| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-31页 |
| 1 微卫星分子标记简介 | 第12-18页 |
| ·分子标记定义、特点及分类 | 第12页 |
| ·微卫星分子标记 | 第12-14页 |
| ·定义 | 第12-13页 |
| ·微卫星分子标记的优点 | 第13页 |
| ·微卫星的应用 | 第13-14页 |
| ·微卫星位点的获得方法 | 第14-18页 |
| ·从数据库或相关文献中获得 | 第14页 |
| ·从近缘物种获得 | 第14-15页 |
| ·使用ISSR分子标记的引物来获得 | 第15页 |
| ·从构建的基因组文库中获得 | 第15-18页 |
| 2 两栖类现状 | 第18-21页 |
| ·世界两栖类现状 | 第18页 |
| ·我国两栖类现状 | 第18-19页 |
| ·两栖类致危因素分析 | 第19-21页 |
| 3 两栖类微卫星研究现状 | 第21-23页 |
| 4 虎纹蛙属(Hoplobatrachus)及虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosus)研究现状综述 | 第23-31页 |
| ·虎纹蛙属(Hoplobatrachus)特征及其研究现状 | 第23-24页 |
| ·虎纹蛙属物种的形态鉴别特征 | 第23页 |
| ·虎纹蛙属的物种组成 | 第23-24页 |
| ·虎纹蛙属属名的由来 | 第24页 |
| ·虎纹蛙特征及其研究现状 | 第24-31页 |
| ·虎纹蛙生物学特征 | 第24-25页 |
| ·虎纹蛙分布现状 | 第25页 |
| ·虎纹蛙保护现状 | 第25页 |
| ·虎纹蛙种名的争论 | 第25-26页 |
| ·虎纹蛙研究现状 | 第26-31页 |
| 第二章 非伤害性取样策略在虎纹蛙保护遗传学中的应用研究 | 第31-36页 |
| 1 引言 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-33页 |
| ·实验动物及其处理 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·DNA的检测 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| ·血液的提取及保存 | 第34-35页 |
| ·趾样本的提取及保存 | 第35页 |
| ·取样方法比较 | 第35-36页 |
| 第三章 基于跨种扩增的虎纹蛙微卫星引物研究 | 第36-41页 |
| 1 引言 | 第36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·虎纹蛙基因组DNA的提取 | 第36页 |
| ·微卫星位点的获得 | 第36页 |
| ·微卫星位点的检测 | 第36-37页 |
| ·初筛结果的记录 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| ·跨种扩增中Mg~(2+)浓度和退火温度的选择 | 第38-39页 |
| ·跨种扩增成功率的影响因素分析 | 第39-41页 |
| 第四章 基于磁珠富集法筛选虎纹蛙微卫星引物 | 第41-59页 |
| 1 引言 | 第41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-47页 |
| ·虎纹蛙基因组DNA的获得 | 第41页 |
| ·酶切基因组DNA与连接接头 | 第41-43页 |
| ·磁珠富集含微卫星序列的片段 | 第43-44页 |
| ·连接、转化以及阳性克隆的选择 | 第44-45页 |
| ·测序 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·引物有效性与多态性筛检 | 第45-46页 |
| ·数据分析 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-56页 |
| ·虎纹蛙基因组DNA的提取 | 第47页 |
| ·基因组DNA酶切片段的获得 | 第47页 |
| ·接头连接后的PCR检测与扩增 | 第47页 |
| ·磁珠富集含微卫星DNA的片段及PCR产物纯化 | 第47-49页 |
| ·阳性克隆子的蓝白斑筛选 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆的PCR检测 | 第50页 |
| ·微卫星序列分类统计结果 | 第50-51页 |
| ·筛选出的引物及其特征 | 第51-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·限制性内切酶及接头的选择与应用 | 第56-57页 |
| ·磁珠的富集效率 | 第57页 |
| ·阳性克隆的鉴定和测序 | 第57页 |
| ·引物设计及其多态性检测 | 第57-59页 |
| 第五章 浙江地区虎纹蛙遗传多样性及遗传结构分析 | 第59-70页 |
| 1 引言 | 第59-60页 |
| 2 材料和方法 | 第60-62页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61页 |
| ·虎纹蛙基因组DNA的获得 | 第61页 |
| ·微卫星位点的PCR扩增与聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第61页 |
| ·数据分析 | 第61-62页 |
| ·种群遗传多样性检测 | 第61-62页 |
| ·种群瓶颈效应检测 | 第62页 |
| ·种群遗传分化检测 | 第62页 |
| ·种群基因流检测 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-67页 |
| ·种群遗传多样性分析 | 第62-64页 |
| ·种群瓶颈效应分析 | 第64-65页 |
| ·种群分化以及种群遗传结构 | 第65-66页 |
| ·种群基因流分析 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| ·种群遗传多样性 | 第67-68页 |
| ·种群瓶颈效应探讨 | 第68页 |
| ·种群遗传分化 | 第68-69页 |
| ·基因流 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-83页 |
| 附录 | 第83-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
