| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-58页 |
| ·二氯甲烷的分布和对环境的影响 | 第17-28页 |
| ·卤代烃与二氯甲烷 | 第17-21页 |
| ·二氯甲烷在环境中的累积 | 第21-26页 |
| ·二氯甲烷的危害 | 第26-28页 |
| ·微生物的脱氯机制 | 第28-35页 |
| ·有机卤化物作为碳源和能量的唯一来源 | 第29-30页 |
| ·微生物对有机氯化物脱氯方式举例 | 第30-35页 |
| ·二氯甲烷生物降解菌 | 第35-38页 |
| ·氯代脂肪烃降解菌 | 第35-36页 |
| ·二氯甲烷降解菌 | 第36-38页 |
| ·二氯甲烷脱卤素酶 | 第38-45页 |
| ·脱卤酶的生化和分子特征 | 第38-40页 |
| ·二氯甲烷脱卤素酶的一般性质 | 第40-42页 |
| ·二氯甲烷脱卤素酶核甘酸序列和二级结构 | 第42-43页 |
| ·二氯甲烷脱卤素酶的三维结构 | 第43-45页 |
| ·二氯甲烷生物降解关键酶的分子生物学研究 | 第45-46页 |
| ·二氯甲烷脱卤素酶和GSH-S-转移酶的进化关系 | 第46-48页 |
| ·二氯甲烷脱卤素酶基因表达的调控 | 第48-50页 |
| ·二氯甲烷的生物净化原理与工艺 | 第50-55页 |
| ·生物法净化二氯甲烷机理 | 第50-51页 |
| ·生物法净化二氯甲烷工艺 | 第51-55页 |
| ·本研究的工作基础、目的、意义和主要内容 | 第55-58页 |
| ·本研究的工作基础 | 第55页 |
| ·本研究的目的和选题意义 | 第55-56页 |
| ·本研究的主要内容 | 第56-58页 |
| 第二章 二氯甲烷降解菌株分离、鉴定及系统发育研究 | 第58-87页 |
| ·材料与方法 | 第58-69页 |
| ·材料与培养基 | 第58-59页 |
| ·试剂和仪器 | 第59页 |
| ·检测方法 | 第59-60页 |
| ·二氯甲烷降解菌株分离与降解能力初筛 | 第60-61页 |
| ·降解菌株的鉴定及系统发育研究 | 第61-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-84页 |
| ·菌株的驯化与筛选 | 第69-71页 |
| ·分离菌株的降解能力 | 第71-72页 |
| ·分离菌株的鉴定结果 | 第72-77页 |
| ·分离菌株的16S rDNA序列分析 | 第77-83页 |
| ·基于16S rDNA序列系统发育树的构建 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-87页 |
| 第三章 二氯甲烷降解菌株生长和降解特性研究 | 第87-105页 |
| ·材料与方法 | 第87-92页 |
| ·二氯甲烷降解菌株生长条件研究 | 第87-88页 |
| ·分离菌株降解特性研究 | 第88-89页 |
| ·高盐浓度下菌株WZ-12降解二氯甲烷特性 | 第89-90页 |
| ·二氯甲烷降解率的测定 | 第90页 |
| ·菌株wh22降解性质粒特性研究 | 第90-92页 |
| ·结果与讨论 | 第92-104页 |
| ·二氯甲烷降解菌的生长条件 | 第92-94页 |
| ·分离菌株降解特性研究 | 第94-98页 |
| ·高盐浓度下菌株WZ-12降解二氯甲烷特性 | 第98-100页 |
| ·菌株wh22降解性质粒特性研究 | 第100-104页 |
| ·小结 | 第104-105页 |
| 第四章 二氯甲烷生物降解工艺条件的优化 | 第105-117页 |
| ·材料与方法 | 第105-108页 |
| ·菌株和培养基 | 第105-106页 |
| ·最佳降解条件的选择 | 第106页 |
| ·摇瓶水平生物降解试验 | 第106页 |
| ·二氯甲烷的测定 | 第106-107页 |
| ·试验设计与分析 | 第107-108页 |
| ·结果与讨论 | 第108-115页 |
| ·最佳降解条件 | 第108-109页 |
| ·试验设计 | 第109页 |
| ·摇瓶生物降解试验 | 第109-111页 |
| ·响应面法优化DCM好氧降解工艺 | 第111-115页 |
| ·对降解率回归模型的实验验证 | 第115页 |
| ·小结 | 第115-117页 |
| 第五章 二氯甲烷脱卤酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第117-133页 |
