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鸡常染色体矮小性状的候选基因研究

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-29页
   ·鸡的基因组研究进展第10-11页
     ·鸡是一种重要的模式生物第10页
     ·重要的鸡资源家系第10页
     ·鸡基因组结构和组成第10页
     ·鸡基因组图谱第10-11页
   ·矮小型鸡的研究进展第11-15页
     ·矮小基因的发现第11-12页
     ·dw 基因的研究进展第12-13页
     ·常染色体矮小鸡起源第13页
     ·adw 基因初步研究进展第13-14页
     ·矮小型鸡在家禽生产上的应用第14-15页
   ·鸡生长轴相关基因的研究第15-20页
     ·GH 基因第16-17页
     ·GHR 基因第17页
     ·IGFs 基因第17-18页
     ·PIT-1 基因第18-19页
     ·adw 候选基因概况第19-20页
   ·焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术概述第20-23页
     ·Pyrosequencing 技术的简介第20页
     ·Pyrosequencing 技术的原理第20-21页
     ·Pyrosequencing 技术的反应过程第21-22页
     ·Pyrosequencing 技术的改进第22页
     ·Pyrosequencing 技术的应用第22-23页
   ·荧光定量 PCR(Fluorescence Quantitative PCR,FQ-PCR)技术第23-28页
     ·荧光定量 PCR 技术简介第23页
     ·荧光定量 PCR 技术的基本原理第23-24页
     ·实时荧光定量 PCR 技术的几个相关参数第24-25页
     ·荧光定量 PCR 技术的主要类型第25-27页
     ·定量方法第27页
     ·荧光定量 PCR 技术的应用第27-28页
   ·本研究的目的和意义第28-29页
2 adw 性状连锁SNP 标记的获得第29-35页
   ·实验材料第29-30页
     ·实验动物第29页
     ·主要试剂及溶液配制第29页
     ·主要仪器第29-30页
   ·实验方法第30-31页
     ·adw 候选区间的确定第30页
     ·引物设计与合成第30页
     ·PCR 扩增第30-31页
     ·PCR 产物纯化第31页
     ·测序比对寻找adw 连锁标记第31页
   ·结果与分析第31-34页
     ·adw 候选区间的确定第31-32页
     ·测序比对寻找adw 连锁标记第32-34页
   ·讨论第34-35页
3 PCR-RFLP 验证功能性连锁位点第35-41页
   ·实验材料第35页
     ·实验动物第35页
     ·主要试剂第35页
     ·主要仪器第35页
   ·实验方法第35-36页
     ·PCR 扩增第35页
     ·PCR 反应产物纯化第35页
     ·限制性内切酶消化第35-36页
   ·结果与分析第36-39页
   ·讨论第39-41页
4 焦磷酸测序检测中国地方鸡种adw 特异位点第41-47页
   ·实验材料第41-42页
     ·实验动物第41页
     ·主要试剂和常规溶液配制第41页
     ·主要仪器设备第41-42页
   ·实验方法第42-43页
     ·禽血的采取及处理第42页
     ·禽血基因组DNA 的提取——酚仿法第42页
     ·引物的设计与合成第42页
     ·PCR 扩增第42-43页
     ·焦磷酸测序第43页
   ·实验结果与分析第43-45页
     ·禽血基因组 DNA 的提取第43-44页
     ·PCR 产物检测第44-45页
     ·焦磷酸测序结果第45页
   ·讨论第45-47页
5 定量 PCR 检测 ASCL4 在正常白莱航鸡不同发育时期,不同组织中的表达第47-61页
   ·实验材料第47-48页
     ·实验动物第47页
     ·菌株及质粒第47页
     ·主要试剂和试剂盒第47页
     ·常规溶液及试剂配制第47-48页
     ·主要仪器设备第48页
   ·引物设计与合成第48-49页
   ·实验方法第49-55页
     ·总 RNA 的提取第49-50页
     ·总 RNA 的纯化第50-51页
     ·RNA 纯度及浓度检测第51页
     ·反转录第51-52页
     ·实时荧光定量 PCR 反应第52-55页
   ·实验结果与分析第55-60页
     ·定量 PCR 引物的选择第55-56页
     ·荧光定量 PCR 标准曲线及扩增曲线第56页
     ·熔解曲线分析第56-57页
     ·胚胎八日龄各组织 ASCL4 表达情况第57-58页
     ·出壳一周龄各组织 ASCL4 表达情况第58-59页
     ·皮肤组织不同时期 ASCL4 表达比较第59-60页
   ·讨论第60-61页
6 结论第61-62页
7 展望第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-71页
附录第71-79页
作者简介第79页

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