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白念珠菌CaPTC4基因的鉴定

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-11页
   ·酵母菌简介第7页
   ·白念珠菌简介第7-8页
   ·蛋白磷酸酯酶第8-10页
   ·本论文的研究内容及意义第10-11页
第二章 实验材料与方法第11-27页
   ·实验材料第11-18页
     ·菌株第11页
     ·质粒第11-12页
     ·引物第12页
     ·培养基第12-13页
     ·试剂第13-14页
     ·常用溶液与缓冲液第14-17页
     ·实验所用的酶类、试剂盒和特殊的试剂第17页
     ·主要仪器第17-18页
   ·实验方法第18-27页
     ·白念珠菌和大肠杆菌菌株的培养与保存第18页
     ·SDS 碱裂解法小量制备质粒DNA第18-19页
     ·DNA 的酶切第19页
     ·DNA 的连接第19-20页
     ·乙醇沉淀法纯化DNA 片断第20页
     ·筛选阳性克隆的酶切检验第20页
     ·玻璃珠法提取白念珠菌基因组DNA第20-21页
     ·PCR 扩增DNA 片断第21页
     ·CaCl_2法制备感受态细胞第21-22页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第22页
     ·蛋白的诱导、表达第22-23页
     ·包涵体的鉴定和稀释复性第23-24页
     ·重组蛋白His_6-CaPtc4p的纯化第24页
     ·磷酸酯酶活性测定分析第24-26页
     ·乙酸锂法转化白念珠菌细胞第26-27页
第三章 实验结果与讨论第27-44页
   ·引言第27-28页
   ·白念珠菌CaPtc4p 蛋白的功能研究第28-34页
     ·白念珠菌CaPtc4p 蛋白的查找第28页
     ·白念珠菌CaPTC4 基因的序列分析第28-29页
     ·原核细胞中表达重组蛋白His_6-CaPtc4p第29-30页
     ·重组蛋白His_6-CaPtc4p包涵体的稀释复性第30-31页
     ·重组蛋白His_6-CaPtc4p的纯化第31-32页
     ·重组蛋白His_6-CaPtc4p蛋白磷酸酯酶活性的测定第32-34页
   ·白念珠菌CaPTC4 基因的敲除第34-41页
     ·白念珠菌CaPTC4 基因的分析第34-35页
     ·白念珠菌CaPTC4 基因敲除盒的构建第35-37页
     ·白念珠菌CaPTC4 基因的敲除策略第37-39页
     ·白念珠菌CaPTC4 基因单缺失株的基因型鉴定第39-40页
     ·白念珠菌CaPTC4 基因双缺失株的基因型鉴定第40-41页
   ·白念珠菌CaPTC4 基因的克隆第41-42页
   ·小结与展望第42-44页
参考文献第44-47页
发表论文和科研情况说明第47-48页
致谢第48页

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