| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 符号对照表 | 第18-19页 |
| 缩略语对照表 | 第19-25页 |
| 第一章 绪论 | 第25-43页 |
| 1.1 抗生素的使用和危害及新药开发的紧迫性 | 第25-28页 |
| 1.1.1 抗生素的特性及种类 | 第25页 |
| 1.1.2 抗生素在医学疾病治疗中的应用 | 第25-26页 |
| 1.1.3 传统抑菌机理 | 第26-27页 |
| 1.1.4 抗生素滥用危害 | 第27-28页 |
| 1.2 现有抗菌肽研究为本文筛选提供了研究基础 | 第28-32页 |
| 1.2.1 抗菌肽的生物学特性 | 第28-29页 |
| 1.2.2 家族分类 | 第29页 |
| 1.2.3 分子结构 | 第29-30页 |
| 1.2.4 抑菌杀菌机制 | 第30-32页 |
| 1.3 耐药性金黄色葡萄球菌相关研究为本文提供病原微生物研究保障 | 第32-34页 |
| 1.3.1 金黄色葡萄球菌相关病理学研究 | 第32页 |
| 1.3.2 金黄色葡萄球菌特征 | 第32-33页 |
| 1.3.3 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗药性研究 | 第33页 |
| 1.3.4 金黄色葡萄球菌的毒力因子 | 第33-34页 |
| 1.4 抗菌肽对MRSA的活性研究为本文研究提供研究支撑 | 第34-37页 |
| 1.4.1 Leucine Leucine-37 | 第35页 |
| 1.4.2 Glycin-rich antimicrobial peptide | 第35-36页 |
| 1.4.3 Anoplin | 第36页 |
| 1.4.4 Melittin和Bactenecin-8c | 第36页 |
| 1.4.5 两栖类及鱼类动物抗菌肽作用MRSA机制研究 | 第36-37页 |
| 1.5 本文抗菌肽在体筛选经典生物——秀丽隐杆线虫 | 第37-42页 |
| 1.5.1 模式生物秀丽隐杆线虫特点 | 第37-38页 |
| 1.5.2 秀丽隐杆线虫作为药物筛选模式生物的优势 | 第38-39页 |
| 1.5.3 秀丽隐杆线虫先天免疫通路研究进展 | 第39-42页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
| 第二章 Brevinin-2家族抗菌肽对MRSA活性及相关特性研究 | 第43-65页 |
| 2.1 前言 | 第43-44页 |
| 2.2 材料与方法 | 第44-49页 |
| 2.2.1 菌株、细胞系与多肽 | 第44页 |
| 2.2.2 仪器与试剂 | 第44-46页 |
| 2.2.3 Brevinin-2家族抗菌肽获得及生物信息学分析 | 第46页 |
| 2.2.4 Brevinin-2家族抗菌肽MIC及MBC活性测定 | 第46-47页 |
| 2.2.5 Brevinin-2家族典型抗菌肽的盐抗性实验 | 第47页 |
| 2.2.6 Brevinin-2家族典型抗菌肽的溶血性研究 | 第47页 |
| 2.2.7 Brevinin-2家族典型抗菌肽的细胞毒性 | 第47-49页 |
| 2.2.8 Brevinin-2家族抗菌肽与Pexiganan细胞毒性对比 | 第49页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第49-63页 |
| 2.3.1 统计分析 | 第49页 |
| 2.3.2 Brevinin-2家族抗菌肽序列及进化具有一定多样性 | 第49-55页 |
| 2.3.3 Brevinin-2家族抗菌肽的MRSA体外抗菌活性差异极大 | 第55-57页 |
| 2.3.4 Brevinin-2家族典型抗菌肽在生理盐离子浓度下受影响较小 | 第57-60页 |
| 2.3.5 Brevinin-2家族典型抗菌肽具有不同程度溶血活性 | 第60-61页 |
| 2.3.6 部分Brevinin-2家族典型抗菌肽不具有细胞毒性 | 第61-63页 |
