| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-25页 |
| ·防御素的研究进展 | 第14-21页 |
| ·简介 | 第14页 |
| ·防御素的来源分类及结构特征 | 第14页 |
| ·防御素的生物学功能 | 第14-15页 |
| ·防御素抗菌作用的影响因素 | 第15-16页 |
| ·防御素的基因工程 | 第16-17页 |
| ·构建小肽串联基因的方法 | 第17-21页 |
| ·防御素的应用前景 | 第21页 |
| ·本课题防御素——菌丝霉素（PLECTASIN）的研究进展 | 第21-23页 |
| ·本研究思路、目的和意义 | 第23-25页 |
| ·本研究思路 | 第23-24页 |
| ·本研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 菌丝霉素遗传进化分析 | 第25-33页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·生物信息学工具 | 第25页 |
| ·分析结果 | 第25-32页 |
| ·讨论与结论 | 第32-33页 |
| 第三章 单拷贝菌丝霉素在毕赤酵母中的表达及纯化 | 第33-48页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·质粒与菌株 | 第33页 |
| ·DNA 修饰酶类与其他生化试剂 | 第33-34页 |
| ·基因及引物合成 | 第34页 |
| ·培养基及缓冲液等试剂的配制 | 第34-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-40页 |
| ·菌丝霉素基因序列设计、合成及其表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·重组表达载体pPICPlectasin 的电转化及阳性转化子筛选 | 第36-39页 |
| ·pPICPlectasin 阳性转化子的诱导表达 | 第39页 |
| ·重组Plectasin 的抑菌活性鉴定 | 第39页 |
| ·表达产物的纯化 | 第39页 |
| ·pPICPlectasin 阳性转化子的高密度发酵 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-46页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第40页 |
| ·重组子的转化及阳性转化子的筛选 | 第40-41页 |
| ·pPICPlectasin 阳性转化子的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·重组Plectasin 的抑菌活性鉴定 | 第42-43页 |
| ·表达产物的纯化 | 第43-45页 |
| ·pPICPlectasin 阳性转化子的高密度发酵 | 第45-46页 |
| ·讨论与结论 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 第四章 菌丝霉素多拷贝表达载体构建及其表达 | 第48-58页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·质粒与菌株 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第48-49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·菌丝霉素二拷贝表达载体的构建 | 第49-51页 |
| ·菌丝霉素四拷贝表达载体的构建 | 第51页 |
| ·菌丝霉素八拷贝表达载体的构建 | 第51页 |
| ·菌丝霉素各拷贝表达载体转化筛选及拷贝数鉴定 | 第51-52页 |
| ·菌丝霉素各拷贝表达载体的诱导表达 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-57页 |
| ·多拷贝表达载体的构建及筛选 | 第52-54页 |
| ·菌丝霉素多拷贝转化毕赤酵母及阳性转化子的筛选 | 第54-56页 |
| ·菌丝霉素各拷贝阳性转化子的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·讨论与结论 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第57页 |
| ·结论 | 第57-58页 |
| 第五章 重组菌丝霉素生物学活性鉴定 | 第58-66页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·抑菌实验 | 第58-59页 |
| ·溶血性实验 | 第59页 |
| ·pH 稳定性实验 | 第59-60页 |
| ·热稳定性实验 | 第60页 |
| ·抗蛋白酶降解性实验 | 第60页 |
| ·实验结果 | 第60-64页 |
| ·菌丝霉素的抑菌活性鉴定 | 第60-62页 |
| ·菌丝霉素的溶血性鉴定 | 第62页 |
| ·菌丝霉素热稳定性鉴定 | 第62页 |
| ·菌丝霉素pH 稳定性鉴定 | 第62-63页 |
| ·菌丝霉素抗蛋白酶水解活性鉴定 | 第63-64页 |
| ·讨论与结论 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第64页 |
| ·结论 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
