磷酸化蛋白质及磷酸化肽的分离与富集第23-28页
     ·利用生物质谱确认磷酸化位点第28-29页
   ·磁性高分子微球及其在生物分析中的应用第29-31页
     ·磁性高分子微球制备方法第29-30页
     ·磁性高分子微球在生物分析中的应用第30-31页
   ·本论文选题的意义第31-32页
   ·参考文献第32-38页
第二章 磁性硅球的制备及毛细管/芯片酶反应器研制第38-69页
   ·固定酶的磁性硅球的制备及表征第39-47页
     ·磁性硅球的制备及表征第39-42页
     ·磁性硅球表面固定酶第42-47页
   ·毛细管/芯片酶反应器的制备第47-48页
   ·毛细管/芯片酶反应器性能考察第48-61页
     ·毛细管酶反应器(铜离子螯合法)第48-51页
     ·芯片酶反应器(铜离子螯合法)第51-57页
     ·芯片酶反应器(共价键合法)第57-61页
   ·实验部分第61-66页
     ·原料和试剂第61-62页
     ·Fe_3O_4@SiO_2磁性硅球的合成及表征第62-63页
     ·螯合铜离子的磁性硅球的合成及酶的固定第63页
     ·磁性硅球的表面修饰氨基及酶的共价键合固定第63-64页
     ·毛细管/芯片酶反应器制作、替换及再生第64页
     ·毛细管/芯片酶反应器用于蛋白酶解第64页
     ·蛋白的溶液酶解第64-65页
     ·鼠肝样品制备第65页
     ·蛋白的液相色谱分离第65页
     ·质谱分析和数据检索第65-66页
   ·本章小结第66页
   ·参考文献第66-69页
第三章 基于氨基纳米磁性微球的蛋白质靶上酶解研究第69-90页
   ·氨基纳米磁性微球的制备、表征及酶的固定第70-73页
   ·氨基纳米磁性微球的酶解性能考察第73-78页
   ·基于氨基纳米磁性微球的靶上酶解研究第78-86页
     ·方法探索第78-80页
     ·条件优化第80-82页
     ·酶解性能考察第82-84页
     ·实际应用第84-86页
   ·实验部分第86-88页
     ·试剂与材料第86-87页
     ·氨基纳米磁性微球的合成第87页
     ·氨基纳米磁性微球的表征第87页
     ·在氨基纳米磁性微球上固定酶第87-88页
     ·基于氨基纳米磁性微球的靶上酶解第88页
   ·本章小结第88-89页
   ·参考文献第89-90页
第四章 表面固定铈离子的磁性硅球富集磷酸化肽研究第90-111页
   ·固定铈离子的磁性硅球的制备与表征第91页
   ·富集体系优化第91-97页
     ·考察不同酸对富集效果的影响第91-94页
     ·考察TFA浓度对富集效果的影响第94-96页
     ·考察ACN浓度对富集效果的影响第96-97页
   ·固定Ce~(4+)和Fe~(3+)的磁性硅球富集磷酸化肽性能比较研究第97-103页
     ·富集卵白蛋白中的磷酸化肽第97-99页
     ·富集5种蛋白肽段混合液中的磷酸化肽第99-100页
     ·富集β-casein和BSA(1:50)肽段混合液中的磷酸化肽第100-102页
     ·富集生奶酶解产物中的磷酸化肽第102-103页
   ·人血清中的磷酸化肽富集研究第103-105页
   ·实验部分第105-107页
     ·原料和试剂第105页
     ·表面固定Ce~(4+)的磁性硅球的制备第105-106页
     ·样品制备第106-107页
     ·表面固定Ce~(4+)的磁性硅球用于富集磷酸化肽段第107页
     ·MALDI-TOF-MS检测和数据库检索第107页
   ·本章小结第107-108页
   ·参考文献第108-111页
第五章 金属氧化物包覆的磁性微球(Fe_3O_4@M_xO_y)富集磷酸化肽研究第111-153页
   ·金属氧化物包覆的磁性微球(Fe_3O_4@M_xO_y)的制备及表征第111-115页
   ·Fe_3O_4@ZrO_2磁性微球富集磷酸化肽研究第115-127页
     ·富集条件优化第116-119页
     ·富集性能考察第119-125页
     ·应用于人血清中磷酸化肽的富集第125-127页
   ·Fe_3O_4@Al_2O_3磁性微球富集磷酸化肽研究第127-136页
     ·富集条件优化第127-129页
     ·富集性能考察第129-134页
     ·应用于鼠肝样品中磷酸化肽的富集第134-136页
   ·Fe_3O_4@Ga_2O_3磁性微球富集磷酸化肽研究第136-145页
     ·富集性能考察第136-144页
     ·应用于鼠肝样品中磷酸化肽的富集第144-145页
   ·实验部分第145-150页
     ·原料和试剂第145页
     ·具有核壳结构的Fe_3O_4@M_xO_y磁性微球的合成第145-146页
     ·具有核壳结构的Fe_3O_4@M_xO_y磁性微球的表征第146-147页
     ·Fe_3O_4@M_xO_y磁性微球富集磷酸化肽第147-149页
     ·MALDI-TOF-MS检测和数据库检索第149-150页
     ·NanoLC-LTO MS/MS质谱分析第150页
   ·本章小结第150页
   ·参考文献第150-153页
攻读学位期间发表的文章和专利情况第153-155页
致谢第155-156页

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