中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
中英文缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-27页 |
·DNA 甲基化 | 第13-19页 |
·DNA 甲基化的形式 | 第13-14页 |
·DNA 甲基化与基因表达 | 第14-15页 |
·DNA 甲基化与肿瘤 | 第15-16页 |
·DNA 甲基化的研究方法 | 第16-19页 |
·甲基化结合蛋白 | 第19-21页 |
·用于甲基化检测的基因芯片技术 | 第21-27页 |
·基因芯片的概念 | 第21-22页 |
·基因芯片的种类 | 第22页 |
·基因芯片的制备 | 第22-24页 |
·基因芯片的应用 | 第24页 |
·微阵列技术在甲基化DNA 中的应用 | 第24-27页 |
第二章 MBD2b 蛋白的表达及纯化 | 第27-44页 |
·材料和方法 | 第28-39页 |
·实验材料,试剂及仪器 | 第28-32页 |
·实验方法 | 第32-39页 |
·结果 | 第39-42页 |
·RNA 样本的纯度、浓度、完整性鉴定 | 第39页 |
·MBD2b 基因的获得 | 第39-40页 |
·pGEX-5X-1 质粒的制备 | 第40-41页 |
·质粒酶切鉴定 | 第41页 |
·菌落PCR 鉴定 | 第41-42页 |
·基因克隆的鉴定 | 第42页 |
·GST-MBD2b 融合蛋白表达纯化 | 第42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
第三章:甲基化CPG 岛富集方法的建立 | 第44-60页 |
·材料与方法 | 第44-51页 |
·材料 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-51页 |
·结果 | 第51-58页 |
·基因组DNA 抽提 | 第51-53页 |
·基因组DNA 超声破碎 | 第53页 |
·GST-MBD2b 蛋白的甲基化 DNA 结合活性的验证 | 第53-54页 |
·甲基化富集条件的优化 | 第54-55页 |
·甲基化富集的影响因素 | 第55-57页 |
·加linker 后扩增情况 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第四章:甲基化CPG 岛富集效率的评估 | 第60-84页 |
·材料和方法 | 第60-69页 |
·材料 | 第60-61页 |
·方法 | 第61-69页 |
·结果 | 第69-82页 |
·Real Time PCR 检测 | 第69-71页 |
·基因芯片检测 | 第71-82页 |
·讨论 | 第82-84页 |
第五章 结论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第93-95页 |