摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
1 文献综述 | 第10-18页 |
·研究方法 | 第10-15页 |
·精子介导法 | 第10-12页 |
·原始生殖细胞(PGCs)转染法 | 第12-13页 |
·逆转录病毒载体法 | 第13页 |
·显微注射法 | 第13-14页 |
·胚胎干细胞操作法 | 第14-15页 |
·禽蛋的形成过程 | 第15-16页 |
·家鸡作为生物反应器的优点和缺点 | 第16页 |
·转基因在鸡上的应用 | 第16-17页 |
·加快QTL选择进程 | 第16-17页 |
·提高肉蛋的产量与质量 | 第17页 |
·进行抗病育种 | 第17页 |
·生产医用、保健蛋白 | 第17页 |
·问题与展望 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18页 |
2 材料和方法 | 第18-29页 |
·材料 | 第18-22页 |
·供试材料 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·试剂 | 第19-21页 |
·溶液的配置 | 第21-22页 |
·手术器械 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-29页 |
·试验前的准备工作 | 第22页 |
·质粒的转化 | 第22-23页 |
·质粒提取 | 第23页 |
·质粒的质量和浓度的检测 | 第23-24页 |
·探针的标记及标记效率的测定 | 第24-25页 |
·转染液的制备 | 第25页 |
·睾丸和多卵巢内显微注射pIRES-eGFP质粒 | 第25页 |
·转染手术后基因整合和表达检测 | 第25-26页 |
·对试验AA鸡的分组及人工授精 | 第26页 |
·对胚胎及F1代的基因整合的检测 | 第26-29页 |
3 结果与分析 | 第29-34页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
·PCR产物的电泳结果 | 第29-30页 |
·手术过程图 | 第30页 |
·手术后48h睾丸和卵巢中表达绿色荧光蛋白结果 | 第30-31页 |
·人工授精后产生后代中外源基因的整合与表达结果 | 第31-33页 |
·鸡胚PCR电泳图 | 第33页 |
·PCR产物的Southern杂交结果 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-38页 |
·脂质体在体内注射时的作用 | 第34页 |
·绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因 | 第34-35页 |
·脂质体的性能 | 第35页 |
·脂质体-DNA复合物体内直接注射入睾丸和卵巢的优点 | 第35-36页 |
·地高辛标记检测目的基因的转染 | 第36页 |
·影响睾丸和卵巢内注射转染液法介导基因转移的因素 | 第36页 |
·与其它几种转基因鸡制备方法的比较 | 第36-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第44页 |