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睾丸和卵巢内注射绿色荧光蛋白生产转基因鸡的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 文献综述第10-18页
   ·研究方法第10-15页
     ·精子介导法第10-12页
     ·原始生殖细胞(PGCs)转染法第12-13页
     ·逆转录病毒载体法第13页
     ·显微注射法第13-14页
     ·胚胎干细胞操作法第14-15页
   ·禽蛋的形成过程第15-16页
   ·家鸡作为生物反应器的优点和缺点第16页
   ·转基因在鸡上的应用第16-17页
     ·加快QTL选择进程第16-17页
     ·提高肉蛋的产量与质量第17页
     ·进行抗病育种第17页
     ·生产医用、保健蛋白第17页
   ·问题与展望第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18页
2 材料和方法第18-29页
   ·材料第18-22页
     ·供试材料第18页
     ·主要仪器第18-19页
     ·试剂第19-21页
     ·溶液的配置第21-22页
     ·手术器械第22页
   ·试验方法第22-29页
     ·试验前的准备工作第22页
     ·质粒的转化第22-23页
     ·质粒提取第23页
     ·质粒的质量和浓度的检测第23-24页
     ·探针的标记及标记效率的测定第24-25页
     ·转染液的制备第25页
     ·睾丸和多卵巢内显微注射pIRES-eGFP质粒第25页
     ·转染手术后基因整合和表达检测第25-26页
     ·对试验AA鸡的分组及人工授精第26页
     ·对胚胎及F1代的基因整合的检测第26-29页
3 结果与分析第29-34页
   ·质粒的酶切鉴定第29页
   ·PCR产物的电泳结果第29-30页
   ·手术过程图第30页
   ·手术后48h睾丸和卵巢中表达绿色荧光蛋白结果第30-31页
   ·人工授精后产生后代中外源基因的整合与表达结果第31-33页
   ·鸡胚PCR电泳图第33页
   ·PCR产物的Southern杂交结果第33-34页
4 讨论第34-38页
   ·脂质体在体内注射时的作用第34页
   ·绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因第34-35页
   ·脂质体的性能第35页
   ·脂质体-DNA复合物体内直接注射入睾丸和卵巢的优点第35-36页
   ·地高辛标记检测目的基因的转染第36页
   ·影响睾丸和卵巢内注射转染液法介导基因转移的因素第36页
   ·与其它几种转基因鸡制备方法的比较第36-38页
5 结论第38-39页
参考文献第39-43页
致谢第43-44页
攻读学位期间发表论文情况第44页

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