| 2.4 本章小结 | 第63-65页 |
| 第三章 MRSA对秀丽隐杆线虫的影响研究 | 第65-81页 |
| 3.1 前言 | 第65-66页 |
| 3.2 材料与方法 | 第66-72页 |
| 3.2.1 线虫品系与菌株 | 第66页 |
| 3.2.2 仪器与试剂 | 第66-68页 |
| 3.2.3 线虫的培养 | 第68页 |
| 3.2.4 线虫的同步化处理 | 第68-69页 |
| 3.2.5 线虫的冻存方法 | 第69页 |
| 3.2.6 病原微生物对N2线虫运动能力影响测试 | 第69-70页 |
| 3.2.7 病原微生物对线虫体长影响 | 第70页 |
| 3.2.8 产卵数目测定 | 第70页 |
| 3.2.9 病原微生物对线虫的致死率测定 | 第70-71页 |
| 3.2.10 MRSA对线虫影响的单细胞凝胶电泳实验 | 第71-72页 |
| 3.2.11 数据处理 | 第72页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第72-78页 |
| 3.3.1 病原微生物对线虫行为产生了消极影响 | 第72-73页 |
| 3.3.2 病原微生物阻滞了线虫正常体长发育 | 第73-74页 |
| 3.3.3 病原微生物减少线虫生殖量 | 第74页 |
| 3.3.4 病原微生物对N2线虫产生致死效应 | 第74-75页 |
| 3.3.5 MRSA对不同突变体线虫产生致死效应 | 第75-77页 |
| 3.3.6 彗星实验证明MRSA对线虫具有遗传毒性 | 第77-78页 |
| 3.4 本章小结 | 第78-81页 |
| 第四章 Brevinin-2家族典型抗菌肽对线虫的影响及MRSA感染治疗研究 | 第81-103页 |
| 4.1 前言 | 第81-82页 |
| 4.2 材料与方法 | 第82-88页 |
| 4.2.1 线虫品系与菌株 | 第82页 |
| 4.2.2 仪器与试剂 | 第82页 |
| 4.2.3 线虫的准备 | 第82-83页 |
| 4.2.4 基于OPT研究Brevinin-2家族典型抗菌肽对线虫发育及寿命的影响 | 第83-84页 |
| 4.2.5 Brevinin-2家族典型抗菌肽对线虫其它生理指标影响 | 第84-85页 |
| 4.2.6 基于MIC浓度的Brevinin-2典型肽对SEK-1 /GLP-4线虫MRSA感染的治疗 | 第85-86页 |
| 4.2.7 低于MIC浓度Brevinin-2家族肽对SEK-1 /GLP-4线虫MRSA感染治疗 | 第86-87页 |
| 4.2.8 Brevinin-2-OA3,Brevinin-2ISb和Brevinin-2TSa溶血活性研究 | 第87页 |
| 4.2.9 数据处理 | 第87-88页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第88-99页 |
| 4.3.1 Brevinin-2家族典型抗菌肽有效提高线虫发育及生存状况 | 第88-90页 |
| 4.3.2 Brevinin-2家族典型抗菌肽有效提高了线虫各项生理指标 | 第90-92页 |
| 4.3.3 Brevinin-2家族典型抗菌肽有效提高了MRSA感染线虫生存率 | 第92-95页 |
| 4.3.4 Brevinin-2, Brevinin-2-OA3, Brevinin-2ISb和Brevinin-2TSa在低浓度具备治疗活性 | 第95-98页 |
| 4.3.5 Brevinin-2-OA3,Brevinin-2ISb和Brevinin-2TSa低浓度下溶血活性显著降低 | 第98-99页 |
| 4.4 本章小结 | 第99-103页 |
| 第五章 Brevinin-2ISb与MRSA作用的分子机理研究 | 第103-129页 |
| 5.1 前言 | 第103-104页 |
| 5.2 材料与方法 | 第104-112页 |
| 5.2.1 线虫品系与菌株 | 第104页 |
| 5.2.2 仪器与试剂 | 第104-106页 |
| 5.2.3 MRSA的培养及定量 | 第106页 |