| ·材料与方法 | 第117-121页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第117-118页 |
| ·菌种及培养条件 | 第118页 |
| ·实验方法 | 第118-120页 |
| ·酶学性质 | 第120-121页 |
| ·结果与讨论 | 第121-131页 |
| ·酶的分离纯化 | 第121-126页 |
| ·产酶和酶学性质研究 | 第126-131页 |
| ·小结 | 第131-133页 |
| 第六章 二氯甲烷脱卤酶的基因克隆与鉴定 | 第133-158页 |
| ·材料与方法 | 第133-144页 |
| ·菌株、载体和试剂盒 | 第133-135页 |
| ·试剂和培养基 | 第135-136页 |
| ·引物设计 | 第136-137页 |
| ·仪器与DNA分析软件 | 第137页 |
| ·试验设计与方法 | 第137-142页 |
| ·序列测定与系统发育分析 | 第142-143页 |
| ·同位素标记探针制备 | 第143页 |
| ·Southern分子杂交 | 第143-144页 |
| ·结果与讨论 | 第144-156页 |
| ·提取的细菌基因组的浓度 | 第144-145页 |
| ·PCR扩增dcmR基因 | 第145页 |
| ·克隆载体pUC57构建与鉴定 | 第145-146页 |
| ·表达载体的构建与酶切鉴定 | 第146-147页 |
| ·目的基因的鉴定 | 第147-156页 |
| ·小结 | 第156-158页 |
| 第七章 二氯甲烷脱卤素酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第158-178页 |
| ·材料与方法 | 第158-168页 |
| ·菌株、载体和工具酶 | 第158-160页 |
| ·试剂和培养基 | 第160页 |
| ·引物分析设计 | 第160-161页 |
| ·目的基因片断的PCR扩增与克隆 | 第161-162页 |
| ·表达质粒的构建与转化 | 第162-167页 |
| ·目的基因dcmR在大肠杆菌中诱导表达 | 第167页 |
| ·重组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第167页 |
| ·表达产物的活性分析 | 第167-168页 |
| ·结果与讨论 | 第168-177页 |
| ·重组表达载体的阳性克隆检测 | 第168-170页 |
| ·重组表达载体的酶切鉴定结果 | 第170-172页 |
| ·dcmR基因在大肠杆菌中的高效表达 | 第172-176页 |
| ·表达产物二氯甲烷脱卤素酶酶活检测 | 第176-177页 |
| ·小结 | 第177-178页 |
| 第八章 重组菌及其二氯甲烷脱卤素酶的研究 | 第178-189页 |
| ·材料与方法 | 第178-180页 |
| ·菌株、载体和工具酶 | 第178页 |
| ·试剂和培养基 | 第178页 |
| ·重组子诱导表达条件优化 | 第178-179页 |
| ·二氯甲烷降解率的测定 | 第179页 |
| ·脱卤素酶的活力测定 | 第179页 |
| ·融合蛋白的纯化和坚定 | 第179-180页 |
| ·融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第180页 |
| ·重组酶的酶学性质 | 第180页 |
| ·结果与讨论 | 第180-187页 |
| ·重组菌株和宿主菌E.coli BL21(DE3)的生长特性比较 | 第180-181页 |
| ·重组菌株和B.circulans WZ-12对CH_2Cl_2降解特性的比较 | 第181-182页 |
| ·表达初检验 | 第182-183页 |
| ·诱导表达与电泳检测 | 第183-184页 |
| ·重组酶的性质 | 第184-187页 |
| ·小结 | 第187-189页 |
| 第九章 结论与展望 | 第189-193页 |
| ·本论文主要结论 | 第189-191页 |
| ·论文创新点 | 第191-192页 |
| ·本文工作的不足及对今后工作的展望 | 第192-193页 |
| 博士研究生学习期间发表的主要学术论文 | 第193-194页 |
| 致谢 | 第194-195页 |
| 参考文献 | 第195-207页 |
