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核桃花粉管通道法基因转化效率因子的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 引言第11-19页
   ·外源DNA 导入植物的技术第11-14页
     ·外源DNA 直接导入受体植物的理论基础第11-12页
     ·外源DNA 直接导入受体植物的可行性验证及应用第12-13页
     ·外源DNA 直接导入技术的优点和存在问题第13-14页
   ·花粉管通道法在植物遗传转化及育种中的应用第14-17页
     ·花粉管通道法导入外源DNA 技术的创立第14-15页
     ·花粉管通道法的胚胎解剖学基础第15页
     ·对花粉管通道法机理的研究和探讨第15页
     ·花粉管通道法的发展第15-16页
     ·花粉管通道法导入外源DNA 技术在果树基因转化中的应用及其展望第16-17页
   ·核桃生物技术研究进展第17-19页
     ·核桃组织培养技术研究进展第17-18页
     ·核桃转基因技术研究进展第18-19页
2 材料与方法第19-26页
   ·核桃离体胚培养的研究第19-20页
     ·试验材料第19页
     ·核桃胚培养基本培养基的筛选第19页
     ·表面灭菌对胚培养污染率和萌芽率的影响第19页
     ·白砂糖浓度对胚萌发和成苗的影响第19页
     ·横切种胚对胚萌发和成苗的影响第19-20页
     ·激素配比对种胚初代培养启动生长的影响第20页
     ·激素配比胚培苗继代增殖培养的影响第20页
   ·核桃继代苗和种胚对抗生素的敏感性试验第20-21页
     ·试验材料第20页
     ·抗生素对辽宁5 号核桃继代苗生长的影响第20页
     ·抗生素对清香核桃种胚萌发和成苗的影响第20-21页
   ·核桃花粉管通道法基因转化第21-25页
     ·试验材料第21页
     ·农杆菌菌株的培养第21页
     ·质粒DNA 的提取第21-22页
     ·花粉管萌发情况的观察第22页
     ·花粉管通道法导入外源DNA第22-23页
     ·子房注射处理对核桃果实损伤的观察第23页
     ·转化核桃果实GUS 标记基因的检测第23页
     ·核桃转化株系对Hyg 抗性检测第23页
     ·核桃转化株系PCR 检测第23-25页
   ·结果调查与统计方法第25-26页
3 结果与分析第26-36页
   ·核桃离体胚的培养第26-29页
     ·核桃胚培养基本培养基的筛选第26页
     ·表面灭菌对核桃离体胚培养的影响第26-27页
     ·白砂糖浓度对胚培养萌发和成苗的影响第27页
     ·横切种胚对胚培养的影响第27页
     ·激素配比对种胚初代培养增殖的影响第27-28页
     ·激素配比对胚培苗继代增殖的影响第28-29页
   ·核桃继代苗和种胚对抗生素的敏感性试验第29-32页
     ·潮霉素对辽宁5 号继代苗生长的影响第29-30页
     ·卡那霉素对辽宁5 号继代苗生长的影响第30-31页
     ·潮霉素对清香核桃种胚培养的影响第31页
     ·卡那霉素对清香核桃种胚培养的影响第31-32页
   ·核桃花粉管通道法基因转化第32-36页
     ·核桃花粉管通道法基因转化适宜转化时间的确定第32页
     ·不同质粒DNA 浓度对坐果率的影响第32-33页
     ·不同导入方法对坐果率的影响第33-34页
     ·不同浓度质粒DNA 导入后果实的GUS 检测第34页
     ·子房注射法对子房机械损伤的观察第34页
     ·花粉管通道法核桃基因转化植株的获得第34-35页
     ·花粉管通道法核桃基因转化植株的PCR 电泳检测第35-36页
4 讨论第36-41页
   ·核桃离体胚的培养第36页
   ·抗生素对核桃幼胚萌发和继代苗生长的影响第36-37页
   ·花粉管通道法转化体系的优化第37-40页
     ·外源DNA 导入时间的确定第38页
     ·外源DNA 导入方法对结实的影响第38-39页
     ·外源DNA 浓度对结实率的影响第39-40页
   ·关于转化后代的检测第40-41页
5 结论第41-42页
参考文献第42-48页
附录第48-53页
作者简介第53-54页
致谢第54页

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