| 5.2.4 低浓度Brevinin-2ISb作用MRSA溶血活性的测定 | 第106-107页 |
| 5.2.5 低浓度Brevinin-2ISb作用MRSA凝固酶效价测定 | 第107页 |
| 5.2.6 低浓度Brevinin-2ISb作用后MRSA总肠毒素检测 | 第107页 |
| 5.2.7 低浓度Brevinin-2ISb作用后MRSA刺激TNF-α释放 | 第107页 |
| 5.2.8 实时定量PCR法检测MRSA毒力基因表达 | 第107-110页 |
| 5.2.9 免疫印迹分析MRSA主要毒力因子蛋白表达 | 第110-111页 |
| 5.2.10 Brevinin-2ISb对MRSA核酸泄露的影响 | 第111页 |
| 5.2.11 Brevinin-2ISb对MRSA的胞内抑制机理研究 | 第111-112页 |
| 5.2.12 Brevinin-2ISb结构分析 | 第112页 |
| 5.2.13 数据处理 | 第112页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第112-127页 |
| 5.3.1 低浓度Brevinin-2ISb作用MRSA后的毒力指标下降 | 第112-115页 |
| 5.3.2 低浓度Brevinin-2ISb作用后MRSA毒力基因表达水平下调 | 第115-119页 |
| 5.3.3 低浓度Brevinin-2ISb作用后MRSA的典型毒力蛋白表达水平下调 | 第119-121页 |
| 5.3.4 低浓度Brevinin-2ISb不会造成MRSA核酸泄露但可入膜与核酸结合 | 第121-124页 |
| 5.3.5 Brevinin-2ISb结构功能分析 | 第124-127页 |
| 5.4 本章小结 | 第127-129页 |
| 第六章 Brevinin-2ISb激活秀丽隐杆线虫免疫系统机理初探 | 第129-143页 |
| 6.1 前言 | 第129页 |
| 6.2 材料与方法 | 第129-133页 |
| 6.2.1 线虫品系与菌株 | 第129-130页 |
| 6.2.2 仪器与试剂 | 第130页 |
| 6.2.3 Brevinin-2ISb抗MRSA感染的免疫途径分析 | 第130-131页 |
| 6.2.4 线虫总RNA提取及引物特异性验证 | 第131-132页 |
| 6.2.5 Brevinin-2ISb及MRSA对线虫先天免疫调控基因表达谱影响 | 第132页 |
| 6.2.6 Brevinin-2ISb及MRSA对秀丽隐杆线虫抗菌蛋白Lys-7表达影响 | 第132-133页 |
| 6.2.7 数据处理 | 第133页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第133-140页 |
| 6.3.1 线虫DAF-2/DAF-16通路对Brevinin-2ISb诱导的MRSA感染保护至关重要 | 第133-135页 |
| 6.3.2 秀丽隐杆线虫总RNA正常且获得目标检测基因片段 | 第135-136页 |
| 6.3.3 Brevinin-2ISb及MRSA激活线虫DAF-2/DAF-16关键基因表达 | 第136-137页 |
| 6.3.4 Brevinin-2Isb及MRSA对线虫LYS-7表达具有上调激活作用 | 第137-140页 |
| 6.4 本章小结 | 第140-143页 |
| 第七章 总结与展望 | 第143-147页 |
| 7.1 Brevinin-2家族典型肽可研发针对MRSA的新型药物 | 第143-144页 |
| 7.2 MRSA对秀丽隐杆线虫具有明显毒性及诸多不良影响 | 第144页 |
| 7.3 Brevinin-2家族典型肽可有效治疗MRSA感染线虫 | 第144-145页 |
| 7.4 Brevinin-2ISb可入胞结合核酸抑制MRSA毒力因子活性 | 第145-146页 |
| 7.5 Brevinin-2ISb有效激活线虫DAF-2/DAF-16免疫通路 | 第146-147页 |
| 参考文献 | 第147-173页 |
| 致谢 | 第173-175页 |
| 作者简介 | 第175-176页 |
