中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-11页 |
·酵母菌简介 | 第7页 |
·白念珠菌简介 | 第7-8页 |
·蛋白磷酸酯酶 | 第8-10页 |
·本论文的研究内容及意义 | 第10-11页 |
第二章 实验材料与方法 | 第11-27页 |
·实验材料 | 第11-18页 |
·菌株 | 第11页 |
·质粒 | 第11-12页 |
·引物 | 第12页 |
·培养基 | 第12-13页 |
·试剂 | 第13-14页 |
·常用溶液与缓冲液 | 第14-17页 |
·实验所用的酶类、试剂盒和特殊的试剂 | 第17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-27页 |
·白念珠菌和大肠杆菌菌株的培养与保存 | 第18页 |
·SDS 碱裂解法小量制备质粒DNA | 第18-19页 |
·DNA 的酶切 | 第19页 |
·DNA 的连接 | 第19-20页 |
·乙醇沉淀法纯化DNA 片断 | 第20页 |
·筛选阳性克隆的酶切检验 | 第20页 |
·玻璃珠法提取白念珠菌基因组DNA | 第20-21页 |
·PCR 扩增DNA 片断 | 第21页 |
·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第21-22页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第22页 |
·蛋白的诱导、表达 | 第22-23页 |
·包涵体的鉴定和稀释复性 | 第23-24页 |
·重组蛋白His_6-CaPtc4p的纯化 | 第24页 |
·磷酸酯酶活性测定分析 | 第24-26页 |
·乙酸锂法转化白念珠菌细胞 | 第26-27页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第27-44页 |
·引言 | 第27-28页 |
·白念珠菌CaPtc4p 蛋白的功能研究 | 第28-34页 |
·白念珠菌CaPtc4p 蛋白的查找 | 第28页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因的序列分析 | 第28-29页 |
·原核细胞中表达重组蛋白His_6-CaPtc4p | 第29-30页 |
·重组蛋白His_6-CaPtc4p包涵体的稀释复性 | 第30-31页 |
·重组蛋白His_6-CaPtc4p的纯化 | 第31-32页 |
·重组蛋白His_6-CaPtc4p蛋白磷酸酯酶活性的测定 | 第32-34页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因的敲除 | 第34-41页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因的分析 | 第34-35页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因敲除盒的构建 | 第35-37页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因的敲除策略 | 第37-39页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因单缺失株的基因型鉴定 | 第39-40页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因双缺失株的基因型鉴定 | 第40-41页 |
·白念珠菌CaPTC4 基因的克隆 | 第41-42页 |
·小结与展望 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
发表论文和科研情况说明 | 第47-48页 |
致谢 | 第48页 |