| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩写 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 文献综述（一）牛病毒性腹泻病毒的研究进展 | 第11-17页 |
| 1. BVDV 病原学特征 | 第11页 |
| 2. BVDV 基因组结构 | 第11-12页 |
| 3. BVDV 生物型转化的分子机制 | 第12-13页 |
| ·外源细胞序列的插入 | 第12-13页 |
| ·病毒自身基因的拷贝和重排 | 第13页 |
| ·点突变 | 第13页 |
| ·缺陷干扰粒子(defective interference，DI) | 第13页 |
| 4、流行病学 | 第13-14页 |
| 5、我国BVDV 疫苗的研究情况 | 第14-15页 |
| 6、防治 | 第15-16页 |
| 7、本课题主要研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 文献综述（二）卵黄抗体的研究进展 | 第17-22页 |
| 1、卵黄抗体的形成 | 第17页 |
| 2. IgY 的分子结构 | 第17页 |
| 3. IgY 的特点 | 第17-18页 |
| 4. IgY 的制备 | 第18-19页 |
| ·母鸡的免疫 | 第18-19页 |
| ·实验动物的选择 | 第18页 |
| ·免疫程序 | 第18-19页 |
| ·IgY 的提取 | 第19页 |
| 5. IgY 的应用 | 第19-22页 |
| ·动物疾病诊断中的应用 | 第19-20页 |
| ·动物疾病防治中的应用 | 第20-21页 |
| ·在人类疾病防治中的应用 | 第21-22页 |
| 第二章 试验研究 | 第22-39页 |
| 试验一 牛病毒性腹泻病毒抗原的制备 | 第22-28页 |
| 1、材料 | 第22-23页 |
| ·毒株 | 第22页 |
| ·细胞株 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要器材 | 第22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·主要溶液 | 第23页 |
| ·Hanks 液 | 第23页 |
| ·消化液 | 第23页 |
| ·细胞培养液 | 第23页 |
| ·TNE 缓冲液 | 第23页 |
| 2、方法 | 第23-25页 |
| ·细胞培养 | 第23页 |
| ·病毒增殖 | 第23-24页 |
| ·病毒的浓缩 | 第24页 |
| ·RT-PCR 方法检测细胞培养物中的BVDV | 第24页 |
| ·RNA 提取和反转录cDNA 合成 | 第24页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第24页 |
| ·病毒蛋白含量的测定 | 第24页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验反应条件的确定 | 第24页 |
| ·病毒毒力的测定 | 第24-25页 |
| 3、结果 | 第25-26页 |
| ·BVDV 感染MDBK 细胞倒置显微镜下的观察 | 第25页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验反应条件的确定 | 第25页 |
| ·RT-PCR 方法检测细胞培养物中的BVDV | 第25-26页 |
| ·病毒蛋白含量检测 | 第26页 |
| ·病毒毒价测定 | 第26页 |
| 4、讨论 | 第26-28页 |
| ·病毒的扩增 | 第26页 |
| ·BVDV 毒价的测定 | 第26-27页 |
| ·致细胞病变 | 第27-28页 |
| 试验二 抗BVDV 卵黄抗体的制备 | 第28-34页 |
| 1、材料 | 第28页 |
| ·毒株与细胞株 | 第28页 |
| ·抗原制备 | 第28页 |
| ·主要试剂和器材 | 第28页 |
| ·试验动物 | 第28页 |
| 2、方法 | 第28-30页 |
| ·蛋鸡的免疫 | 第28-29页 |
| ·鸡蛋的收集及处理 | 第29页 |
| ·卵黄抗体的提取 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测卵黄抗体 | 第29页 |
| ·琼脂扩散法测定IgY 效价 | 第29页 |
| ·间接ELISA 检测IgY 的抗体效价 | 第29-30页 |
| ·酶标抗体工作浓度的选择 | 第29-30页 |
| ·间接ELISA 检测方法操作流程 | 第30页 |
| ·BVDV 卵黄抗体中BVDV 的检测 | 第30页 |
| ·BVDV 卵黄抗体无菌检测 | 第30页 |
| ·BVDV 卵黄抗体安全性实验 | 第30页 |
| ·抗BVDV 卵黄抗体对NCP 型BVDV 体外中和试验 | 第30页 |
| 3、结果 | 第30-32页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测卵黄抗体 | 第30-31页 |
| ·琼扩试验检测结果 | 第31页 |
| ·间接ELISA 法测定IgY 效价 | 第31-32页 |
| ·酶标抗体工作浓度的确定 | 第31页 |
| ·卵黄抗体消长规律 | 第31-32页 |
| ·BVDV 检测结果 | 第32页 |
| ·无菌检验结果 | 第32页 |
| ·安全性检验结果 | 第32页 |
| ·IgY 体外中和试验结果 | 第32页 |
| 4、讨论 | 第32-34页 |
| 试验三 抗BVDV 卵黄抗体对BVDV 隐性感染犊牛病毒中和效果研究 | 第34-39页 |
| 1、材料 | 第34-35页 |
| ·标准毒株 | 第34页 |
| ·病料 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·引物 | 第34-35页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| 2、方法 | 第35-37页 |
| ·样品的检测 | 第35-36页 |
| ·RNA 的提取及反转录 | 第35页 |
| ·第一轮扩增 | 第35-36页 |
| ·第二轮扩增 | 第36页 |
| ·PCR 产物的回收、连接 | 第36页 |
| ·质粒的转化、测序 | 第36-37页 |
| ·BVDV 卵黄抗体动物保护试验 | 第37页 |
| 3、结果 | 第37-38页 |
| ·样品巢式RT-PCR 扩增结果 | 第37页 |
| ·测序结果 | 第37页 |
| ·治疗试验 | 第37-38页 |
| 4、讨论 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39页 |
| 进一步研究建议 | 第39-40页 |
| 创新点 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 附录 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 研究资助 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50-51页 |
| 导师评阅表 | 第51页 |
