| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一部分 研究背景 | 第8-19页 |
| 一、FOX蛋白家族研究简介 | 第8-16页 |
| (一) FOX蛋白家族成员 | 第8-12页 |
| (二) FOX家族蛋白的主要功能 | 第12-15页 |
| (三) FOXC1基因及研究进展 | 第15-16页 |
| 二、E2F1蛋白研究进展 | 第16-18页 |
| (一) E2Fs转录因子蛋白家族简介 | 第16-17页 |
| (二) E2F1 | 第17-18页 |
| 三、本论文研究的内容及意义 | 第18-19页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第19-31页 |
| 一、实验材料 | 第19页 |
| (一) 质粒 | 第19页 |
| (二) 蛋白质和抗体 | 第19页 |
| (三) 哺乳动物细胞系 | 第19页 |
| (四) 试剂 | 第19页 |
| 二、实验方法 | 第19-31页 |
| Ⅰ.生物信息学方法 | 第19-20页 |
| Ⅱ.分子生物学实验方法 | 第20-27页 |
| (一) 分子克隆 | 第20页 |
| (二) DNA的琼脂糖电泳 | 第20页 |
| (三) 质粒大量制备的方法 | 第20-22页 |
| (四) 哺乳动物细胞总RNA的提取 | 第22-23页 |
| (五) 逆转录(REVERSE TRANSCRIPTION,RT) | 第23页 |
| (六) PCR和荧光实时定量PCR(REALTIME PCR) | 第23-25页 |
| (七) 染色质免疫沉淀实验(CHROMATIN IMMUNOPRECIPITATION,CHIP) | 第25-27页 |
| Ⅲ.细胞生物学实验方法 | 第27-31页 |
| (一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第27页 |
| (二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第27-29页 |
| (三) 蛋白质的WESTERN BLOT分析 | 第29-31页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第31-42页 |
| 一、生物信息学方法预测FOXC1基因可能的转录调控因子 | 第31页 |
| 二、重组质粒的构建及鉴定 | 第31-36页 |
| (一) FOXC1报告基因质粒的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| (二) FOXC1截短突变报告基因质粒的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| (三) FOXC1点突变报告基因质粒的构建及鉴定 | 第33-36页 |
| 三、转录因子E2F1在FOXC1基因转录调控中的作用 | 第36-42页 |
| (一) 转录因子E2F1、Sp1和组蛋白乙酰基转移酶p300对FOXC1转录的影响 | 第36-37页 |
| (二) 过表达E2F1上调内源FOXC1基因的mRNA水平 | 第37-38页 |
| (三) 过表达E2F1上调内源FOXC1基因的蛋白水平 | 第38-39页 |
| (四) 确定FOXC1基因启动子上的E2F1结合元件 | 第39-42页 |
| 第四部分 讨论 | 第42-45页 |
| 一、转录因子E2F1调控FOXC1基因的转录 | 第42页 |
| 二、转录因子和转录辅因子对FOXC1基因转录激活的促进作用 | 第42-43页 |
| 三、转录因子E2F1调控FOXC1基因表达的意义及启示 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第55页 |
