| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-32页 |
| 1 植物体胚发生相关基因克隆研究进展 | 第17-18页 |
| 2 植物多酚氧化酶研究进展 | 第18-21页 |
| ·多酚氧化酶的作用机制 | 第18-19页 |
| ·植物体细胞胚胎发生中多酚氧化酶研究进展 | 第19页 |
| ·植物多酚氧化酶克隆研究进展 | 第19-21页 |
| 3 实时荧光定量PCR 技术及其在基因表达定量分析研究中应用 | 第21-25页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的原理及方法 | 第21-23页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的研究进展 | 第23-25页 |
| 4 植物体细胞胚胎发生相关酶类研究进展 | 第25-28页 |
| ·过氧化物酶研究进展 | 第25-27页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶研究进展 | 第27-28页 |
| 5 金花茶生物技术研究进展 | 第28-31页 |
| ·金花茶离体培养研究进展 | 第28-29页 |
| ·金花茶分子标记研究进展 | 第29-30页 |
| ·金花茶蛋白组学研究进展 | 第30页 |
| ·存在的问题 | 第30-31页 |
| 6 本研究的主要内容和意义 | 第31-32页 |
| ·研究内容 | 第31页 |
| ·研究意义 | 第31-32页 |
| 第二章 金花茶不同发育阶段体胚同步化材料的获得 | 第32-45页 |
| 第一节 金花茶体胚材料的获得 | 第32-35页 |
| 1 材料与方法 | 第32-33页 |
| ·接种材料 | 第32页 |
| ·培养方法 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-34页 |
| ·金花茶体胚的继代与增殖 | 第33页 |
| ·金花茶球形胚、心形胚同步化材料的获得 | 第33页 |
| ·金花茶子叶形胚和成熟胚同步化材料的获得 | 第33-34页 |
| ·金花茶花状多子叶胚与离体再生苗的继代与增殖 | 第34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| ·金花茶同步化体胚获得关键因素 | 第34页 |
| ·金花茶体胚褐变的原因 | 第34-35页 |
| 第二节 金花茶愈伤组织培养 | 第35-45页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·接种材料 | 第35页 |
| ·培养方法 | 第35-37页 |
| ·培养条件 | 第37页 |
| ·数据处理 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·金花茶体胚愈伤组织的诱导 | 第37-39页 |
| ·金花茶叶片愈伤组织的诱导 | 第39-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·金花茶体胚愈伤组织诱导的优点 | 第43页 |
| ·影响金花茶叶片消毒效果的主要因素 | 第43-44页 |
| ·激素对金花茶叶片愈伤组织诱导的影响 | 第44-45页 |
| 第三章 金花茶体胚PPO 基因克隆 | 第45-63页 |
| 第一节 金花茶体胚RNA 的提取与分离 | 第45-48页 |
| 1 材料与方法 | 第45-47页 |
| ·供试材料 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45-46页 |
| ·RNA 的提取步骤 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48页 |
| 第二节 金花茶 PPO 基因 cDNA 全长的获得和序列分析 | 第48-63页 |
| 1 材料和试剂 | 第48-51页 |
| ·供试材料 | 第48页 |
| ·仪器与试剂 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-62页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因的PCR 扩增 | 第51页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因的序列分析 | 第51-52页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因的核苷酸序列同源性比较 | 第52-53页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因保守区序列分析以及氨基酸序列比较 | 第53-56页 |
| ·金花茶PPO 基因编码的蛋白结构分析 | 第56-61页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因的进化树分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因的特异性 | 第62页 |
| ·金花茶体胚PPO 基因cDNA 全长获得的意义 | 第62-63页 |
| 第四章 金花茶体胚发生过程中PPO 基因表达实时荧光定量PCR 分析 | 第63-73页 |
| 1 材料和方法 | 第63-64页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·试剂和仪器 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-71页 |
| ·金花茶体胚发生过程中不同阶段的培养物总RNA 提取 | 第64-65页 |
| ·PPO 引物筛选结果 | 第65页 |
| ·荧光实时PCR 扩增参照基因和PPO 基因的参数分析 | 第65-70页 |
| ·金花茶体胚发生过程中PPO 基因相对定量表达分析 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| ·荧光定量PCR 技术的优点 | 第71页 |
| ·金花茶体胚发生过程中PPO 基因表达量呈下降趋势 | 第71-73页 |
| 第五章 金花茶体胚发育过程中PPO 酶活性变化分析 | 第73-76页 |
| 1 材料与方法 | 第73页 |
| ·材料 | 第73页 |
| ·PPO 酶活性测定方法 | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| ·PPO 酶活性易受试验条件影响 | 第74页 |
| ·金花茶体胚发生过程中PPO 酶活性呈降低趋势 | 第74-76页 |
| 第六章 金花茶体胚发生过程中POD 和APX 酶活性及同工酶酶谱变化分析 | 第76-87页 |
| 第一节 金花茶体胚发育过程中POD、APX 酶活性变化 | 第76-80页 |
| 1 材料与方法 | 第77-78页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·测定项目及试验方法 | 第77-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-79页 |
| ·金花茶体胚发生过程中POD 酶活性的变化 | 第78页 |
| ·金花茶体胚发生过程中APX 酶活性的变化 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-80页 |
| ·POD 与金花茶体胚发生的关系 | 第79-80页 |
| ·APX 与金花茶体胚发生的关系 | 第80页 |
| 第二节 金花茶体胚发育过程中POD、APX 同工酶酶谱变化 | 第80-87页 |
| 1 材料和方法 | 第80-83页 |
| ·材料 | 第80-81页 |
| ·方法与试剂 | 第81-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-86页 |
| ·金花茶体胚发生过程中POD 同工酶酶谱变化分析 | 第83-85页 |
| ·金花茶体胚发生过程中APX 同工酶酶谱变化分析 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-87页 |
| ·POD 同工酶与金花茶体胚发生的关系 | 第86页 |
| ·APX 同工酶与金花茶体胚发生的关系 | 第86-87页 |
| 第七章 小结 | 第87-90页 |
| 参考文献 | 第90-99页 |
| 图版及图版说明 | 第99-107页 |
| 附录 | 第107-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
