第一部分 上皮来源肿瘤中TGF-β和EGFR信号转导通路相互作用关系研究 | 第1-60页 |
英文缩略词 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
前言 | 第14-16页 |
实验材料 | 第16-20页 |
实验方法 | 第20-27页 |
1.细胞培养及形态观察 | 第20页 |
2.细胞生长曲线的绘制 | 第20页 |
3.体外细胞共培养模型 | 第20-21页 |
·肿瘤细胞和成纤维细胞在96孔培养板中的共培养模型 | 第20-21页 |
·肿瘤细胞和成纤维细胞在6孔培养板中的共培养模型 | 第21页 |
4.体内细胞共接种模型 | 第21-22页 |
5.Western Blot杂交分析相关蛋白的表达 | 第22-23页 |
6.免疫组化法检测肿瘤组织中EGFR、pEGFR、ERK、pERK和TGF-β1的表达 | 第23-24页 |
7.间接免疫荧光法观察人TGF-β1蛋白对肿瘤细胞EGFR蛋白磷酸化水平的影响 | 第24-25页 |
8.免疫共沉淀技术观察肿瘤细胞内蛋白质相互作用 | 第25-26页 |
9.统计学处理 | 第26-27页 |
实验结果 | 第27-49页 |
1.TGF-β1对人肿瘤细胞形态和增殖的影响 | 第27-30页 |
·TGF-β1对人肺腺癌细胞A549形态的影响 | 第27-29页 |
·TGF-β1蛋白作用下人肺腺癌细胞A549生长曲线的绘制 | 第29-30页 |
2.TGF-β1对肿瘤细胞EGFR信号通路相关蛋白功能的影响及TGF-β与EGFR信号通路相互作用关系的初步探讨 | 第30-38页 |
·TGF-β1对人表皮癌细胞A431中EGFR信号通路相关蛋白(EGFR、ERK和AKT)功能的影响 | 第30-33页 |
·TGF-β1对人卵巢癌细胞SKOV3中EGFR信号通路相关蛋白(EGFR、ERK和AKT)功能的影响 | 第33-36页 |
·间接免疫荧光法观察TGF-β1蛋白对人表皮癌细胞A431中EGFR蛋白功能的影响 | 第36-37页 |
·免疫共沉淀法观察TGF-β信号通路与EGFR信号通路相关蛋白的相互作用 | 第37-38页 |
3.同组织来源的成纤维细胞和肿瘤细胞体外共培养模型 | 第38-43页 |
·MTT试验观察成纤维细胞和肿瘤细胞的体外共培养条件下的增殖情况 | 第38-39页 |
·集落形成试验观察成纤维细胞和肿瘤细胞的体外共培养条件下的增殖情况 | 第39-41页 |
·ELISA法检测96孔板中肿瘤细胞和成纤维细胞共培养模型的TGF-β1量 | 第41-42页 |
·间接免疫荧光法检测96孔板中肿瘤细胞和成纤维细胞共培养模型中pEGFR的表达量 | 第42-43页 |
4.同组织来源的成纤维细胞和肿瘤细胞体内共接种模型 | 第43-49页 |
结论 | 第49-50页 |
讨论 | 第50-56页 |
第一部分 参考文献 | 第56-60页 |
第二部分 新型紫杉烷类化合物Syl611和NBP071逆转肿瘤多药耐药活性及机理研究 | 第60-121页 |
英文缩略词 | 第61-63页 |
中文摘要 | 第63-66页 |
英文摘要 | 第66-69页 |
前言 | 第69-72页 |
实验材料 | 第72-76页 |
实验方法 | 第76-83页 |
1.MTT法测定肿瘤细胞存活率 | 第76页 |
2.AO/EB双染色检测细胞凋亡 | 第76-77页 |
3.流式细胞术分析逆转剂对细胞周期分布的影响 | 第77页 |
4.Western Blot杂交分析相关蛋白的表达 | 第77-78页 |
5.RT-PCR分析药泵基因转录表达 | 第78-81页 |
6.Rhodamine123蓄积试验 | 第81页 |
7.HPLC检测细胞内Paclitaxel的浓度 | 第81-82页 |
8.Caco-2单层细胞模型检测逆转剂对Paclitaxel跨膜的影响 | 第82-83页 |
实验结果 | 第83-112页 |
1.紫杉烷类化合物多药耐药逆转活性筛选及细胞毒性检测 | 第83-89页 |
2.AO/EB双染色法检测细胞凋亡 | 第89-92页 |
3.Syl611和NBP071对耐药细胞株A549/Paclitaxel和KB/V细胞周期分布的影响 | 第92-94页 |
4.Syl611和NBP071对A549/Paclitaxel中3种膜转运蛋白mRNA表达的影响 | 第94-98页 |
5.Syl611和NBP071对耐药肿瘤细胞中膜转运蛋白P-gp表达的影响 | 第98-101页 |
6.Syl611和NBP071对肿瘤细胞内Rhodamine123蓄积的影响 | 第101-104页 |
7.Syl611对耐药细胞株内Paclitaxel含量的影响 | 第104-106页 |
8.Syl611对Paclitaxel在Caco-2单层细胞模型中跨膜转运能力的影响 | 第106-112页 |
结论 | 第112-113页 |
讨论 | 第113-117页 |
第二部分 参考文献 | 第117-121页 |
第一部分 论文综述 | 第121-128页 |
第二部分 论文综述 | 第128-134页 |
致谢 | 第134-136页 |
个人简历 | 第136-138页 |