摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-10页 |
致谢 | 第10-15页 |
第一章 绪论 | 第15-26页 |
·转基因抗虫植物的研究进展 | 第15-17页 |
·抗虫基因 | 第15-16页 |
·转基因植物的发展 | 第16-17页 |
·昆虫胰蛋白酶抑制因子(TMOF)概述 | 第17-18页 |
·TMOF的发现 | 第17-18页 |
·TMOF的合成和分泌 | 第18页 |
·TMOF的功能和应用 | 第18页 |
·昆虫蜕皮激素受体基因(EcR/USP)概述 | 第18-21页 |
·EcR的结构和功能 | 第19-20页 |
·USP的结构和功能 | 第20-21页 |
·内含子MiRNA(Intronic micro RNA)概述 | 第21-22页 |
·MiRNA简介 | 第21页 |
·内含子MiRNA作用机理 | 第21-22页 |
·RNAi概述 | 第22-25页 |
·RNAi机理 | 第22-24页 |
·RNAi在昆虫中的应用 | 第24-25页 |
·本论文的研究目的与意义 | 第25-26页 |
第二章 TOMF同源基因和棉铃虫蜕皮激素受体基因表达载体的构建 | 第26-47页 |
·材料与方法 | 第26-41页 |
·材料 | 第26-31页 |
·动植物材料 | 第26-27页 |
·载体和菌株 | 第27-29页 |
·主要实验试剂 | 第29页 |
·主要仪器和设备 | 第29页 |
·实验中所用引物 | 第29-31页 |
·方法 | 第31-41页 |
·昆虫总RNA提取 | 第31页 |
·CTAB法抽提植物基因组DNA | 第31-32页 |
·cDNA第一链合成 | 第32页 |
·PCR反应 | 第32-33页 |
·PCR产物的回收 | 第33页 |
·连接反应 | 第33页 |
·转化 | 第33-34页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第34页 |
·质粒DNA提取 | 第34-35页 |
·TMOF同源基因植物表达载体的构建 | 第35-38页 |
·棉铃虫蜕皮激素受体基因EcR,USP的RNAi双价表达载体构建 | 第38-40页 |
·Intronic MiRNA PCAMBIAl301+Aea-TMOF2+ds-EcR植物表达载体的构建 | 第40-41页 |
·结果与讨论 | 第41-45页 |
·TMOF同源基因植物表达载体的构建 | 第41-43页 |
·棉铃虫蜕皮激素受体基因EcR,USP的RNAi双价表达载体构建 | 第43-45页 |
·本章小结 | 第45-47页 |
第三章 TOMF同源基因和棉铃虫蜕皮激素受体基因表达载体的烟草转化. | 第47-56页 |
·材料和方法 | 第47-51页 |
·材料 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-51页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第48页 |
·感受态农杆菌的转化 | 第48-49页 |
·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第49-50页 |
·转基因烟草鉴定 | 第50-51页 |
·TMOF同源物转基因植株的抗虫分析 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·农杆菌转化的鉴定 | 第51-52页 |
·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第52页 |
·转基因烟草鉴定 | 第52-54页 |
·TMOF同源物转基因植株植株抗虫分析 | 第54-55页 |
·本章小结 | 第55-56页 |
第四章 讨论与展望 | 第56-58页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66页 |