| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-19页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·抗逆相关转录因子研究状况 | 第10-16页 |
| ·植物转录因子的结构及其功能 | 第11-12页 |
| ·植物转录因子的分类及其特点 | 第12-15页 |
| ·转录因子在提高植物抗逆性方面的作用 | 第15-16页 |
| ·DREB转录因子概况 | 第16-18页 |
| ·DREB转录因子的结构及表达特性 | 第16-17页 |
| ·DREB转录因子与植物抗逆性 | 第17页 |
| ·DREB转录因子国内外研究状况 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 二色补血草DREB基因的克隆及特性分析 | 第19-40页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·二色补血草DREB基因EST序列 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌种与载体 | 第19页 |
| ·酶及化学试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-29页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·二色补血草总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·RNA的纯化和RACE | 第21-24页 |
| ·序列拼接获得完整基因 | 第24页 |
| ·克隆二色补血草DREB基因全长 | 第24-25页 |
| ·DREB基因的序列分析 | 第25页 |
| ·二色补血草DREB基因在不同非生物胁迫下的表达模式 | 第25-26页 |
| ·荧光定位表达载体(pROK2-LbDREB-GFP)的构建 | 第26-28页 |
| ·LbDREB的亚细胞定位 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-38页 |
| ·二色补血草DREB基因全长的克隆 | 第29-32页 |
| ·二色补血草LbDREB基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·LbDREB基因在应答盐碱、冷、干旱、重金属胁迫中的表达模式 | 第33-37页 |
| ·pROK2-LbDREB-GFP表达载体的获得 | 第37-38页 |
| ·LbDREB亚细胞定位结果 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 3 二色补血草LbDREB基因的酵母转化及抗性分析 | 第40-49页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌株与载体 | 第40页 |
| ·主要化学试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·酵母表达载体pYES2-LbDREB的构建 | 第41-42页 |
| ·表达载体pYES2-LbDREB及空载体pYES2的酵母遗传转化 | 第42页 |
| ·酵母转化子的鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组酵母INVScl(pYES2-LbDREB)的诱导表达 | 第43-44页 |
| ·重组酵母INVScl(pYES2-LbDREB)逆境胁迫试验 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·酵母表达载体(pYES2-LbDREB)的获得 | 第45-46页 |
| ·重组酵母INVScl(pYES2-LbDREB)的PCR鉴定 | 第46页 |
| ·LbDREB在酵母中诱导表达 | 第46-47页 |
| ·重组酵母INVScl(pYES2-LbDREB)抗逆性实验 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 4 二色补血草LbDREB基因的烟草转化及抗性分析 | 第49-77页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·菌株与载体 | 第49页 |
| ·主要化学试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| ·功能验证试剂 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-56页 |
| ·植物表达载体pROK2-LbDREB的构建 | 第50-51页 |
| ·农杆菌感受态的制备及电击转化 | 第51页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第51-52页 |
| ·转化烟草的PCR检测 | 第52页 |
| ·转化烟草的PCR-Southem及Northern杂交 | 第52页 |
| ·转基因烟草植株的抗性分析 | 第52-55页 |
| ·实时定量RT-PCR分析下游基因的表达 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-74页 |
| ·植物表达载体(pROK2-LbDREB)的获得 | 第56-57页 |
| ·转LbDREB基因烟草的获得 | 第57-58页 |
| ·转LbDREB基因烟草的分子鉴定 | 第58-59页 |
| ·转LbDREB基因烟草的耐盐性分析 | 第59-67页 |
| ·转LbDREB基因烟草植株抗重金属胁迫的分析 | 第67-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
